合格的食用油中是不會含有辣椒堿,而地溝油大部分都是餐飲廢棄油,如果在烹飪過程中加入了辣味調(diào)料等物質(zhì),尤其是牛油火鍋中,則油脂中一定會有辣椒堿物質(zhì)的存在。因為辣椒堿的自身具備的一些特性例如親脂、穩(wěn)定和沸點高,這些特性決定了即使精煉地溝油也很難分離出辣椒堿,因此可以將辣椒堿作為鑒別食用油是否為地溝油的特異性指標。因此,本文建立了三種不同的免疫側向層析法來檢測食用油中的辣椒堿:（1）傳統(tǒng)型免疫側向層析試紙食用油中辣椒堿檢測方法的建立本方法的原理在于毛細管側向層析和抗原抗體免疫識別相結合,利用抗體可以通過靜電吸附與納米金粒子表面偶聯(lián)結合,NC膜上的C線上固定羊抗鼠二抗,T線上固定辣椒堿抗原,一般通過NC膜上T線和C線是否顯色來判斷食用油中辣椒堿的存在情況,同時與灰度掃描結果結合來對辣椒堿的含量進行定量分析。在可行性研究的基礎上優(yōu)化金納米粒子與抗體偶聯(lián)量、偶聯(lián)p H、重懸液、樣品墊處理液和上樣稀釋緩沖液,得出最佳實驗方案,并檢測傳統(tǒng)型辣椒堿試紙條的特異性和靈敏度。在最佳實驗條件下,可以在10 min內(nèi)完成對辣椒堿含量的檢測。肉眼觀察試紙條的靈敏度為100μg/L,標準曲線檢測線性范圍為10-10... 

【文章來源】：合肥工業(yè)大學安徽省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 辣椒堿的理化性質(zhì)及其檢測的意義
    1.2 膠體金納米粒子在免疫側向層析中的應用
    1.3 時間分辨熒光免疫層析分析技術的應用
    1.4 地溝油檢測鑒別的國內(nèi)外現(xiàn)狀
        1.4.1 國外地溝油的研究現(xiàn)狀
        1.4.2 國內(nèi)地溝油的研究現(xiàn)狀
    1.5 論文研究內(nèi)容及意義
第二章 膠體金免疫側向層析食用油中辣椒堿檢測方法建立
    2.1 膠體金免疫側向層析辣椒堿檢測原理
    2.2 實驗主要試劑材料和設備
        2.2.1 主要試劑材料
        2.2.2 主要設備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 實驗所需緩沖液及處理液配制
        2.3.2 金納米粒子的制備
        2.3.3 辣椒堿抗體與金納米粒子偶聯(lián)成功的表征
        2.3.4 免疫側向層析試紙的制備
        2.3.5 實際樣品食用油脂中辣椒堿的檢測步驟
        2.3.6 金納米粒子與辣椒堿單克隆抗體偶聯(lián)
        2.3.7 膠體金免疫側向層析試紙反應體系優(yōu)化
        2.3.8 特異性檢測
        2.3.9 試紙條的檢測與標準曲線建立
    2.4 結果與討論
        2.4.1 金納米粒子制備及與抗體偶聯(lián)表征結果
        2.4.2 金納米粒子與辣椒堿抗體偶聯(lián)量優(yōu)化試紙結果
        2.4.3 偶聯(lián)時碳酸鉀添加量優(yōu)化試紙結果
        2.4.4 偶聯(lián)后重懸液種類優(yōu)化試紙結果
        2.4.5 樣品墊處理液成分的優(yōu)化
        2.4.6 上樣稀釋緩沖液的優(yōu)化
        2.4.7 特異性檢測試紙結果
        2.4.8 試紙條的檢測與標準曲線建立
    2.5 小結
第三章 改良型免疫側向層析辣椒堿檢測方法建立
    3.1 改良型免疫側向層析食用油中辣椒堿檢測原理
    3.2 實驗主要試劑材料和設備
        3.2.1 主要試劑材料
        3.2.2 主要設備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 金納米粒子與抗體偶聯(lián)量優(yōu)化
        3.3.2 金納米粒子與抗體偶聯(lián)時封閉物的優(yōu)化
        3.3.3 金納米粒子與辣椒堿抗體偶聯(lián)重懸液優(yōu)化
        3.3.4 96孔板微孔中金納米粒子與抗體偶聯(lián)物滴加量的優(yōu)化
        3.3.5 96孔板微孔中冷凍干燥物與待測液預孵育時間的優(yōu)化
        3.3.6 試紙條的檢測與標準曲線建立
        3.3.7 改良型試紙條實際樣品的檢測
        3.3.8 改良型試紙條實際樣品的估量檢測
    3.4 結果與討論
        3.4.1 金納米粒子與抗體偶聯(lián)量優(yōu)化
        3.4.2 金納米粒子與抗體偶聯(lián)時封閉物的優(yōu)化
        3.4.3 金納米粒子與辣椒堿抗體偶聯(lián)重懸液優(yōu)化
        3.4.4 96孔板微孔中金納米粒子與抗體偶聯(lián)物滴加量的優(yōu)化
        3.4.5 96孔板微孔中冷凍干燥物與待測液預孵育時間的優(yōu)化
        3.4.6 改良型試紙條的檢測與標準曲線建立
        3.4.7 改良型試紙條實際樣品的檢測
        3.4.8 改良型試紙條實際樣品的估量檢測
    3.5 小結
第四章 基于時間分辨熒光微球標記的免疫側向層析食用油中辣椒堿檢測方法建立
    4.1 時間分辨熒光微球免疫側向層析食用油中辣椒堿檢測原理
    4.2 實驗主要試劑材料和設備
        4.2.1 主要試劑材料
        4.2.2 主要設備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 主要試劑的配制
        4.3.2 時間分辨熒光微球與辣椒堿單克隆抗體偶聯(lián)
        4.3.3 基于時間分辨熒光委屈的免疫側向層析試紙反應體系優(yōu)化
        4.3.4 特異性檢測
        4.3.5 試紙條的檢測與標準曲線建立
    4.4 結果與討論
        4.4.1 基于時間分辨熒光委屈的免疫側向層析試紙反應體系優(yōu)化
    4.5 小結
第五章 結論與展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間的學術活動及成果清單


