多種胺類物質(zhì)參與的蛋氨酸循環(huán)是有助于許多哺乳動物健康的主要途徑之一,其在動物體內(nèi)的多種代謝途徑相互之間有協(xié)同和競爭的關(guān)系,并影響其相應(yīng)的生物學功能,但關(guān)于蛋氨酸循環(huán)的具體代謝機制及生理作用的解釋尚不完整。通過對參與蛋氨酸循環(huán)代謝物質(zhì)的檢測,可以了解該代謝過程,更深層次的理解胺類代謝物在生命活動中的作用和機制。主要內(nèi)容如下:（1）LC-MS是測定胺類代謝物的重要分析技術(shù)之一,但由于胺類的高極性、高水溶性及堿性等特點,使得難以在反相色譜柱中保留,離子抑制效應(yīng)嚴重。為了改善色譜分離及提高靈敏度,利用化學衍生結(jié)合LC-MS對胺類物質(zhì)進行定量分析。本文選取丹磺酰氯為衍生化試劑,考察了最佳衍生條件:p H為9.0,溫度40°C,反應(yīng)20min,不需要催化劑。在此條件下的衍生效率接近100%。通過色譜及質(zhì)譜行為得知:衍生后引入疏水基團有利于色譜分離,引入易質(zhì)子化基團易產(chǎn)生共同碎片離子。衍生后的靈敏度提高了1-3個數(shù)量級,衍生產(chǎn)物能在4°C下穩(wěn)定保存3天。（2）血漿中復(fù)雜的基質(zhì)對胺類的檢測造成了極大干擾。因此,建立了穩(wěn)定同位素結(jié)合LC-MS測定胺類代謝物的新方法。以丹磺酰氯和氘代丹磺酰氯作為一組同位素... 

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語表
第一章 緒論
    1 胺類代謝物概況
        1.1 胺類代謝物的生理功能及檢測意義
        1.2 胺類代謝物檢測技術(shù)研究進展
    2 衍生技術(shù)研究進展
        2.1 衍生技術(shù)概述
        2.2 衍生化試劑
            2.2.1 硅烷化試劑
            2.2.2 酰基化試劑
            2.2.3 烷基化試劑
            2.2.4 其它衍生試劑
        2.3 衍生技術(shù)應(yīng)用進展
            2.3.1 衍生技術(shù)在環(huán)境分析中的應(yīng)用
            2.3.2 衍生技術(shù)在食品分析中的應(yīng)用
            2.3.3 衍生技術(shù)在生物分析中的應(yīng)用
    3 質(zhì)譜分析技術(shù)
        3.1 質(zhì)譜分析技術(shù)簡介
        3.2 三重四級桿質(zhì)譜儀
        3.3 衍生化質(zhì)譜技術(shù)
        3.4 穩(wěn)定同位素標記質(zhì)譜技術(shù)
    4 選題依據(jù)及研究內(nèi)容
        4.1 選題依據(jù)
        4.2 研究內(nèi)容
第二章 胺類代謝物衍生方法的建立
    1 引言
    2 實驗部分
        2.1 試劑
        2.2 儀器
        2.3 實驗方法
            2.3.1 樣品制備
            2.3.2 衍生反應(yīng)
            2.3.3 數(shù)據(jù)采集
    3 結(jié)果與討論
        3.1 衍生條件的優(yōu)化
            3.1.1 時間對衍生反應(yīng)的影響
            3.1.2 溫度對衍生反應(yīng)的影響
            3.1.3 pH對衍生反應(yīng)的影響
            3.1.4 催化劑對衍生反應(yīng)的影響
        3.2 衍生化產(chǎn)物質(zhì)譜碎裂行為比較
        3.3 衍生化產(chǎn)物色譜行為比較
        3.4 衍生與未衍生靈敏度的比較
        3.5 衍生效率
        3.6 衍生化產(chǎn)物的穩(wěn)定性
    4 小結(jié)
第三章 豬血漿中蛋氨酸循環(huán)代謝物的檢測
    1 引言
    2 實驗部分
        2.1 試劑
        2.2 儀器
        2.3 實驗方法
            2.3.1 氘代丹磺酰氯的合成
            2.3.2 豬血漿樣品的前處理
            2.3.3 數(shù)據(jù)采集
    3 結(jié)果與討論
        3.1 DNS-Cl/d6-DNS-Cl的合成
        3.2 豬血漿樣品中衍生條件的優(yōu)化
            3.2.1 豬血漿前處理條件的優(yōu)化
            3.2.2 還原劑TCEP濃度的優(yōu)化
            3.2.3 丹磺酰氯濃度的優(yōu)化
        3.3 豬血漿樣品中的色譜行為比較
        3.4 方法學考察
        3.5 豬血漿中不同蛋氨酸水平對其相關(guān)代謝物水平的影響分析
    4 小結(jié)
結(jié)論與展望
    1 總結(jié)
    2 展望
參考文獻
學術(shù)成果
致謝



本文編號：3670875