【摘要】：以刷子狀水溶性共軛聚芴(PFNI)為傳感材料,以熒光素標(biāo)記的核酸適體(FAM-apt15)為探針,設(shè)計(jì)了一種檢測凝血酶的高靈敏度蛋白質(zhì)傳感器.PFNI的刷狀結(jié)構(gòu)帶有大量正電荷,與負(fù)電荷的柔性單鏈核酸探針形成靜電復(fù)合物,使能量供體(PFNI)與受體(FAM)之間的距離較近,發(fā)生高效熒光共振能量轉(zhuǎn)移(F?ster resonance energy transfer,FRET).當(dāng)探針與靶凝血酶結(jié)合時(shí),形成剛性且體積較大的G-四鏈體/凝血酶復(fù)合物,由于體積位阻和密集的刷子的阻礙作用,PFNI與FAM之間的距離被拉大,FRET效率顯著降低.對緩沖溶液中凝血酶檢測的最低檢測限可達(dá)0.05 nmol/L.與基于線型共軛聚合物的蛋白質(zhì)檢測方法相比,靈敏度提高了至少一個(gè)數(shù)量級(jí).
[Abstract]:A highly sensitive protein sensor for detecting thrombin was designed using brush-like water-soluble conjugated polyfluorene (PFNI) as sensing material and fluorescein labeled aptamer (FAM-apt15) as probe. The brush structure of PFNI was characterized by a large number of positive charges. An electrostatic complex is formed with a negative charge flexible single-stranded nucleic acid probe, which makes the distance between the energy donor (PFNI) and the receptor (FAM) close, resulting in high efficiency fluorescence resonance energy transfer (F?ster resonance energy transfer,FRET). When the probe binds to the target thrombin, it forms a rigid and large G- quadruplex / thrombin complex. The distance between PFNI and FAM is enlarged and the FRET efficiency is significantly reduced due to the volume hindrance and the blocking effect of dense brushes. The minimum detection limit of thrombin in buffer solution is 0. 05 nmol/L.. Compared with the linear conjugated polymer based protein detection method, the sensitivity is improved by at least one order of magnitude.
【作者單位】： 南京郵電大學(xué)信息材料與納米技術(shù)研究院有機(jī)電子與信息顯示國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地江蘇省有機(jī)電子和信息顯示協(xié)同創(chuàng)新中心;南京工業(yè)大學(xué)先進(jìn)材料研究院江蘇省柔性電子重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室先進(jìn)生物與化學(xué)制造協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(Nos.2012CB933301,2012CB723402) 國家自然科學(xué)基金(Nos.21005040;51173080) “有機(jī)與生物光電子學(xué)”教育部創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(No.IRT1148) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目 江蘇省自然科學(xué)基金(BK20141424) 江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(CXLX12_0792) 南京郵電大學(xué)�？蒲许�(xiàng)目(NY215171)資助~~
【分類號(hào)】：O631.3;TP212

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本文編號(hào)：2391777