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毛細(xì)管陣列電泳-掩模式激光誘導(dǎo)熒光檢測器的研制與應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2021-03-30 22:03
  快速、高效、高通量、低耗能、環(huán)保的分析手段一直是人們追求的目標(biāo)。毛細(xì)管電泳(Capillary Electrophoresis,CE)作為一種高精準(zhǔn)分析手段,因其具有高效性、快速、微量、多模式、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)勢,得到迅速發(fā)展。隨著科學(xué)研究不斷深入,出現(xiàn)的高通量毛細(xì)管陣列電泳(Array Capillary Electrophoresis,CAE)得到青睞;因其除了具有單通道CE優(yōu)點外,還具有多個樣品同時分析,快速確定樣品的種類、結(jié)構(gòu)、特性等優(yōu)點。但是目前CAE尚存在亟需改善的之處,比如通道信號定位分類困難、通道之間信號彼此干擾、采樣率低等問題。鑒于此,本文研制了一種新型掩模式激光誘導(dǎo)熒光檢測器的CAE,并對其性能進(jìn)行了驗證評估;最后采用新研制的CAE檢測器,成功實現(xiàn)了一些實際樣品的分析應(yīng)用。本論文包含以下四個主要部分:1.緒論:簡單回顧與簡述了CAE的研究進(jìn)展、原理、電泳分離模式等。主要介紹了CAE的分類;每種類型的CAE的特點。目前,主要是根據(jù)檢測器不同進(jìn)行分類,其中主要有紫外-可見吸收檢測器的CAE、時間分辨熒光檢測器的CAE、激光誘導(dǎo)熒光檢測器的CAE等;并且針對CAE在各個領(lǐng)域的應(yīng)用... 

【文章來源】:廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:96 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

毛細(xì)管陣列電泳-掩模式激光誘導(dǎo)熒光檢測器的研制與應(yīng)用研究


毛細(xì)管電泳電泳原理圖

電泳圖,毛細(xì)管陣列電泳,電泳


廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文41.2毛細(xì)管陣列電泳類型與檢測方式Mathies[7]提出的CAE,并且成功應(yīng)用于人類基因工程;相關(guān)研究表明其使工作效率提高了8倍。Mathies等人采用了共聚焦光路系統(tǒng),將25根毛細(xì)管排列在可以被程序精準(zhǔn)控制的移動平臺上。每個毛細(xì)管的信號通過共聚焦光路傳送到檢測器上;檢測器原理示意圖1-2。自此,隨著電子硬件的飛快發(fā)展,科研工作者研發(fā)出了多種類型的CAE。在多方面優(yōu)化光路系統(tǒng),從而提高靈敏度。同時,也開發(fā)出多種檢測方式的CAE滿足不同檢測條件需求;目前主要應(yīng)用于基因測序、基因多態(tài)分析,還有聚合酶鏈反應(yīng)分析、組合化學(xué)分析等。不過這些CAE的核心區(qū)別是在檢測系統(tǒng)。CE的檢測器比較豐富,主要有紫外-可見分光吸收檢測、電化學(xué)檢測、LIF檢測、質(zhì)譜檢測、拉曼光譜法檢測、化學(xué)發(fā)光檢測等。但CAE的檢測器相對少一點,主要有CAE-LIF檢測方法、CAE-紫外-可見吸收檢測方法、CAE-LIF時間分辨檢測方法等。下面對這幾種檢測類型逐一介紹。圖1-2首臺電泳毛細(xì)管陣列電泳儀Fig.1-2Sketchdiagramofthefirstcapillaryarrayelectrophoresis

