【摘要】：恩諾沙星作為第三代氟喹諾酮類(lèi)藥物,在人類(lèi)和獸醫(yī)醫(yī)學(xué)中有十分廣泛的應(yīng)用,可用于治療包括泌尿、呼吸道和胃腸道感染等多種疾病。但其在畜禽養(yǎng)殖中的不規(guī)范使用會(huì)提高病原微生物耐藥性、危害人體健康以及給公共衛(wèi)生安全帶來(lái)威脅。因此,我國(guó)農(nóng)業(yè)部頒布的235等公告中,對(duì)恩諾沙星的使用及限量做出了明確的確定,特別強(qiáng)調(diào)產(chǎn)蛋雞禁用,并配套了相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)等,以確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。恩諾沙星作為獸藥殘留監(jiān)控計(jì)劃中重要的監(jiān)控參數(shù),已列入農(nóng)業(yè)部全國(guó)及地方范圍內(nèi)水產(chǎn)、畜禽等例行監(jiān)測(cè)、專(zhuān)項(xiàng)監(jiān)測(cè)計(jì)劃中,但近年來(lái)畜禽產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示,家禽等我國(guó)大宗畜禽產(chǎn)品中恩諾沙星等氟喹諾酮類(lèi)藥物仍持續(xù)有一定程度檢出。因此,恩諾沙星也成為了當(dāng)前我國(guó)雞蛋等畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)控的重點(diǎn)。為確保監(jiān)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠,有效支撐政府監(jiān)管工作,保證測(cè)量結(jié)果可靠性、可比性、準(zhǔn)確性,急需研制相關(guān)純度及基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。1.針對(duì)全蛋液中恩諾沙星基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究,本論文首先開(kāi)展了恩諾沙星純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制,以建立完整溯源鏈。實(shí)驗(yàn)通過(guò)紅外光譜法和質(zhì)譜法對(duì)候選物進(jìn)行定性,后采用兩種不同原理的方法-質(zhì)量平衡法和定量核磁法對(duì)候選物進(jìn)行純度定值,后進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性的監(jiān)測(cè)和考察,同時(shí)對(duì)整個(gè)純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制過(guò)程中的不確定度進(jìn)行評(píng)估。最終獲得恩諾沙星純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值準(zhǔn)確,均勻性和穩(wěn)定性均能達(dá)到技術(shù)要求,純度為99.7%。擴(kuò)展不確定度為0.4(k=2),并成功申報(bào)為國(guó)家二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(GBW(E)090817)。2.本論文建立了針對(duì)基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的高準(zhǔn)確度定值方法。以同位素標(biāo)記恩諾沙星為內(nèi)標(biāo),基于分散固相萃取前處理技術(shù)、結(jié)合高靈敏度三重四極質(zhì)譜分析技術(shù)、建立全蛋液中恩諾沙星殘留分析液相色譜-同位素稀釋質(zhì)譜法,準(zhǔn)確測(cè)量雞蛋中恩諾沙星藥物殘留含量。方法檢出限及定量限分別為0.5μg/kg和1.5μg/kg。在0.5μg/kg～100μg/kg內(nèi)線性良好,2μg/kg～20μg/kg濃度添加范圍內(nèi)回收率在95%-105%之間,可滿(mǎn)足基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值需求。3.研制全蛋液中恩諾沙星藥物殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。對(duì)蛋雞通過(guò)口服連續(xù)給藥5天,采集從給藥的第1天至給藥結(jié)束后的第9天,即14天內(nèi)的雞蛋,分析其殘留消除規(guī)律。針對(duì)符合濃度水平要求的雞蛋樣品原料,通過(guò)蛋液混合-均質(zhì)-封裝-輻照滅菌-封裝-超低溫保存等制備工藝,進(jìn)而獲得全蛋液基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物。采用已建立的同位素稀釋質(zhì)譜法,聯(lián)合多家實(shí)驗(yàn)室對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行定值研究。同時(shí)系統(tǒng)全面的研究雞蛋基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性、穩(wěn)定性等關(guān)鍵技術(shù),獲得研制結(jié)果如下:全蛋液中恩諾沙星藥物殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性量值及其擴(kuò)展不確定度(k=2)為30.6μg/kg±2.8μg/kg;長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察結(jié)果表明,于-80℃條件下保存,基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)目前滿(mǎn)足9個(gè)月穩(wěn)定。本研究的實(shí)施將為我國(guó)雞蛋產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)與評(píng)估結(jié)果的準(zhǔn)確、可比、可溯源提供技術(shù)基礎(chǔ)保障。
【圖文】：

邐邐邐圖１－１標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制流程逡逑Ｆｉｇｕｒｅｌ－１邋Ｔｈｅ邋ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ邋ｐｒｏｃｅｓｓ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ邋ｍａｔｅｒｉａｌｓ逡逑１逡逑

將經(jīng)過(guò)主成分定性分析且充分混合好的恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原料，減壓干燥后，置于潔凈、干逡逑燥的分裝環(huán)境中平衡后，分裝至５ｍＬ潔凈棕色西林瓶中，密封，壓蓋。每個(gè)包裝量為ｌＯＯｍｇ，共逡逑４００個(gè)包裝單元。置于４°Ｃ冰箱內(nèi)保存（如圖２－２）。逡逑圖２－２恩諾沙星純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分裝逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２－２邋Ｐａｒｔｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ邋ｐｕｒｉｔｙ邋ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ邋ｍａｔｅｒｉａｌ逡逑２．３．４均勻性考察逡逑按照ＪＪＧ邋１００６－１９９４“一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范”，，以及ＪＪＦ邋１３４３－２０１２“標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的通用原則逡逑及統(tǒng)計(jì)學(xué)原理”中的技術(shù)要求，當(dāng)包裝單在２００－５００之間時(shí)，抽取單元數(shù)不少于１５個(gè)。因此，本逡逑研宄對(duì)己分裝好恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。從中隨機(jī)抽取１５個(gè)包裝，將每個(gè)包裝分別逡逑配置成濃度為１００邋ｍｇ／Ｌ的甲醇溶液，然后采取高效液相色譜法檢驗(yàn)其均勻性。逡逑２．３．５穩(wěn)定性考察逡逑２．３．５．１長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察逡逑據(jù)ＪＪＧ１００６－１９９４《一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范》中的要求，按照先密后疏的原則對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定逡逑性考察進(jìn)行。本研宄采用液相色譜法，分別在第０－６個(gè)月對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察（楊夢(mèng)瑞逡逑等，２０１６）。每次抽取２個(gè)包裝，采用重量－容量法配制溶液，每個(gè)包裝平行測(cè)定３次。逡逑２．３．５．２灥穩(wěn)定性考察逡逑對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保存環(huán)境模擬成運(yùn)輸條件
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：O657.63;TS253.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 尹太坤;楊方;劉正才;林永輝;;全蛋凍干粉中4種蘇丹染料殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制[J];分析試驗(yàn)室;2015年11期

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本文編號(hào)：2661464