流動注射化學(xué)發(fā)光免疫傳感器結(jié)合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用
發(fā)布時間:2021-02-21 00:54
隨著人民生活水平和消費(fèi)觀念的不斷提升,“綠色健康”已經(jīng)逐步成為大眾精神物質(zhì)追求的代名詞,與此同時食品與環(huán)境安全問題引發(fā)國民熱議。為了能夠靈敏又精準(zhǔn)地檢測環(huán)境污染物與食品違禁添加劑,開發(fā)一種高效的分析檢測方法為大勢所趨。流動注射化學(xué)發(fā)光分析法是一種響應(yīng)快、操作簡便和靈敏度高的檢測方法,該法已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、環(huán)境、農(nóng)藥等與生活息息相關(guān)的領(lǐng)域。為了提高該分析檢測方法的特異性,將其與免疫分析聯(lián)用,利用抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ),構(gòu)建流動注射化學(xué)發(fā)光免疫分析法,極大地擴(kuò)寬了兩者的實際應(yīng)用價值。在此基礎(chǔ)上,本論文提出了一系列在食品違禁添加劑和環(huán)境污染物檢測的信號放大策略,構(gòu)建的幾種傳感器成功用于檢測水樣以及食品安全領(lǐng)域違禁添加的小分子有害物質(zhì)——溴布特羅、氯霉素和汞離子,為食品安全和環(huán)境污染的研究和應(yīng)用提供了有效的分析方法。本論文主要包括以下幾個方面:一、以羧基樹脂珠為固相載體連接抗原,因其具有較大的比表面積及較好的生物相容性,可負(fù)載大量抗原。引入高親和力的多抗與辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗,可有效地放大化學(xué)發(fā)光信號,該方法對溴布特羅檢測的線性范圍為0.001-300 ng mL-1。成功建立了線性范...
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1?-3化學(xué)發(fā)光成像納米酶免疫測定示意圖??
第一章?流動注射化學(xué)發(fā)光免疫傳感器結(jié)合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用??用于微囊藻毒素-LR的靈敏檢測,如圖14所示;陂g接競爭CL免疫測定原理,??使用光纖生物探針作為生物識別元件,實現(xiàn)了對微囊藻毒素-LR的高靈敏檢測。在最??佳條件下,微囊藻毒素-LR的檢出限為0.03?pg。。??I?i?v?^??S?^?S?X?^??IcSvv??—-?Wa>hod?b>?Pn.S??IV?Re^ecera'.iuu?'oy?0.5*-*?SDS?人?Y人?JL?1?;??必人??m?k?k?^?V??/vyv?/\?,N?產(chǎn)、.?^>-?Washed?hy?PKS??"??令??‘?MC-IR-OVA?^1?MC-LR?}f.?HRP??anti-MC*-LR?antibody?=^,?HR?-conjugaled?goal-anii-mnu^c?antibody??圖14微囊藻毒素-LR檢測的CL免疫感應(yīng)機(jī)制示意圖??1.3.3化學(xué)發(fā)光免疫傳感器??將高靈敏度的傳感器技術(shù)與特異性免疫反應(yīng)相結(jié)合,用于監(jiān)測抗原-抗體反應(yīng)的??生物傳感器稱作免疫傳感器[41]。結(jié)合抗體-抗原相互作用和敏感化學(xué)發(fā)光測量值的化??學(xué)發(fā)光免疫傳感器是當(dāng)下流行的光學(xué)免疫傳感器,可以快速產(chǎn)生和讀取信號、大大簡??化免疫測定步驟、降低診斷成本,并且可以使檢測小型化和自動化。??化學(xué)發(fā)光免疫分析方法由于具有無放射性廢物,所需儀器相對簡單便攜,檢測限??低以及檢測動態(tài)范圍寬等優(yōu)點(diǎn)而被用于常規(guī)臨床分析以及臨床和生物醫(yī)學(xué)研宄,它對??許多不同的方法都具有通用性和靈活性。通常,在分析中使用兩種主要的化學(xué)發(fā)光分??析技
流動注射化學(xué)發(fā)光免疫傳感器結(jié)合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用?第一章??witc、??Multiposition^alue^,?f....(L?J?\?_?_??CL?for?AFP?CLforCEA??TT????AFP?antigen?Y?anti-AFP?y?HRP-Labeled-AFP????CEA?antigen?anti-CEA?r?HRP-Labeled-CEA??典?GO?<Za>?Fe304/Si02??圖1?-5基于氧化石墨烯固定酶標(biāo)抗體得AFP和CEA的信號放大免疫檢測??1.5.2環(huán)境中農(nóng)藥殘留檢測??敵百蟲是一種重要的有機(jī)磷農(nóng)藥,在極高的暴露水平下會過度刺激神經(jīng)系統(tǒng),并??導(dǎo)致嚴(yán)重的疾玻山東農(nóng)業(yè)大學(xué)Xu課題組[59]基于分子印記聚合物MIP作為仿生抗體,??以牛血清白蛋白為載體,用敵百蟲間接標(biāo)記敵百蟲半抗原,后者與游離敵百蟲競爭MIP??仿生抗體的結(jié)合位點(diǎn);谶@種直接競爭形式,開發(fā)了一種用于快速檢測痕量敵百蟲??的高通量流動注射化學(xué)發(fā)光仿生免疫測定方法。在最佳條件下,使用此方法可獲得??0.0024?mg?I/1的檢測下限。該方法還用于檢測胡蘿卜和卷心菜樣品中的敵百蟲加標(biāo)含??量,并通過氣相色譜法驗證實驗結(jié)果。??1.5.3其他物質(zhì)的分析??除上述介紹外,FI-CLIA分析在其他方面也有諸多應(yīng)用,如揚(yáng)州大學(xué)Yang課題組??基于共固定捕獲抗體和天然酶策略的無標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測生物蛋白,將人類??免疫球蛋白捕獲抗體與HRP共固定于金納米粒子和殼聚糖薄膜表面,所形成的界面可??以防止化學(xué)發(fā)光底物向酶的擴(kuò)散,進(jìn)而導(dǎo)致化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的降低,隨之進(jìn)行定量檢測。??揚(yáng)州大學(xué)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于氧化石墨烯信號放大的化學(xué)發(fā)光法聯(lián)合檢測甲胎蛋白和癌胚抗原[J]. 林潔華,張慧慧,楚鵬飛. 化學(xué)學(xué)報. 2012(22)
本文編號:3043604
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1?-3化學(xué)發(fā)光成像納米酶免疫測定示意圖??