角度分布,毛細(xì)管,入射光,毛細(xì)管陣列電泳


廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文51.2.1毛細(xì)管陣列電泳紫外-可見吸收檢測Gong和Yeung首次提出將紫外吸收檢測應(yīng)用于CAE。該CAE有96個通道,用并且用鎢絲燈或汞絲燈作為光源;1024個光電二極管陣列元件同時檢測所有通道。最后采用CZE和MEKC去驗證CAE。每個通道的分離檢測效果都相近。對羅丹明6G的LOD達(dá)到1.8×10-8M(S/N=2)[24]。2016年,劉馬禾發(fā)明一種紫外-可見吸收檢測的CAE[25]。其原理如圖1-3,通過旋轉(zhuǎn)反射鏡,將光源入射到特定傾斜角度的光纖內(nèi),照在毛細(xì)管上并穿過后,對應(yīng)的接收光纖探頭接收后傳送到檢測器上;而入射光纖圓型均勻排布在特定的位置,反射鏡周而復(fù)始旋轉(zhuǎn),達(dá)到檢測所有毛細(xì)管。采用紫外吸收檢測的CAE,穩(wěn)定性較好;其應(yīng)用檢測對象較多,因為較多化合物都有紫外吸收。但是由于毛細(xì)管的內(nèi)徑較孝進(jìn)樣量較少,紫外吸收光程較短,紫外-可見吸收檢測在毛細(xì)管電泳上的發(fā)揮不出其最佳性能,導(dǎo)致其靈敏度較差,再加上CAE存在定位難等問題。所以,紫外吸收檢測CAE一直停留在實驗室研究階段。圖1-3紫外吸收檢測毛細(xì)管陣列電泳(1)紫外或可見光光源,(2)單根光源入射光纖,(3)入射光纖軸心固連件,(4)光線,(5)凹面反射鏡,(6)轉(zhuǎn)動電機(jī),(7)轉(zhuǎn)動編碼器,(8)反射光示意線,(9)光纖特定角度分布固定器,(10)多根入射光纖組,(11)陣列毛細(xì)管窗口對準(zhǔn)器固定端,(12)毛細(xì)管陣列,13多根接收光纖組,(14)毛細(xì)管窗口對準(zhǔn)器瞄準(zhǔn)端,(15)取樣光電探測器,(16)參考光纖,(17)參考光電探測器,(18)高速數(shù)據(jù)采集單元,(19)總控制和數(shù)據(jù)處理及傳輸,(20)電機(jī)驅(qū)動和轉(zhuǎn)動解碼器,(21)電腦工作站Fig.1-3Sketchdiagramofcapillaryarrayelectrophoresis-ultravioletabsorptiondetector

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]共價有機(jī)聚合物固相萃取/高效液相色譜法測定面粉中3種熒光[J]. 丁惠.  現(xiàn)代面粉工業(yè). 2019(01)
[3]毛細(xì)管區(qū)帶電泳-間接紫外檢測法測定飲用水中5種陰離子[J]. 王心宇,田佩瑤,王萍,丁曉靜.  中國食品衛(wèi)生雜志. 2019(01)
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[5]水蒸氣蒸餾-活性炭柱固相萃取/GC-MS/MS法測定火腿中8種N-亞硝胺[J]. 夏曉楠,王宗義,趙依芃,尹雪,韓濤.  分析試驗室. 2015(12)
[6]活性炭固相萃取/膠束電動色譜聯(lián)用技術(shù)用于雷公藤3種有效成分的測定[J]. 蔣銀燕,郭麗娟,崔小瑩,王翠瓊,胡小建,李建明.  分析測試學(xué)報. 2015(02)
[7]全基因組測序及其在遺傳性疾病研究及診斷中的應(yīng)用[J]. 邵謙之,姜毅,吳金雨.  遺傳. 2014(11)
[8]磁性納米材料固相萃取與GC/MS聯(lián)用檢測尿中安眠藥殘留[J]. 陳建虎,徐文濤,高元,滕越.  刑事技術(shù). 2014(04)
[9]毛細(xì)管區(qū)帶電泳法同時測定飲料中16種食品添加劑[J]. 龍巍然,岑怡紅,王興益,白玉,劉虎威.  色譜. 2012(07)
[10]分子印跡技術(shù)在固相萃取中的應(yīng)用[J]. 馮銀巧,周如金,唐玉斌,胡鑫鑫.  理化檢驗(化學(xué)分冊). 2011(01)

博士論文
[1]旋轉(zhuǎn)激光掃描共焦熒光檢測式毛細(xì)管陣列電泳的研制與應(yīng)用研究[D]. 汪俊.中國科學(xué)院研究生院(大連化學(xué)物理研究所) 2006

碩士論文
[1]改性碳納米材料雜化的分子印跡整體柱的制備與應(yīng)用[D]. 梁國煥.廣東藥科大學(xué) 2018
[2]蒽醌類染料在碳糊電極上的電化學(xué)聚合及電催化性能研究[D]. 閆璟.陜西科技大學(xué) 2017
[3]殼聚糖基吸附劑的合成及其對重金屬離子的吸附行為[D]. 李蕓.西北師范大學(xué) 2016
[4]高效毛細(xì)管電泳檢測蒽醌類物質(zhì)及磺胺類和氟喹諾酮類藥物殘留[D]. 王寧.河北大學(xué) 2015
[5]毛細(xì)管電泳免疫分析法檢測諾氟沙星獸藥殘留[D]. 馮雪.天津科技大學(xué) 2014
[6]自動進(jìn)樣—空間溫度梯度毛細(xì)管陣列電泳系統(tǒng)用于基因突變檢測[D]. 張月.東北大學(xué) 2012
[7]自動進(jìn)樣—微流控毛細(xì)管陣列電泳LIF檢測系統(tǒng)的研究[D]. 張青峰.東北大學(xué) 2010
[8]SNP芯片數(shù)據(jù)庫及其分析工具的構(gòu)建和應(yīng)用[D]. 董獻(xiàn)軍.東南大學(xué) 2005
[9]褐藻膠寡糖的高效毛細(xì)管電泳分離分析方法的研究[D]. 孫燕.中國海洋大學(xué) 2004



本文編號:3110231

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