非特異性過氧合酶（Unspecific Peroxygenase,UPO）是一類以亞鐵血紅素為催化活性中心、可催化多種不同類型選擇性氧化反應(yīng)的氧化還原酶。UPO催化反應(yīng)過程不依賴昂貴的輔酶因子,能夠在溫和條件下,利用H₂O₂高效催化芳環(huán)類物質(zhì)中惰性C-H鍵羥化、C=C雙鍵環(huán)氧化等反應(yīng),合成一系列芳環(huán)類含氧化合物,在香精香料、醫(yī)藥保健品等領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用潛力。但目前UPO催化存在氧化劑H₂O₂造成UPO酶結(jié)構(gòu)破壞,進(jìn)而導(dǎo)致酶失活等問題,限制了UPO的大規(guī)模應(yīng)用。探索適用于UPO的高效催化體系,是解決上述難題的有效途徑之一。本課題構(gòu)建了氯化膽堿系列天然低共熔溶液（NADES）中膽堿氧化酶（Choline Oxidase,Ch Ox）催化氯化膽堿在線生成H₂O₂的反應(yīng)體系,通過H₂O₂的緩慢釋放維持體系中H₂O₂濃度在可高效催化且不破壞酶活性的穩(wěn)定水平;其次,在該體系中實(shí)現(xiàn)... 

【文章來源】：華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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摘要
Abstract
主要符號(hào)表
第一章 緒論
    1.1 過氧化氫驅(qū)動(dòng)氧化酶的概述
        1.1.1 水解酶
        1.1.2 過氧化物酶
    1.2 UPO酶的概述
        1.2.1 UPO催化羥基化反應(yīng)的概述
        1.2.2 UPO催化環(huán)氧化反應(yīng)的概述
        1.2.3 UPO催化磺化反應(yīng)的概述
    1.3 UPO催化應(yīng)用中存在的問題概述
2O₂對(duì)UPO穩(wěn)定性和催化效率的影響">        1.3.1 氧化劑H₂O₂對(duì)UPO穩(wěn)定性和催化效率的影響
        1.3.2 反應(yīng)溶劑對(duì)UPO穩(wěn)定性和催化效率的影響
2O₂在線生成的研究進(jìn)展">    1.4 H₂O₂在線生成的研究進(jìn)展
2O₂">        1.4.1 光化學(xué)法在線生成H₂O2

        1.4.2 光-電化學(xué)法在線生成H₂O₂

        1.4.3 酶法在線生成H₂O₂

    1.5 天然低共熔溶劑的研究進(jìn)展
        1.5.1 天然低共熔溶劑的概述
        1.5.2 天然低共熔溶劑對(duì)酶穩(wěn)定作用的概述
2O₂ 的概述">        1.5.3 NADES中膽堿氧化酶AnChOx催化氯化膽堿在線生成H₂O₂ 的概述
    1.6 本課題研究意義及研究內(nèi)容
        1.6.1 本課題研究意義
        1.6.2 本課題研究內(nèi)容
        1.6.3 本課題研究的技術(shù)路線
2O₂ 在線生成體系的構(gòu)建">第二章 NADES溶液中AnChOx介導(dǎo)的H₂O₂ 在線生成體系的構(gòu)建
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 培養(yǎng)基及相關(guān)溶液的配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 AnChOx的表達(dá)與純化
        2.3.2 AnChOx蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定
2O₂ 的檢測(cè)">        2.3.3 NADES溶液中AnChOx催化產(chǎn)生H₂O₂ 的檢測(cè)
2O₂ 在線生成反應(yīng)的研究">        2.3.4 NADES溶液中AnChOx介導(dǎo)的H₂O₂ 在線生成反應(yīng)的研究
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 AnChOx的表達(dá)與純化
2O₂ 在線生成反應(yīng)的研究">        2.4.2 NADES溶液中AnChOx介導(dǎo)的H₂O₂ 在線生成反應(yīng)的研究
    2.5 本章小結(jié)
第三章 NADES溶液中AnChOx與 rAaeUPO酶聯(lián)催化芳環(huán)類物質(zhì)選擇性氧化反應(yīng)的研究
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 rAaeUPO催化反應(yīng)底物及其反應(yīng)產(chǎn)物的檢測(cè)分析
        3.3.2 NADES溶液中AnChOx及 rAaeUPO酶聯(lián)催化乙基苯羥基化反應(yīng)的建立
        3.3.3 NADES溶液中AnChOx及 rAaeUPO酶聯(lián)催化順-β-甲基苯乙烯環(huán)氧化反應(yīng)的建立
        3.3.4 NADES溶液中AnChOx及 rAaeUPO酶聯(lián)催化甲基苯基硫醚磺化反應(yīng)的建立
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 NADES溶液中AnChOx及 rAaeUPO酶聯(lián)催化乙基苯羥基化反應(yīng)的建立
        3.4.2 NADES溶液中AnChOx及 rAaeUPO酶聯(lián)催化順-β-甲基苯乙烯環(huán)氧化反應(yīng)的建立
        3.4.3 NADES溶液中AnChOx及 rAaeUPO酶聯(lián)催化甲基苯基硫醚磺化反應(yīng)的建立
    3.5 本章小結(jié)
第四章 NADES溶液對(duì)rAaeUPO穩(wěn)定機(jī)理初探
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 溶劑類型對(duì)rAaeUPO酶活力影響的測(cè)定
        4.3.2 不同溶劑中rAaeUPO分子模擬分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 溶劑類型對(duì)rAaeUPO酶活力影響的測(cè)定
        4.4.2 不同溶劑中rAaeUPO分子模擬分析
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    一、主要結(jié)論
    二、本研究的創(chuàng)新之處
    三、展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]天然低共熔溶劑中環(huán)氧化油脂的酶法制備及其應(yīng)用研究[D]. 張?zhí)煊?華南理工大學(xué) 2019
[2]酶法制備二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸單乙醇酰胺[D]. 梁慧培.華南理工大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3154499

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