發(fā)布時間：2020-07-05 15:23

【摘要】：目的:對頭孢硫脒原料藥破壞產(chǎn)生的雜質進行分析,研究頭孢硫脒原料藥雜質的制備及分離純化方法,分析確證雜質的結構,檢測雜質的細胞毒性。為頭孢硫脒原料藥雜質的種類和含量測定提供參考,并為該藥物的質量控制和質量標準提供方法和數(shù)據(jù)支持。方法:(1)通過酸、堿、光、熱、氧化五種方法對頭孢硫脒原料藥進行破壞,使用LC-MS檢測并分析產(chǎn)生的雜質種類;(2)用原料藥破壞或化學合成的方法制備相關的頭孢硫脒雜質,分離純化后得到相應的雜質純品;使用LC-MS/MS、NMR等分析方法進行分析測定,表征雜質精確結構;(3)采用MTT法檢測雜質對HUVEC、Ha Cat和Vero三種細胞的毒性。結果:通過對頭孢硫脒原料藥進行破壞并用LC-MS檢測發(fā)現(xiàn),堿性條件下原料藥會產(chǎn)生雜質碎片,可檢測到的有3個雜質;酸性條件下可檢測到6個雜質;原料藥在溶液狀態(tài)下,經(jīng)過加熱處理后檢測有9個雜質產(chǎn)生;原料藥經(jīng)過254nm紫外光處理后可檢測到2個雜質;雙氧水處理原料藥后可檢測到5個雜質。分離純化得到雜質6個,通過LC-MS,NMR等方法已確定6個雜質的結構,LM-A為去乙酰頭孢硫脒,LM-D為頭孢硫脒內酯,LM-O為頭孢硫脒六元環(huán)上硫原子加氧,LM-△3為頭孢硫脒六元環(huán)上雙鍵發(fā)生轉移的產(chǎn)物,LM-7S為頭孢硫脒C-7上氫原子位置變化,LM-AO為去乙酰頭孢硫脒六元環(huán)上硫原子加氧;細胞毒性實驗結果顯示6個雜質濃度在1.56μg/m L-100μg/m L區(qū)間時對細胞存活率影響極小,可推測這6個雜質在該濃度區(qū)間對HUVEC、Ha Cat和Vero三種細胞無明顯毒性。結論:本課題建立的分離純化方法能夠有效的對目標雜質進行純化,較傳統(tǒng)的LC-MS分離方法而言能更高效快捷制備出純度高的雜質產(chǎn)品。鑒定了6個頭孢硫脒雜質的化學結構,并發(fā)現(xiàn)這6個雜質對正常細胞無明顯毒性。頭孢硫脒原料藥在酸、堿、高溫等條件下易產(chǎn)生雜質,因此應重視藥物的生產(chǎn)及存儲過程,減少雜質產(chǎn)生。本課題的研究結果能為頭孢硫脒藥品的工藝優(yōu)化和雜質控制提供有價值的參考。
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：TQ460.72;O657.63
【圖文】：

圖 1 頭孢菌素類化合物及頭孢硫脒結構注：A 為頭孢菌素類母核結構，B 為頭孢硫脒結構。頭孢菌素類藥物通過微生物發(fā)酵、純化得到母核，再通過化學修飾等過程制成不同的頭孢類產(chǎn)品。與化學合成藥品相比，這類抗生素產(chǎn)品純度較低，且該類

圖 3 原料藥堿破壞溶液 LC-MS 檢測圖液離子流圖；B：堿破壞液紫外檢測圖；C：0.91min 處離子流信息；息；E：2.22min 處離子流信息；F：3.65min 處離子流信息；G：5. 2圖 4 堿破壞溶液雜質形成示意圖表 1 堿破壞溶液檢測圖中相應保留時間物質的分子量編號 1 2 3 4保留時間（min） 1.64 2.22 3.65 5.21分子離子峰 431.23 431.04 473.31 473.06含量百分比 6.8% 2.3% 84.5% 1.2%孢硫脒原料溶解于 0.1mol/L 的碳酸氫鈉溶液反應 1h 后，可檢

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 彭潔;洪建文;肖慧;羅嘉琳;陳欣;;HPLC法測定注射用頭孢硫脒有關物質[J];中國抗生素雜志;2015年11期

2 汪聞平;魏敏吉;;頭孢硫脒在小鼠的藥動學研究[J];中國抗生素雜志;2015年05期

3 劉永迨;騰洪松;;頭孢硫脒所致不良反應文獻概述[J];中國藥物濫用防治雜志;2015年01期

4 楊少松;陳崇澤;陳曉;陳晨鐘;林茂;;頭孢硫脒致84例不良反應回顧性分析[J];西北藥學雜志;2015年01期

5 李潔云;顧覺奮;;第5代頭孢菌素類抗生素的研究進展和市場動態(tài)[J];藥學進展;2014年10期

6 姚柳端;金國有;劉曉紅;劉學斌;;頭孢菌素母核雙鍵異構化的研究進展[J];中國醫(yī)藥工業(yè)雜志;2014年10期

7 曲桂霞;鐘敏;楊義;;頭孢硫瞇對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的敏感性監(jiān)測與分析[J];黑龍江科學;2014年08期

8 管進超;;探討應用頭孢硫脒在防治革蘭陽性菌燒傷感染中的作用[J];中國實用醫(yī)藥;2014年20期

9 郭澤琴;霍佳麗;王建華;吳志軍;;β-內酰胺類抗生素質譜裂解機理研究[J];質譜學報;2014年01期

10 王易;再努然·沙力;;頭孢硫脒應用小兒急性細菌性呼吸道感染治療的臨床護理研究[J];中外醫(yī)學研究;2013年26期

相關博士學位論文 前2條

1 陳啟立;頭孢菌素類仿制藥的雜質譜研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2016年

2 錢建欽;β-內酰胺類抗生素及其雜質的質譜裂解規(guī)律研究和毒性預測與評價[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2014年

本文編號：2742789