第一章?流動注射化學(xué)發(fā)光免疫傳感器結(jié)合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用??用于微囊藻毒素-LR的靈敏檢測,如圖14所示;陂g接競爭CL免疫測定原理,??使用光纖生物探針作為生物識別元件,實現(xiàn)了對微囊藻毒素-LR的高靈敏檢測。在最??佳條件下,微囊藻毒素-LR的檢出限為0.03?pg。。??I?i?v?^??S?^?S?X?^??IcSvv??—-?Wa>hod?b>?Pn.S??IV?Re^ecera'.iuu?'oy?0.5*-*?SDS?人?Y人?JL?1?;??必人??m?k?k?^?V??/vyv?/\?,N?產(chǎn)、.?^>-?Washed?hy?PKS??"??令??‘?MC-IR-OVA?^1?MC-LR?}f.?HRP??anti-MC*-LR?antibody?=^,?HR?-conjugaled?goal-anii-mnu^c?antibody??圖14微囊藻毒素-LR檢測的CL免疫感應(yīng)機(jī)制示意圖??1.3.3化學(xué)發(fā)光免疫傳感器??將高靈敏度的傳感器技術(shù)與特異性免疫反應(yīng)相結(jié)合,用于監(jiān)測抗原-抗體反應(yīng)的??生物傳感器稱作免疫傳感器[41]。結(jié)合抗體-抗原相互作用和敏感化學(xué)發(fā)光測量值的化??學(xué)發(fā)光免疫傳感器是當(dāng)下流行的光學(xué)免疫傳感器,可以快速產(chǎn)生和讀取信號、大大簡??化免疫測定步驟、降低診斷成本,并且可以使檢測小型化和自動化。??化學(xué)發(fā)光免疫分析方法由于具有無放射性廢物,所需儀器相對簡單便攜,檢測限??低以及檢測動態(tài)范圍寬等優(yōu)點(diǎn)而被用于常規(guī)臨床分析以及臨床和生物醫(yī)學(xué)研宄,它對??許多不同的方法都具有通用性和靈活性。通常,在分析中使用兩種主要的化學(xué)發(fā)光分??析技
流動注射化學(xué)發(fā)光免疫傳感器結(jié)合酶放大策略在環(huán)境污染與食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用?第一章??witc、??Multiposition^alue^,?f....(L?J?\?_?_??CL?for?AFP?CLforCEA??TT????AFP?antigen?Y?anti-AFP?y?HRP-Labeled-AFP????CEA?antigen?anti-CEA?r?HRP-Labeled-CEA??典?GO?<Za>?Fe304/Si02??圖1?-5基于氧化石墨烯固定酶標(biāo)抗體得AFP和CEA的信號放大免疫檢測??1.5.2環(huán)境中農(nóng)藥殘留檢測??敵百蟲是一種重要的有機(jī)磷農(nóng)藥,在極高的暴露水平下會過度刺激神經(jīng)系統(tǒng),并??導(dǎo)致嚴(yán)重的疾玻山東農(nóng)業(yè)大學(xué)Xu課題組[59]基于分子印記聚合物MIP作為仿生抗體,??以牛血清白蛋白為載體,用敵百蟲間接標(biāo)記敵百蟲半抗原,后者與游離敵百蟲競爭MIP??仿生抗體的結(jié)合位點(diǎn);谶@種直接競爭形式,開發(fā)了一種用于快速檢測痕量敵百蟲??的高通量流動注射化學(xué)發(fā)光仿生免疫測定方法。在最佳條件下,使用此方法可獲得??0.0024?mg?I/1的檢測下限。該方法還用于檢測胡蘿卜和卷心菜樣品中的敵百蟲加標(biāo)含??量,并通過氣相色譜法驗證實驗結(jié)果。??1.5.3其他物質(zhì)的分析??除上述介紹外,FI-CLIA分析在其他方面也有諸多應(yīng)用,如揚(yáng)州大學(xué)Yang課題組??基于共固定捕獲抗體和天然酶策略的無標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測生物蛋白,將人類??免疫球蛋白捕獲抗體與HRP共固定于金納米粒子和殼聚糖薄膜表面,所形成的界面可??以防止化學(xué)發(fā)光底物向酶的擴(kuò)散,進(jìn)而導(dǎo)致化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的降低,隨之進(jìn)行定量檢測。??揚(yáng)州大學(xué)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于氧化石墨烯信號放大的化學(xué)發(fā)光法聯(lián)合檢測甲胎蛋白和癌胚抗原[J]. 林潔華,張慧慧,楚鵬飛. 化學(xué)學(xué)報. 2012(22)
本文編號:3043604
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