【參考文獻】：
期刊論文
[1]液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測食用油中辣椒堿類化合物[J]. 薛瑾,孫彥敏,張金秋,陶飛,徐春祥.  食品安全質(zhì)量檢測學報. 2018(22)
[2]利用液相-質(zhì)譜法檢測食用油中辣椒素的分析與探討[J]. 張昆嫻.  食品安全導刊. 2018(20)
[3]基于免疫磁分離的熒光微球免疫層析法檢測豬霍亂沙門氏菌[J]. 黃震,夏詩琪,劉道峰,劉成偉,賴衛(wèi)華.  分析化學. 2017(02)
[4]膠體金在地溝油快速檢測中的創(chuàng)新應用[J]. 季曉鋒,陳花蕊.  化學教育. 2016(21)
[5]超聲輔助提取辣椒中辣椒素的分析與研究[J]. 李俞潔,曾令浩,區(qū)碩俊.  當代化工. 2016(10)
[6]地溝油的分析鑒別方法分析[J]. 陳麗花,郝德蘭,朱楚楚,榮玉芝,李彬,張藝嬌.  食品安全導刊. 2016(27)
[7]液相色譜-同位素稀釋質(zhì)譜法檢測食用油中辣椒堿類化合物[J]. 國振,李秀琴,高方園,張慶合,李紅梅.  化學試劑. 2016(06)
[8]選擇離子流動管質(zhì)譜法測定油脂中的呋喃[J]. 黃雪松,王超,段翰英.  食品安全質(zhì)量檢測學報. 2015(12)
[9]地溝油鑒別檢測方法研究進展[J]. 王嵬,劉連利,儀淑敏.  食品安全質(zhì)量檢測學報. 2015(01)
[10]地溝油鑒別技術的研究進展[J]. 陳明東,盧健斌,姜逸竹,李敏.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2015(01)

碩士論文
[1]改良型免疫側向層析瘦肉精萊克多巴胺檢測新方法研究[D]. 宋清.合肥工業(yè)大學 2019
[2]基于時間分辨熒光免疫層析快速定量檢測降鈣素原（PCT）試劑的研究[D]. 邵向陽.南方醫(yī)科大學 2018
[3]改進型免疫側向層析三聚氰胺檢測方法研究[D]. 鐘友好.合肥工業(yè)大學 2017



本文編號：3637171