本文關鍵詞：檢測次氯酸的熒光探針合成與應用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：活性氧是生物體生命活動中正常氧代謝的副產(chǎn)物,在生物體的各種生理和病理過程中起著重要作用。到目前為止,對生物體內(nèi)氧化還原平衡的活性物種實時監(jiān)測,仍然是關系到生理和病理研究的重大問題和挑戰(zhàn)。在多種生物檢測技術手段之中,有機小分子探針以其高靈敏度、專一選擇性、非侵入式及操作簡便等優(yōu)勢,加上熒光共聚焦顯微成像技術實現(xiàn)對生物體內(nèi)活性分子的實時在線監(jiān)測,已成為高時空分辨率檢測活體內(nèi)生理活性物種的強大生物化學工具。近年來,受到了人們的廣泛關注。本論文首次報道了幾種新型有機小分子熒光探針的設計、合成,并成功將其應用于酶活性檢測及活細胞熒光成像。本論文基于有機小分子熒光探針與生物體內(nèi)活性氧物種的選擇性響應,探針的熒光光譜發(fā)生改變,從而實現(xiàn)對該活性氧物種的檢測,成功將其用于活細胞的可視化熒光成像。本文主要開展了兩方面的研究工作。(1)基于花菁骨架的含硫近紅外熒光探針用于次氯酸的檢測設計合成了基于七甲川花菁染料(Cy7-Cl)的近紅外熒光探針Cy-Nph S。探究了該探針的光譜性能,Cy-Nph S表現(xiàn)出了特異的選擇性和較高的靈敏度,成功應用于酶活性檢測和活細胞內(nèi)活性氧的檢測。(2)基于熒光素骨架熒光探針的設計合成及生物應用模擬谷胱甘肽過氧化物酶GPx的活性中心—硒半胱氨酸,以熒光素和2,7-二氯熒光素為母體,設計合成了用于可逆檢測次氯酸的熒光探針1和2。在模擬生理條件下,探究這兩個探針的光譜性能。與次氯酸作用前后,熒光顯著增強;對其他一些活性氧物種幾乎沒有響應。它們表現(xiàn)出選擇性專一、靈敏度高、響應迅速、可逆響應的優(yōu)點。同時,借助于熒光共聚焦顯微成像技術,把這兩個探針成功用于活細胞內(nèi)次氯酸的可視化熒光成像。
【關鍵詞】：次氯酸 熒光探針 氧化還原可逆 熒光成像
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 1 引言10-29
• 1.1 活性氧的產(chǎn)生機理及生理作用10
• 1.2 活性氧的檢測技術10-12
• 1.3 熒光生物成像技術12-14
• 1.3.1 簡介12
• 1.3.2 熒光探針12-14
• 1.4 熒光探針的設計原理14-16
• 1.4.1 光誘導電子轉移15
• 1.4.2 光誘導分子內(nèi)電荷轉移15-16
• 1.4.3 熒光共振能量轉移16
• 1.5 檢測HClO/ClO-的熒光探針16-29
• 1.5.1 直接氧化反應17-19
• 1.5.2 碳氮雙鍵的斷裂19-22
• 1.5.3 螺環(huán)開環(huán)氧化及水解反應22-24
• 1.5.4 熒光團去保護24-25
• 1.5.5 氧化還原可逆熒光探針25-29
• 2 基于花菁骨架的含硫近紅外熒光探針用于次氯酸的檢測29-40
• 2.1 引言29-30
• 2.2 實驗部分30-33
• 2.2.1 實驗試劑和表征30
• 2.2.2 吸收光譜和熒光光譜30-31
• 2.2.3 細胞培養(yǎng)31
• 2.2.4 化合物的合成與表征31-33
• 2.3 結果與討論33-39
• 2.3.1 反應機理推測33
• 2.3.2 熒光探針Cy7-NphS的光譜性質(zhì)33-34
• 2.3.3 熒光探針Cy7-NphS的熒光滴定實驗34-35
• 2.3.4 熒光探針Cy7-NphS對次氯酸響應的線性曲線及檢出限35
• 2.3.5 pH值對Cy7-NphS熒光強度的影響35-36
• 2.3.6 熒光探針Cy7-NphS對活性氧物種的選擇性響應36-37
• 2.3.7 熒光探針Cy7-NphS的生物應用37-39
• 2.4 結論39-40
• 3 基于熒光素骨架熒光探針的合成及生物應用40-54
• 3.1 引言40-41
• 3.2 實驗部分41-44
• 3.2.1 實驗試劑與表征41
• 3.2.2 吸收光譜和熒光光譜41-42
• 3.2.3 激光共聚焦顯微鏡42
• 3.2.4 細胞培養(yǎng)42
• 3.2.5 MTT實驗42-43
• 3.2.6 化合物的合成與表征43-44
• 3.3 結果與討論44-51
• 3.3.1 反應機理推測44
• 3.3.2 熒光探針1和探針2的光譜性質(zhì)44-45
• 3.3.3 熒光探針1和探針2的熒光滴定實驗45-47
• 3.3.4 熒光探針1和探針2對次氯酸響應的線性曲線及檢測限47-48
• 3.3.5 pH對探針熒光強度的影響48-49
• 3.3.6 熒光探針對活性氧物種的選擇性響應49
• 3.3.7 熒光探針的動力學曲線49-50
• 3.3.8 熒光探針的氧化還原循環(huán)50-51
• 3.4 熒光探針的生物應用51-53
• 3.4.1 檢測活細胞外加和內(nèi)生次氯酸51-52
• 3.4.2 MTT實驗52-53
• 3.5 結論53-54
• 4 總結與展望54-55
• 符號說明55-56
• 參考文獻56-65
• 附錄65-66
• 致謝66-67
• 攻讀碩士期間的研究成果67

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1 樊江莉,彭孝軍,吳云扣,高尚;生物應用鋅(Ⅱ)熒光探針研究進展[J];化學研究與應用;2005年02期

2 孫俊永;黃克靖;劉彥明;袁紅霞;謝宛珍;;分子熒光探針在一氧化氮分析中的應用進展[J];信陽師范學院學報(自然科學版);2008年01期

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本文編號：313478