【摘要】：蛹蟲(chóng)草是一種藥食同源的真菌,作為中藥材長(zhǎng)期以來(lái)用于疾病的治療。蛹蟲(chóng)草多糖是蛹蟲(chóng)草中最主要、含量最豐富的活性成分之一,其降血糖活性已被小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所證實(shí)。但目前鮮有對(duì)蛹蟲(chóng)草多糖構(gòu)效關(guān)系研究方面的報(bào)道。因此,本文對(duì)蛹蟲(chóng)草多糖的分子結(jié)構(gòu)、化學(xué)改性等進(jìn)行了研究,并探討其對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性。課題的主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:蛹蟲(chóng)草粉末采用熱水浸提,并用木瓜蛋白酶-Sevag法除蛋白,醇沉得粗多糖。提取率為6.78%。采用SephadexG-200柱層析法得到純多糖命名為CPS。采用苯酚-硫酸法測(cè)定CPS總糖含量為95.83%。采用高效凝膠滲透(HPGPC)法檢測(cè)CPS的重均分子量為1.15×10~3kDa。采用剛果紅實(shí)驗(yàn)和圓二色譜法研究了 CPS的溶液行為,結(jié)果表明,溶液的pH、金屬離子、DMSO等絡(luò)合物的加入會(huì)極大的增加分子在溶液中的不對(duì)稱性。對(duì)蛹蟲(chóng)草多糖進(jìn)行羧甲基化修飾得多糖CM-CPS,乙�；揎椀枚嗵茿C-CPS。經(jīng)旋光儀測(cè)得CPS、CM-CPS和AC-CPS的比旋度分別為+86°、+75°和+61°。碘-碘化鉀實(shí)驗(yàn)說(shuō)明CPS、CM-CPS和AC-CPS均具有多分支或支鏈的大分子。利用傅里葉紅外光譜(FT-IR)和核磁共振(NMR)技術(shù)對(duì)CPS的結(jié)構(gòu)研究表明其主要以α-D-吡喃型多糖為主,對(duì)CM-CPS和AC-CPS進(jìn)行鑒定,說(shuō)明修飾成功。剛果紅實(shí)驗(yàn)和圓二色譜分析結(jié)果說(shuō)明CPS存在三股螺旋,主要以無(wú)規(guī)則卷曲形式存在。CM-CPS和AC-CPS的螺旋形結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,糖鏈發(fā)生了擴(kuò)展,延伸。通過(guò)掃描電子顯微鏡和原子力顯微鏡觀察得,CPS、CM-CPS和AC-CPS具有不同的外觀形態(tài),也說(shuō)明修飾使CPS的結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。熱分析結(jié)果表明3種多糖的熱性質(zhì)比較相似,修飾后的多糖焓變值較原多糖高。利用體外α-葡萄糖苷酶抑制劑試驗(yàn),阿卡波糖作為陽(yáng)性對(duì)照,分別測(cè)定純多糖、修飾多糖,對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率,結(jié)果表明:在一定濃度范圍內(nèi),CPS濃度越高,對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率越高;在濃度相同時(shí),不同溶液條件下多糖的抑制率與原糖相比都發(fā)生改變,且均低于水溶液條件下的蛹蟲(chóng)草多糖;蛹蟲(chóng)草多糖對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,乙�；揎椂嗵瞧浯�,羧甲基化修飾多糖最低。以上結(jié)果都表明多糖的高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,其對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性也相應(yīng)發(fā)生變化。
【圖文】：

３．２蛹蟲(chóng)草多糖的性質(zhì)及結(jié)構(gòu)分析逡逑３．２．１蛹蟲(chóng)草多糖的分離純化逡逑利用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００的分子篩效應(yīng)，對(duì)粗多糖進(jìn)行分離純化。如圖３－１所不，，粗逡逑多糖的洗脫曲線有兩個(gè)峰，且第一個(gè)峰的相對(duì)含量較高，因此本文將主峰收集，冷凍逡逑干燥后得純多糖，命名為ＣＰＳ，進(jìn)行下一步研宄。逡逑０．８邋ｒ逡逑Ｉ邋ｌ＼逡逑§：：邋［逡逑0１邋Ｊ逡逑０．０邋邐？邋？邋？邋？邋？■？＜邐１邐１邋邋邐■逡逑０邐０．０５邐０．１邐０．１５邐０．２邐０．２５邐０．３邐０．３５逡逑試管號(hào)（ｎ）逡逑圖３－１粗多糖的ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００洗脫曲線逡逑Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｅｌｕｔｉｏｎ邋ｐｒｏｆｉｌｅ邋ｏｆ邋ｃｒｕｄｅ邋ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ邋ｏｎ邋Ｓｅｐｈａｄｅｘ邋Ｇ－２００逡逑３．２．２蛹蟲(chóng)草多糖含量的測(cè)定逡逑以葡聚糖為標(biāo)準(zhǔn)品制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖３－２所示。結(jié)果表明，標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖濃度逡逑在０－０．１邋ｍｇ／ｍＬ之間呈良好的線性關(guān)系，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理后得回歸方程：逡逑ｙ＝１０．０３９ｘ－０．０００８，邋Ｒ２＝邋０．９９９７。按照苯酚－硫酸法，測(cè)得粗多糖的吸光值后，將結(jié)果逡逑代入此曲線中，計(jì)算樣品的糖含量。蛹蟲(chóng)草粗多糖的糖含量為３９．７５％。對(duì)過(guò)Ｓ�。瑁幔洌澹义希牵玻埃皩游鲋笫占臉悠防鋬龈稍锖螅ǎ茫校樱┻M(jìn)行糖含量測(cè)定，為９５．８３％，按照２．２．３．２逡逑方法測(cè)定顯示ＣＰＳ中不含

