流動注射化學發(fā)光免疫傳感器結合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領域的應用
發(fā)布時間：2021-02-21 00:54
隨著人民生活水平和消費觀念的不斷提升,“綠色健康”已經逐步成為大眾精神物質追求的代名詞,與此同時食品與環(huán)境安全問題引發(fā)國民熱議。為了能夠靈敏又精準地檢測環(huán)境污染物與食品違禁添加劑,開發(fā)一種高效的分析檢測方法為大勢所趨。流動注射化學發(fā)光分析法是一種響應快、操作簡便和靈敏度高的檢測方法,該法已被廣泛應用于醫(yī)藥、食品、環(huán)境、農藥等與生活息息相關的領域。為了提高該分析檢測方法的特異性,將其與免疫分析聯用,利用抗原抗體反應為基礎,構建流動注射化學發(fā)光免疫分析法,極大地擴寬了兩者的實際應用價值。在此基礎上,本論文提出了一系列在食品違禁添加劑和環(huán)境污染物檢測的信號放大策略,構建的幾種傳感器成功用于檢測水樣以及食品安全領域違禁添加的小分子有害物質——溴布特羅、氯霉素和汞離子,為食品安全和環(huán)境污染的研究和應用提供了有效的分析方法。本論文主要包括以下幾個方面:一、以羧基樹脂珠為固相載體連接抗原,因其具有較大的比表面積及較好的生物相容性,可負載大量抗原。引入高親和力的多抗與辣根過氧化物酶標記的二抗,可有效地放大化學發(fā)光信號,該方法對溴布特羅檢測的線性范圍為0.001-300 ng mL-1。成功建立了線性范...
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數】：74 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖１?－３化學發(fā)光成像納米酶免疫測定示意圖??
第一章?流動注射化學發(fā)光免疫傳感器結合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領域的應用??用于微囊藻毒素－ＬＲ的靈敏檢測，如圖１４所示。基于間接競爭ＣＬ免疫測定原理，??使用光纖生物探針作為生物識別元件，實現了對微囊藻毒素－ＬＲ的高靈敏檢測。在最??佳條件下，微囊藻毒素－ＬＲ的檢出限為０．０３?ｐｇ�。薄�??Ｉ?ｉ?ｖ?＾??Ｓ?＾?Ｓ?Ｘ?＾??ＩｃＳｖｖ??—－?Ｗａ＞ｈｏｄ?ｂ＞?Ｐｎ．Ｓ??ＩＶ?Ｒｅ＾ｅｃｅｒａ＇．ｉｕｕ?＇ｏｙ?０．５＊－＊?ＳＤＳ?人?Ｙ人?ＪＬ?１?；??必人??ｍ?ｋ?ｋ?＾?Ｖ??／ｖｙｖ?／＼?，Ｎ?產、．？＾＞－?Ｗａｓｈｅｄ?ｈｙ?ＰＫＳ??＂??令??‘?ＭＣ－ＩＲ－ＯＶＡ?＾１?ＭＣ－ＬＲ?｝ｆ．?ＨＲＰ??ａｎｔｉ－ＭＣ＊－ＬＲ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?＝＾，?ＨＲ？－ｃｏｎｊｕｇａｌｅｄ?ｇｏａｌ－ａｎｉｉ－ｍｎｕ＾ｃ?ａｎｔｉｂｏｄｙ??圖１４微囊藻毒素－ＬＲ檢測的ＣＬ免疫感應機制示意圖??１．３．３化學發(fā)光免疫傳感器??將高靈敏度的傳感器技術與特異性免疫反應相結合，用于監(jiān)測抗原－抗體反應的??