【摘要】：建立超高效合相色譜測定食品中游離氨基酸的方法。選取Acquity UPC2Torus Diol(3.0 mm×100 mm,1.7μm)色譜柱,流動(dòng)相由A(超臨界二氧化碳)和B(V(甲醇)∶V(乙腈)=1∶1)組成,2.5 mmol/L乙酸銨作為改性劑,流速2.0 m L/min,紫外檢測器波長280 nm,補(bǔ)償范圍330~430 nm,背壓1 800 psi。結(jié)果表明,該方法具有良好的線性(R2=0.999 0~0.999 8),分離度高于1.22,檢出限和定量限范圍分別為23~57 ng/L和70~178ng/L,線性范圍為20~400μg/m L,加標(biāo)回收率在85.6%~101.2%之間。該方法被成功用于火龍果酒樣品中游離氨基酸含量的測定,也為分析其他食品基質(zhì)中游離氨基酸分布情況提供了新的方法。
【圖文】：

2～5.0min98%～70%A，5.0～15.0min70%A，15.0～17.5min70%～98%A。1.3.5系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)按照徐莉等［16］的方法進(jìn)行線性、檢測限和定量限、靈敏度和精密度、回收率等系統(tǒng)適用性考察。2結(jié)果與分析2.1色譜柱篩選色譜的分離效果很大程度上取決于色譜填料及其鍵合方式［12］。本實(shí)驗(yàn)選擇AcquityUPC2BEH(3.0mm×100mm，1.7μm)、HSSC18SB(3.0mm×100mm，1.8μm)、TorusDiol(3.0mm×100mm，1.7μm)和TorusPIC(3.0mm×100mm，1.8μm)四款UPC2色譜柱，以選擇性、分離度為主要指標(biāo)進(jìn)行篩查，結(jié)果見圖1。圖1不同色譜柱分離氨基酸混標(biāo)衍生物的色譜圖Fig．1Chromatogramsofaminoacidderivativesseparatedwithdifferentchromatographycolumns色譜柱AcquityUPC2TorusDiol填料為高密度二醇，其表面鍵合相的色譜性能與傳統(tǒng)的未鍵合硅膠固定相相當(dāng)，可以有效改善酸性或堿性化合物分離過程中的整體穩(wěn)定性。由圖1可知，TorusDiol色譜柱能夠?qū)⒍鄶?shù)氨基酸衍生物有效分離，具有較好選擇性。2.2改性劑的選擇氨基酸是一類含有堿性氨基和酸性羧基的有機(jī)物，在水溶液中通常以兼性離子或偶極離子的形式存在，表現(xiàn)出典型的兩性電解質(zhì)特征。改變流動(dòng)相pH環(huán)境會(huì)影響氨基酸衍生物的電離特性，進(jìn)而有助于改善峰形［16］。本實(shí)驗(yàn)選擇三氟乙酸或乙酸銨作為改性劑，以考察改性劑對(duì)氨基酸衍生物峰形的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸銨對(duì)氨基酸衍生物的拖尾峰形有較好的改善，圖2

分析與檢測2017年第43卷第12期(總第360期)201分別為添加改性劑前后氨基酸標(biāo)品衍生物的色譜圖。鑒于乙酸銨本身是一種強(qiáng)電解質(zhì)鹽，容易對(duì)超臨界系統(tǒng)造成影響，輕則損傷色譜柱、降低柱效，重則堵塞系統(tǒng)管路、引起壓力激烈波動(dòng)，故將2.5mmol/L的乙酸銨作為改性劑。圖2添加改性劑分離氨基酸標(biāo)品衍生物的色譜圖Fig．2Chromatogramsofaminoacidderivativesseparatedwithorwithoutmobilephasemodifier2.3助溶劑選擇超臨界流體色譜是以超臨界CO2為主體，以少量甲醇、乙腈或異丙醇等有機(jī)溶劑為助溶劑，通過調(diào)整流動(dòng)相的極性改變對(duì)分析物的溶解性，進(jìn)而達(dá)到改變目標(biāo)物洗脫順序和優(yōu)化分離效果的目的［17］。本實(shí)驗(yàn)比較了甲醇、乙腈、甲醇和乙腈混合溶液等作為助溶劑對(duì)氨基酸衍生物的分離效果。由圖3可以看出，在助溶劑甲醇中加入等體積乙腈，極性相對(duì)降低，流動(dòng)相的溶解能力也得到相應(yīng)改變，部分氨基酸衍生物的保留變?nèi)�，，出峰時(shí)間推遲，使得部分氨基酸衍生物之間的分離效果提高。雖然超臨界流體系統(tǒng)中采用的助溶劑比例不高，但對(duì)目標(biāo)化合物的保留強(qiáng)度即出峰時(shí)間快慢有著重要影響，這對(duì)于超臨界流體色譜方法開發(fā)、色譜條件優(yōu)化具有非常重要的意義。圖3不同助溶劑分離的氨基酸衍生物標(biāo)品的色譜圖Fig．3Chromatogramsofaminoacidderivativesseparatedwithdifferentco－solvents2.4其他色譜條件優(yōu)化超高效合相色譜技術(shù)結(jié)合了亞2μm填料和高效超臨界流色譜兩項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，具有較高的擴(kuò)散系數(shù)和傳質(zhì)速率，分析時(shí)間更短，分離效能更高。由于溫度、壓力和流速的微小變化都能引起流動(dòng)相密度改變，進(jìn)而改變對(duì)分析物的溶解能力，所以調(diào)節(jié)柱溫、自動(dòng)調(diào)節(jié)備壓都可以調(diào)節(jié)目標(biāo)化合物的分離效果［16－17］。本實(shí)驗(yàn)考察了自動(dòng)調(diào)節(jié)背壓(1500?
【作者單位】： 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品加工質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室;中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院;銅仁市食品藥品檢驗(yàn)所;
【基金】：中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(1630122017021) 湛江市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2016A03012) 農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303077)
【分類號(hào)】：O657.7;TS262.7

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2 甘秀海;梁志遠(yuǎn);王道平;胡外英;王瑞;;固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法分析火龍果果肉中揮發(fā)性成分[J];理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè));2012年06期

3 劉小玲,許時(shí)嬰,王璋;火龍果色素的基本性質(zhì)及結(jié)構(gòu)鑒定[J];無錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào);2003年03期

4 胡力川;蘭佳玉;董海英;王秀峰;;火龍果中微量元素Fe Mn Zn含量測定[J];微量元素與健康研究;2012年01期

5 袁亞芳;趙珍珍;王威;陳清西;余志雄;;紅肉火龍果果皮色素的分離、純化和HPLC-MS分析[J];福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年06期

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