發(fā)布時間：2021-05-28 15:55

　　過氧亞硝酸根（ONOO^-）和次氯酸（HOCl）是生物體內(nèi)重要的活性氧化物,在維持細胞內(nèi)的氧化還原平衡過程中扮演者重要的角色,脂滴（Lipid Droplets;LDs）是重要的生物細胞器,在調(diào)節(jié)細胞能量穩(wěn)態(tài),保護細胞免受脂凋亡過程中起著重要的作用。以上生物活性物質(zhì)和亞細胞器在生物體內(nèi)的產(chǎn)生、分布及濃度或數(shù)量變化是維持新陳代謝穩(wěn)定和引發(fā)疾病的關(guān)鍵。有機小分子熒光探針具有靈敏度高、特異性好、生物毒性低等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于生物標志物檢測、生物成像等多種研究領(lǐng)域。本論文圍繞細胞內(nèi)ONOO^-、HOCl和LDs的可視化檢測,設(shè)計合成了四種有機小分子熒光探針,詳細研究了它們的光學性能及生物成像性能,具體內(nèi)容和結(jié)果如下:1.基于TICT機理設(shè)計構(gòu)建以香豆素為熒光團,二酮為識別基團的ONOO^-熒光探針ZL-1。通過高分辨質(zhì)譜,探究了ZL-1的識別機理。在模擬生理環(huán)境下,ZL-1可以在1 min內(nèi)識別ONOO^-,不受生物基質(zhì)和其他活性物質(zhì)的干擾,檢測限為19.3 n M。ZL-1具有低的細胞毒性,被成功應(yīng)用于活細胞內(nèi)、... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

熒光探針識別機理概念圖

第二章基于二酮氧化的ONOO熒光探針的設(shè)計合成及生物成像24圖2.2探針與ONOO反應(yīng)前后的熒光光譜圖2.3.2pH對探針ZL-1識別ONOO的影響pH不僅會影響到探針自身的熒光，也影響到探針與待測物之間的化學反應(yīng)，為了探討pH對體系檢測的影響，在pH=2-12的PBS緩沖溶液加入相同濃度（100μM）的ONOO，測試ZL-1在不同pH體系中的熒光強度。如圖2.3所示。探針ZL-1在pH=2-12的緩沖溶液中熒光無明顯變化，表明ZL-1幾乎不受pH的影響。加入ONOO后，體系熒光強度隨pH的增加而增加，pH超過9時，熒光強度開始下降，在生理環(huán)境范圍內(nèi)，體系的熒光呈現(xiàn)出靈敏的響應(yīng)。實驗結(jié)果表明ZL-1可以實現(xiàn)生理環(huán)境條件中ONOO的檢測。圖2.3ZL-1加入ONOO前后pH對體系熒光強度的影響

第二章基于二酮氧化的ONOO熒光探針的設(shè)計合成及生物成像24圖2.2探針與ONOO反應(yīng)前后的熒光光譜圖2.3.2pH對探針ZL-1識別ONOO的影響pH不僅會影響到探針自身的熒光，也影響到探針與待測物之間的化學反應(yīng)，為了探討pH對體系檢測的影響，在pH=2-12的PBS緩沖溶液加入相同濃度（100μM）的ONOO，測試ZL-1在不同pH體系中的熒光強度。如圖2.3所示。探針ZL-1在pH=2-12的緩沖溶液中熒光無明顯變化，表明ZL-1幾乎不受pH的影響。加入ONOO后，體系熒光強度隨pH的增加而增加，pH超過9時，熒光強度開始下降，在生理環(huán)境范圍內(nèi)，體系的熒光呈現(xiàn)出靈敏的響應(yīng)。實驗結(jié)果表明ZL-1可以實現(xiàn)生理環(huán)境條件中ONOO的檢測。圖2.3ZL-1加入ONOO前后pH對體系熒光強度的影響


本文編號：3208330