生物傳感器稱作免疫傳感器［４１］。結合抗體－抗原相互作用和敏感化學發(fā)光測量值的化??學發(fā)光免疫傳感器是當下流行的光學免疫傳感器，可以快速產生和讀取信號、大大簡??化免疫測定步驟、降低診斷成本，并且可以使檢測小型化和自動化。??化學發(fā)光免疫分析方法由于具有無放射性廢物，所需儀器相對簡單便攜，檢測限??低以及檢測動態(tài)范圍寬等優(yōu)點而被用于常規(guī)臨床分析以及臨床和生物醫(yī)學研宄，它對??許多不同的方法都具有通用性和靈活性。通常，在分析中使用兩種主要的化學發(fā)光分??析技
流動注射化學發(fā)光免疫傳感器結合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領域的應用?第一章??ｗｉｔｃ、??Ｍｕｌｔｉｐｏｓｉｔｉｏｎ＾ａｌｕｅ＾，?ｆ．．．．（Ｌ?Ｊ?＼?＿?＿??ＣＬ?ｆｏｒ?ＡＦＰ?ＣＬｆｏｒＣＥＡ??ＴＴ??？?ＡＦＰ?ａｎｔｉｇｅｎ?Ｙ?ａｎｔｉ－ＡＦＰ?ｙ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＡＦＰ??？?ＣＥＡ?ａｎｔｉｇｅｎ?ａｎｔｉ－ＣＥＡ?ｒ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＣＥＡ??典?ＧＯ?＜Ｚａ＞?Ｆｅ３０４／Ｓｉ０２??圖１?－５基于氧化石墨烯固定酶標抗體得ＡＦＰ和ＣＥＡ的信號放大免疫檢測??１．５．２環(huán)境中農藥殘留檢測??敵百蟲是一種重要的有機磷農藥，在極高的暴露水平下會過度刺激神經系統(tǒng)，并??導致嚴重的疾玻山東農業(yè)大學Ｘｕ課題組［５９］基于分子印記聚合物ＭＩＰ作為仿生抗體，??以牛血清白蛋白為載體，用敵百蟲間接標記敵百蟲半抗原，后者與游離敵百蟲競爭ＭＩＰ??仿生抗體的結合位點�；谶@種直接競爭形式，開發(fā)了一種用于快速檢測痕量敵百蟲??的高通量流動注射化學發(fā)光仿生免疫測定方法。在最佳條件下，使用此方法可獲得??０．００２４?ｍｇ?Ｉ／１的檢測下限。該方法還用于檢測胡蘿卜和卷心菜樣品中的敵百蟲加標含??量，并通過氣相色譜法驗證實驗結果。??１．５．３其他物質的分析??除上述介紹外，ＦＩ－ＣＬＩＡ分析在其他方面也有諸多應用，如揚州大學Ｙａｎｇ課題組??基于共固定捕獲抗體和天然酶策略的無標記化學發(fā)光免疫分析檢測生物蛋白，將人類??免疫球蛋白捕獲抗體與ＨＲＰ共固定于金納米粒子和殼聚糖薄膜表面，所形成的界面可??以防止化學發(fā)光底物向酶的擴散，進而導致化學發(fā)光強度的降低，隨之進行定量檢測。??揚州大學
【參考文獻】：
期刊論文
[1]基于氧化石墨烯信號放大的化學發(fā)光法聯合檢測甲胎蛋白和癌胚抗原[J]. 林潔華,張慧慧,楚鵬飛. 化學學報. 2012(22)
本文編號：3043604
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數】：74 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖１?－３化學發(fā)光成像納米酶免疫測定示意圖??