Ｆｉｇ．邋３－８邋１３Ｃ邋ＮＭＲ邋ｓｐｅｃｔｒａ邋ｏｆ邋ＣＰＳ逡逑３．２．９剛果紅實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析逡逑如圖３－９所示，可以看出蛹蟲(chóng)草多糖與剛果紅形成的絡(luò)合物，在一定濃度范圍內(nèi)逡逑的最大吸收波長(zhǎng)的變化，圖中絡(luò)合物的紫外吸收與剛果紅的相比發(fā)生了紅移，在ＮａＯＨ逡逑濃度為０．０－０．１ｍ0ｌ／Ｌ時(shí)，紫外吸收波長(zhǎng)移向長(zhǎng)波長(zhǎng)，說(shuō)明樣品可以與剛果紅形成絡(luò)合逡逑物，樣品有規(guī)則的螺旋構(gòu)象；當(dāng)ＮａＯＨ的濃度繼續(xù)增大時(shí)，最大吸收波長(zhǎng)下降，說(shuō)明逡逑多糖的螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生解體，變成了無(wú)規(guī)則的線團(tuán)形式。表明多糖樣品在弱堿性環(huán)境的逡逑范圍內(nèi)，可以形成有序的三股螺旋結(jié)構(gòu)，而在強(qiáng)堿性條件范圍下，分子間氫鍵遭到破逡逑壞
【學(xué)位授予單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：O629.12

【參考文獻(xiàn)】

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1 韓建華;楊淑芳;;蛹蟲(chóng)草多糖純化工藝研究[J];北方蠶業(yè);2015年03期

2 姜瓊;謝妤;;苯酚-硫酸法測(cè)定多糖方法的改進(jìn)[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年12期

3 楊爽;逯城宇;楊雪薇;逯家輝;張丹紅;;蛹蟲(chóng)草多糖降糖活性的研究[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2013年09期

4 孫納新;楊桂文;安立國(guó);;蛹蟲(chóng)草胞外多糖對(duì)MLD-STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠降血糖機(jī)理的研究(英文)[J];食品科學(xué);2013年11期

5 閆景坤;李琳;吳建勇;;外界條件對(duì)冬蟲(chóng)夏草胞外多糖構(gòu)象的影響[J];食品科學(xué);2012年13期

6 謝好貴;陳美珍;張玉強(qiáng);;多糖抗腫瘤構(gòu)效關(guān)系及其機(jī)制研究進(jìn)展[J];食品科學(xué);2011年11期

7 牟華;;蛹蟲(chóng)草多糖對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的調(diào)節(jié)作用[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2011年04期

8 郭風(fēng)霞;曾陽(yáng);徐萌;楊琳;;α-葡萄糖苷酶抑制劑的藥理研究進(jìn)展[J];青海師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年01期

9 湯偉;彭求賢;嚴(yán)愉妙;莫志賢;黃少慧;李欣;蔡紅兵;;大孔吸附樹(shù)脂法及離子交換層析柱法精制純化丹參多糖的研究[J];中藥材;2010年12期

10 沈悅娣;邵雪婷;倪有娣;許航;童向民;;蟲(chóng)草多糖增強(qiáng)雷公藤內(nèi)酯醇誘導(dǎo)的HL-60細(xì)胞凋亡作用及其機(jī)制[J];浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期

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1 孫納新;蛹蟲(chóng)草多糖降血糖的機(jī)理研究[D];山東師范大學(xué);2005年

2 倪德江;烏龍茶多糖的形成特征、結(jié)構(gòu)、降血糖作用及其機(jī)理[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

3 陳海霞;高活性茶多糖的一級(jí)結(jié)構(gòu)表征、空間構(gòu)象及生物活性的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

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4 陳磊;蛹蟲(chóng)草（Cordyceps militaris）生物學(xué)特性及發(fā)酵研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2561593