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甘草查爾酮A抗氧化及抗癌活性機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-23 12:46
【摘要】:眾所周知,化合物和其他污染物的氧化或腐敗會(huì)使機(jī)體產(chǎn)生大量的自由基,來攻擊DNA或RNA,最終導(dǎo)致細(xì)胞氧化損傷。而細(xì)胞氧化損傷不但與衰老、腫瘤、糖尿病及許多神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生相關(guān),而且還會(huì)導(dǎo)致癌癥的產(chǎn)生。至此本文研究了甘草查爾酮A抗氧化活性,并以肝癌細(xì)胞為模型研究了其抗癌活性,為以甘草查爾酮A為抗氧化、抗癌藥物的和保健品的開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。本研究首先通過五種不同體系DPPH法,ABTS法,O_2~-法,H_2O_2法及FRAP法來檢測甘草查爾酮A的抗氧化活性。結(jié)果顯示,五種不同體系的測定結(jié)果是一致的,其清除自由基的百分比呈劑量依賴性,并且當(dāng)甘草查爾酮A濃度為64μg/mL時(shí),五種不同體系的檢測結(jié)果都顯示了甘草查爾酮A的最佳抗氧化能力。其次,通過T-AOC和CAA法驗(yàn)證了甘草查爾酮A在其細(xì)胞內(nèi)部同樣有著較強(qiáng)的抗氧化活性。之后通過SOD、CAT和GSH-PX三種試劑盒的檢測得出,甘草查爾酮A能通過對(duì)三種氧化酶的分泌產(chǎn)生影響,進(jìn)而加強(qiáng)了細(xì)胞本身的抗氧化功能。事實(shí)上,氧化應(yīng)激可導(dǎo)致細(xì)胞死亡,其機(jī)制有多種,包括增加活性氧(ROS)的形成,線粒體功能障礙,或激活凋亡相關(guān)的死亡信號(hào)。細(xì)胞內(nèi)的抗氧化機(jī)制涉及到的抗氧化酶就包括SOD,CAT和GPX。此外,SOD,CAT和GPX也是作為對(duì)抗自由基的第一道防線由細(xì)胞內(nèi)催化轉(zhuǎn)化為活性較低的物種。通過一個(gè)復(fù)雜的細(xì)胞抗氧化系統(tǒng),細(xì)胞內(nèi)ROS水平受到了自由基清除劑的嚴(yán)格的控制,而本研究證明了甘草查爾酮A在此細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)中起到了關(guān)鍵作用,致使細(xì)胞本身的抗氧化能力增強(qiáng)。由于細(xì)胞氧化能導(dǎo)致細(xì)胞癌變,所以深入研究甘草查爾酮A在能增強(qiáng)肝細(xì)胞自身抗氧化能力的同時(shí),是否也能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的死亡和凋亡。最終,我們采用了DAPI的細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析和細(xì)胞周期的分析,最終結(jié)果顯示,甘草查爾酮A在安全適用范圍內(nèi)能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的凋亡,并且是通過MAPK信號(hào)通路中的ERK、p38和JNK通路來完成的。從這些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中可以得出,甘草查爾酮A既能增強(qiáng)肝細(xì)胞自身抗氧化能力,又能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的死亡和凋亡。為以甘草查爾酮A為原料的天然、安全、高效的保健品或藥物的開發(fā)提供了理論依據(jù)。
【圖文】:

查爾酮,甘草,清除作用


圖 2.1 甘草查爾酮 A 對(duì) DPPH 的清除作用 2.1. DPPH scavenging rate of licochalcone A. The curves shown are each fsingle experiment (mean± SD, n=3).2 甘草查爾酮 A 清除 ABTS 的能力ABTS 也是一種比較穩(wěn)定的自由基,其溶液呈藍(lán)綠色。當(dāng)自由基清除,溶液中將會(huì)產(chǎn)生無色的 ABTS,從而使溶液的顏色變淺。由圖 2.2 可甘草查爾酮 A 濃度的增加,ABTS 清除率呈上升趨勢(shì);當(dāng)甘草查爾酮到 64μg/mL 時(shí),ABTS 清除率達(dá)到 91.28%,并保持不變。因此,AB結(jié)果表明,,甘草查爾酮 A 在胞外存在較強(qiáng)的抗氧化能力。

查爾酮,甘草,清除作用


圖 2.1 甘草查爾酮 A 對(duì) DPPH 的清除作用ig 2.1. DPPH scavenging rate of licochalcone A. The curves shown are each frosingle experiment (mean± SD, n=3).4.2 甘草查爾酮 A 清除 ABTS 的能力ABTS 也是一種比較穩(wěn)定的自由基,其溶液呈藍(lán)綠色。當(dāng)自由基清除劑時(shí),溶液中將會(huì)產(chǎn)生無色的 ABTS,從而使溶液的顏色變淺。由圖 2.2 可著甘草查爾酮 A 濃度的增加,ABTS 清除率呈上升趨勢(shì);當(dāng)甘草查爾酮 A達(dá)到 64μg/mL 時(shí),ABTS 清除率達(dá)到 91.28%,并保持不變。因此,ABTS測結(jié)果表明,甘草查爾酮 A 在胞外存在較強(qiáng)的抗氧化能力。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:O629

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2677381

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