第一章?流動注射化學發(fā)光免疫傳感器結合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領域的應用??用于微囊藻毒素－ＬＲ的靈敏檢測，如圖１４所示。基于間接競爭ＣＬ免疫測定原理，??使用光纖生物探針作為生物識別元件，實現了對微囊藻毒素－ＬＲ的高靈敏檢測。在最??佳條件下，微囊藻毒素－ＬＲ的檢出限為０．０３?ｐｇ�。薄�??Ｉ?ｉ?ｖ?＾??Ｓ?＾?Ｓ?Ｘ?＾??ＩｃＳｖｖ??—－?Ｗａ＞ｈｏｄ?ｂ＞?Ｐｎ．Ｓ??ＩＶ?Ｒｅ＾ｅｃｅｒａ＇．ｉｕｕ?＇ｏｙ?０．５＊－＊?ＳＤＳ?人?Ｙ人?ＪＬ?１?；??必人??ｍ?ｋ?ｋ?＾?Ｖ??／ｖｙｖ?／＼?，Ｎ?產、．？＾＞－?Ｗａｓｈｅｄ?ｈｙ?ＰＫＳ??＂??令??‘?ＭＣ－ＩＲ－ＯＶＡ?＾１?ＭＣ－ＬＲ?｝ｆ．?ＨＲＰ??ａｎｔｉ－ＭＣ＊－ＬＲ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?＝＾，?ＨＲ？－ｃｏｎｊｕｇａｌｅｄ?ｇｏａｌ－ａｎｉｉ－ｍｎｕ＾ｃ?ａｎｔｉｂｏｄｙ??圖１４微囊藻毒素－ＬＲ檢測的ＣＬ免疫感應機制示意圖??１．３．３化學發(fā)光免疫傳感器??將高靈敏度的傳感器技術與特異性免疫反應相結合，用于監(jiān)測抗原－抗體反應的??生物傳感器稱作免疫傳感器［４１］。結合抗體－抗原相互作用和敏感化學發(fā)光測量值的化??學發(fā)光免疫傳感器是當下流行的光學免疫傳感器，可以快速產生和讀取信號、大大簡??化免疫測定步驟、降低診斷成本，并且可以使檢測小型化和自動化。??化學發(fā)光免疫分析方法由于具有無放射性廢物，所需儀器相對簡單便攜，檢測限??低以及檢測動態(tài)范圍寬等優(yōu)點而被用于常規(guī)臨床分析以及臨床和生物醫(yī)學研宄，它對??許多不同的方法都具有通用性和靈活性。通常，在分析中使用兩種主要的化學發(fā)光分??析技
流動注射化學發(fā)光免疫傳感器結合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領域的應用?第一章??ｗｉｔｃ、??Ｍｕｌｔｉｐｏｓｉｔｉｏｎ＾ａｌｕｅ＾，?ｆ．．．．（Ｌ?Ｊ?＼?＿?＿??ＣＬ?ｆｏｒ?ＡＦＰ?ＣＬｆｏｒＣＥＡ??ＴＴ??？?ＡＦＰ?ａｎｔｉｇｅｎ?Ｙ?ａｎｔｉ－ＡＦＰ?ｙ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＡＦＰ??？?ＣＥＡ?ａｎｔｉｇｅｎ?ａｎｔｉ－ＣＥＡ?ｒ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＣＥＡ??典?ＧＯ?＜Ｚａ＞?Ｆｅ３０４／Ｓｉ０２??圖１?－５基于氧化石墨烯固定酶標抗體得ＡＦＰ和ＣＥＡ的信號放大免疫檢測??１．５．２環(huán)境中農藥殘留檢測??敵百蟲是一種重要的有機磷農藥，在極高的暴露水平下會過度刺激神經系統(tǒng)，并??導致嚴重的疾玻山東農業(yè)大學Ｘｕ課題組［５９］基于分子印記聚合物ＭＩＰ作為仿生抗體，??以牛血清白蛋白為載體，用敵百蟲間接標記敵百蟲半抗原，后者與游離敵百蟲競爭ＭＩＰ??仿生抗體的結合位點�；谶@種直接競爭形式，開發(fā)了一種用于快速檢測痕量敵百蟲??的高通量流動注射化學發(fā)光仿生免疫測定方法。在最佳條件下，使用此方法可獲得??０．００２４?ｍｇ?Ｉ／１的檢測下限。該方法還用于檢測胡蘿卜和卷心菜樣品中的敵百蟲加標含??量，并通過氣相色譜法驗證實驗結果。??１．５．３其他物質的分析??除上述介紹外，ＦＩ－ＣＬＩＡ分析在其他方面也有諸多應用，如揚州大學Ｙａｎｇ課題組??基于共固定捕獲抗體和天然酶策略的無標記化學發(fā)光免疫分析檢測生物蛋白，將人類??免疫球蛋白捕獲抗體與ＨＲＰ共固定于金納米粒子和殼聚糖薄膜表面，所形成的界面可??以防止化學發(fā)光底物向酶的擴散，進而導致化學發(fā)光強度的降低，隨之進行定量檢測。??揚州大學
【參考文獻】：
期刊論文
[1]基于氧化石墨烯信號放大的化學發(fā)光法聯合檢測甲胎蛋白和癌胚抗原[J]. 林潔華,張慧慧,楚鵬飛. 化學學報. 2012(22)
本文編號：3043604
本文鏈接：http://sikaile.net/kejilunwen/huaxue/3043604.html
教材專著
