硫化氫（H2S）、半胱氨酸（Cys）、同型半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH）是重要的生物巰基化合物,這些生物分子可以維持細(xì)胞內(nèi)的氧化還原動態(tài)平衡,參與多種生理病理過程,其代謝水平異常與多種疾病密切相關(guān),可以作為某些疾病的標(biāo)志物,因此生物巰基化合物的區(qū)分檢測及其生理功能的研究具有重要的生理學(xué)和醫(yī)學(xué)意義。熒光探針方法可以原位、實時和可視化檢測目標(biāo)分析物,操作簡便、生物相容性高。盡管已報道了許多熒光探針用于檢測以上生物分子,但是用于特異性檢測其中一種或兩種,并研究其內(nèi)在聯(lián)系的熒光探針還鮮有報道。為此,利用巰基的強親核性,本文以硝基苯并呋咱（NBD）-硫醚基/醚基/胺基為反應(yīng)識別基團(tuán),開發(fā)了一系列區(qū)分檢測生物巰基化合物的熒光分子探針�；贜BD硫醚基與巰基的快速硫解反應(yīng),本文首先設(shè)計合成了雙顏色NBD-S-羅丹明熒光探針1,該探針與GSH/H2S反應(yīng)后發(fā)出紅色熒光,與Cys/Hcy反應(yīng)后發(fā)出綠色和紅色熒光,可以通過兩種顏色通道特異性檢測四種生物巰基化合物和Cys/Hcy。此外,探針1還具有高選擇性和靈敏度,可以在毫摩爾級GSH存在條件下特異性檢測人體活纖維肉瘤細(xì)胞中的 Cys/Hcy。為了... 

【文章來源】：北京化工大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２酶促合成Ｈ２Ｓ的示意圖［５１??Ｆｉｇ．?１－２?Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｏｆ?出兮卜１??

?Ｃｙｓｔｅｆｎｅｓｕｌｆｉｎａｔｅ??Ａｓｐａｒｔａｔｅ?ａｍｉｎｏｔｒａｆｖｆｅｒａｓＱ?Ｃｙｓｔｅｋ＼ｅｓｕ＾ｉｎａｔ＆?ｄｅｃａｒｂｏｘｙｆａｓｏ??Ｓ０ａ－１?ｃ〇２?Ｓ０２－??ｆ°?ｚ?＼ｌｕｔａｍａｔｅ?＼?卜??ｃｏｏ－?ｍ３＊??３－Ｓｕｉｔｉｎｙｌｐｙｒｕｖａｔｅ?Ｈｙｐｏｔａｕｒｆｎｅ??人?廣。＊??ｃｎ３?ｆ??ｃ＝０?ＳＯａ?（Ｓ０ａ＾）??ｃｏｏ－?，??Ｐｙｒｕｖａｔｅ?＋?Ｓｕｌｆｉｔｅ?ＮＨ：Ｓ??Ｔａｕｒｉｎｅ??圖１－３?Ｃｙｓ的代謝途徑［１３］??Ｆｉｇ．?１－３?Ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｃｙｓｔｅｉｎｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ１１，１??Ｈｅｙ是蛋氨酸和Ｃｙｓ代謝過程中一個重要的中間產(chǎn)物，它是通過蛋氨酸脫甲基形??成的一種含有巰基的氨基酸，通過反甲基化和反硫酸化的途徑影響細(xì)胞功能，其本身??并不參與蛋白質(zhì)合成，以還原態(tài)或氧化態(tài)的形式被運輸?shù)窖褐校郏保福�。Ｈｅｙ人體在氧化??還原穩(wěn)態(tài)中也起著至關(guān)重要的作用。研宄表明，健康人體血清中Ｈｅｙ的正常濃度水平??在５－１５?ｎＭ范圍內(nèi)［１９］，而血清中Ｈｅｙ的濃度水平超過１５?則會導(dǎo)致高同型半胱氨??酸血癥（又稱為同型半胱氨酸尿癥）［２Ｇ］；?Ｈｅｙ也被認(rèn)為是心血管疾�。ǎ茫郑模┑莫毩�??危險因素，該疾病的發(fā)生是由于Ｈｅｙ能直接或間接導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，促進(jìn)血??管平滑肌細(xì)胞增殖，增強血小板功能，患者可能會出現(xiàn)廣泛性冠狀動脈粥樣硬化，可??因靜脈血栓形成和血栓栓塞性疾病導(dǎo)致死亡［２１］；血漿中Ｈｅｙ的濃度升高也會導(dǎo)致人體??產(chǎn)生認(rèn)知功能障礙，嚴(yán)重者會導(dǎo)致阿爾茨海默氏并神經(jīng)管畸形和精神障礙在內(nèi)的多??種神經(jīng)

?第一章緒論???子受體之間的質(zhì)子轉(zhuǎn)移［３４］。??！?ｔ?ｔ?！??：（ａ）?熒光基團(tuán)＿一＂電子給體）?＿電子給體ｉ??丨……?…Ｔ?…丨??；（ｂ）?ｆ給電子＊突光細(xì)－吸好＊＇給好基－突光麵－吸電子基：：丨??？?．?－－？？？?＊?Ｉ??ｉ?Ｓ?迚－Ｊ??ｚ＾ＲＥＴ、?Ｉ??＾?，供體＾＾＞?，供體受體、｜??！?＿?ｌ－１０ｎｍ?＿?＞１０ｎｍ??、?＾＾?？?Ｘ??圖１－４光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移（ａ），分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移（ｂ），熒光共振能量轉(zhuǎn)移（ｃ）效應(yīng)示意圖??Ｆｉｇ．?１－４?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＰＥＴ?（ａ），?ＩＣＴ?（ｂ），?ＦＲＥＴ?（ｃ）?ｅｆｆｅｃｔ??１．３?ＮＢＤ基熒光探針的研究進(jìn)展??ＮＢＤ是４－氯－７－硝基－苯并呋咱的衍生化合物，ＮＢＤ衍生物具有摩爾吸光系數(shù)大的??優(yōu)點，是一種重要的熒光基團(tuán)。２０１３年我們首次發(fā)現(xiàn)了?ＮＢＤ－胺的快速硫解反應(yīng)，并??成功開發(fā)了?Ｈ２Ｓ熒光探針［３５］；同年Ｐｌｕｔｈ課題組發(fā)現(xiàn)ＮＢＤ－ＳＨ具有的獨特的紅色（我??們命名“Ｐｌｕｔｈ紅”），并設(shè)計了一種比例計量型的Ｈ２Ｓ熒光探針［３６］。因此我們認(rèn)為ＮＢＤ－??胺／醚／硫醚基的硫解可用于熒光探針的開發(fā)與應(yīng)用（圖１－５），例如，基于ＮＢＤ基的??熒光探針由于諸如ＦＲＥＴ淬滅效應(yīng)的作用而不顯示熒光，而與Ｈ２Ｓ反應(yīng)后釋放出熒光??團(tuán)的熒光，并且ＮＢＤ部分顯示出獨特的？１也１１紅［３７】。??〇，??〇?Ｄｏｎｏｒ?ｘｈ??〇?ｏ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?????Ｘ?＝?Ｎ，?０，?Ｓ?／?＼?ｃｏ＾ｏｒ??——ｒｉｇｉｄ?ｌｉｎ


本文編號：3136100