發(fā)布時(shí)間：2021-01-17 09:36

　　端粒是一種重要的生物結(jié)構(gòu),它存在于染色體的末端并且保護(hù)染色體內(nèi)的生命遺傳信息。但是生物體內(nèi)DNA復(fù)制的缺陷導(dǎo)致端粒的長度隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加而縮短。端�？s短到一定長度時(shí)會造成染色體之間的融合以及遺傳信息的損壞,從而造成細(xì)胞的死亡。端粒酶是一種負(fù)責(zé)延長端粒的特別聚合酶,它可以把DNA復(fù)制損失的端粒長度填補(bǔ)起來,可以讓端粒不會因細(xì)胞分裂而有所損耗,使得細(xì)胞分裂的次數(shù)增加。端粒酶存在于所有的細(xì)胞中,在正常的細(xì)胞中端粒酶活性會受到抑制并未對端粒產(chǎn)生保護(hù)作用。但在腫瘤細(xì)胞中,抑制作用會被減弱,從而造成細(xì)胞的無限增殖且不會凋亡。因此,正常體細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間不同的端粒酶活性可以作為腫瘤標(biāo)志物以及潛在的化療靶點(diǎn)。端粒重復(fù)序列放大的方案（TARP）是目前最傳統(tǒng)的端粒酶活性檢測方法。該方法利用一個(gè)合成的非端粒重復(fù)DNA序列作為引物;然后,引物在端粒酶的作用下不斷地延伸;最后,用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）放大延伸的產(chǎn)物并且通過凝膠電泳方法進(jìn)行檢測。但是,該方法存在著方法檢測范圍小且受裂解液影響較大等缺點(diǎn)局限其應(yīng)用。本論文利用球形核酸結(jié)構(gòu)（SNA）構(gòu)建二種端粒酶活性檢測方法。1.我們設(shè)計(jì)一種可以檢測端粒酶活... 

【文章來源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２端粒隱縮??

的六個(gè)核苷酸加在端�；蛘咭锏模常Ф�；第四步，端粒酶沿著新合成ＤＮＡ鏈不??斷地易位并延伸端�；蛘咭�；端粒酶易位步驟為端粒酶攜帶著模板ＲＮＡ轉(zhuǎn)移??到ＤＮＡ的新的３端進(jìn)行新一輪端粒合成［１６］。合成的循環(huán)如圖１．３所示。??因?yàn)槎肆Ｃ缚梢苑乐苟肆Ｔ诩?xì)胞分裂時(shí)候變短，所以端粒酶對癌細(xì)胞的無限??增殖起著至關(guān)重要的作用。在正常的細(xì)胞中端粒酶活性受到抑制并未對端粒產(chǎn)生??保護(hù)作用［１７］。在８５％－９０％的腫瘤細(xì)胞中端粒酶的活性沒有受到抑制，從而造成??細(xì)胞的無限增殖并不會凋亡［１８］。因此，正常體細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間不同的端粒??酶活性表達(dá)程度可以作為腫瘤標(biāo)志物以及潛在的化療靶點(diǎn)［１９１。????ｈＴＲ??????Ｔｈｅ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ??Ｉ??ＫＴＥＲＴ？?ｅｎｄ?ｂｉｎｄｓ?ｔｏ?ｔｈｅ??ｔｃｌｏｍｃｒａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ??Ｒｅｉｔｅｒａｔｉｖｅ?＿????Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｃ?ｃａｔａｌｙｚｅｓ??ａｄｄ，ｌ：ｏｎ?＾?ＩＮ?ＣＡＭＸＣＣＡＡＵｃｎｊｍ?＾ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ?ｏｆｉｈｅ??ｔｒａｎｓｌｏｃａｌ，ｏｎ?．?Ｇ－ｒｉｃｈｔｅｌｏｍｅｒｉｃ??ＣＡＡＵＣＣＣＡＡＵＣ?Ｔｈｅ?ｅｎｚｙｍｅ?ｃｏｍｐｌｅｘ??：ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｓ?ａｌｏｎｇ?ｉｈｅ??ｎｅｗｌｙ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ?ｓｉｒａｎｄ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ?ｅｘｔｅｎｄ?ＤＮＡ．ｔ，ｑ??圖１．３端粒酶延伸ＤＮＡ的過程??１．２．３端粒酶活性的檢測方法??在布萊克本與格雷德等先驅(qū)提出細(xì)胞內(nèi)存在端粒酶以后

．匕ｔ?％公’參??Ｎ?ｃｙｃｌｅｓ，?ｓ??３：、＇?：?ｉｔ??Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ?ＥＸＯ?ＩＩＩ?Ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ?Ａｇ／ＡｇＣｌ?Ｐｒ．４．３?Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＤＮＡ－ｍｅｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ?ｂａｓｅｄ?ｓｉｇｎａｌ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｆｏｒ?ｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｕｓｉｎｇ?ｅｎｚｙｍｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ?ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ?ｃｕｒｒｅｎｔ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ?ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ｐｒｏｃｅｓｓ．［２９］??于酶抑制背景電流和高特性固態(tài)電化學(xué)過程的ＤＮＡ－金屬化的信號放大人端粒酶活性檢測。??


本文編號：2982622