【摘要】：建立了超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC/PDA-QDa)同時(shí)對(duì)大麻植物中Δ9-四氫大麻酚(Δ9-THC)、大麻酚(CBN)和大麻二酚(CBD)進(jìn)行定性與定量分析的方法。繳獲的大麻植物用甲醇超聲萃取,采用甲醇(含0.1%甲酸)和超純水為流動(dòng)相,等度洗脫,流速為0.2 m L/min,經(jīng)Waters UPLC BEH C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分離,利用光電二極管陣列檢測(cè)器(PDA)在220 nm波長(zhǎng)下檢測(cè),并通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)器(QDa)對(duì)目標(biāo)洗脫峰進(jìn)行追蹤確證。在0.5~20μg/m L濃度范圍內(nèi),3種大麻酚類化合物的質(zhì)量濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系,R≥0.999;低、中、高添加水平的平均回收率為82%~102%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在0.4%~4.1%之間。本方法穩(wěn)定、簡(jiǎn)便、靈敏,能夠滿足檢測(cè)需求。根據(jù)Δ9-THC、(Δ9-THC+CBN)/CBD、Δ9-THC/CBD或CBN/CBD表型指數(shù),區(qū)分不同產(chǎn)地大麻的化學(xué)表型,為大麻植物的檢測(cè)分析和質(zhì)量控制提供了有效手段。
【圖文】：

OHOC5H11（-）鄄駐9鄄trans鄄tetrahydrocannabinol駐9鄄四氫大麻酚(駐9鄄THC,C21H30O2,MW=314.5)OHOC5H11Cannabinol大麻酚(CBN,C21H26O2,MW=310.4)OHOHC5H11(CBD,C21H30O2,MW=314.5)Cannabidiol大麻二酚圖13種大麻酚類的分子結(jié)構(gòu)式Fig．1Chemicalstructuresofthreecannabinoids2實(shí)驗(yàn)部分2．1儀器與試劑ACQUITYUPLCH-Class超高效液相色譜儀(WatersEmpowerTM3數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國(guó)Waters公司);ACQUITY光電二極管陣列檢測(cè)器(PDA，可操作波長(zhǎng)190～500nm，光學(xué)分辨率1．2nm)和ACQUITYQDaTM質(zhì)譜檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司);超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(德國(guó)Sigma公司);MettlerToledo-XS105電子天平(瑞士Mettler公司);高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司);0．22μmMCE針頭式過(guò)濾器(上海島津技邇商貿(mào)有限公司)。甲醇(美國(guó)FisherScientific公司)、甲酸(美國(guó)Sigma公司)為色譜純;實(shí)驗(yàn)用水均為超純水(美國(guó)Millipore公司超純水裝置制備);Δ9-THC、CBD和CBN標(biāo)準(zhǔn)品(均為1．0mg/mL甲醇溶液，美國(guó)Ceril-liant公司)，!20℃避光保存。混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:分別準(zhǔn)確移取Δ9-THC、CBD和CBN標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液置于2mL容量瓶中，以甲醇稀釋并定容，配制成0．5、1、2、5、10和20μg/mL的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。2．2樣品前處理選取不同產(chǎn)地的30個(gè)大麻樣本，經(jīng)登記備案獲批后，研磨成均勻細(xì)粉待用。準(zhǔn)確稱取10mg大麻植物粉末，置于15mL塑料離心管中，加入甲醇5mL，經(jīng)水浴超聲萃取30min后，以6000r/min離心5min，取上清液過(guò)0．22μm針孔濾膜，供UPLC/PDA-QDa分析。2．3分析條件和數(shù)據(jù)分析色譜條件:色譜柱為WatersACQUITYTMUPLCBEHC18柱(50mm×2．1mm，1?

不僅能達(dá)到較好的分離效果，且分離時(shí)間較短，目標(biāo)分析物可在4min內(nèi)流出色譜柱。為避免天然產(chǎn)物中組分眾多可能存在的樣品間干擾，將分離檢測(cè)時(shí)間延長(zhǎng)至7min。采用優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)大麻混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及大麻植物樣品溶液檢測(cè)，3種目標(biāo)大麻酚類化合物的色譜圖見(jiàn)圖2。2t（min）046A1232t（min）046B123圖2大麻混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(A)和大麻植物樣品溶液(B)的超高效液相色譜圖Fig．2UPLCchromatogramsofcananbismixturereference(A)andcannabisplant(B)1．CBD，2．CBN，3．Δ9-THC．3．3UPLC方法學(xué)驗(yàn)證3．3．1方法的專屬性在方法建立期間，通過(guò)優(yōu)化峰間距并增大分離度，保證峰的專屬性。CBD、CBN和Δ9-THC的保留時(shí)間分別為1．1、1．6和1．9min，各成分與其相鄰色譜峰的分離度均大于1．6，拖尾因子在1．16～1．23之間。同時(shí)，，QDa檢測(cè)器作為光學(xué)數(shù)據(jù)的補(bǔ)充，具有更高質(zhì)量的定性質(zhì)譜數(shù)據(jù)，可對(duì)組分進(jìn)行進(jìn)一步確證。在正離子模式下掃描，根據(jù)對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的碎片離子質(zhì)譜圖分析，Δ9-THC、CBN和CBD的m/z分別為315、311和315。分別在m/z315和311下提取離子流質(zhì)譜圖，對(duì)大麻樣本的洗脫峰進(jìn)行比對(duì)分析。圖3和圖4是利用質(zhì)譜檢測(cè)器QDa對(duì)Δ9-THC、CBN和CBD各峰的追蹤確證結(jié)果，與PDA檢測(cè)分析一致，且無(wú)基質(zhì)干擾。在選定實(shí)驗(yàn)條件下，所測(cè)的3個(gè)大麻酚類組分與其它組分完全分離，滿足含量測(cè)定要求。2t（min）Intensity(×104)046A2.04.06.08.010.0121002003004005001.StdCBDm/z130.35315.321002003004005002.StdTHCm/z315.302t（min）Intensity(×104)046B2.03.04.05.0120.01.00.0135135圖3大麻混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(A)和?
【作者單位】： 中國(guó)人民公安大學(xué);公安部物證鑒定中心;
【基金】：國(guó)家重大儀器研發(fā)專項(xiàng)毒品現(xiàn)場(chǎng)定性定量分析儀項(xiàng)目(No.2012YQ12004910)資助~~
【分類號(hào)】：O657.63;Q946


本文編號(hào)：2530908