【摘要】：蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)重要的組成成分之一,幾乎參與所有的生命活動和生命過程。蛋白質(zhì)幾乎可以自發(fā)地吸附在任何材料表面上,這種現(xiàn)象很早就已經(jīng)被人們發(fā)現(xiàn)。蛋白質(zhì)在界面上的吸附是一種普遍現(xiàn)象,也是解決界面科學(xué)、生物材料以及生物工程領(lǐng)域中許多問題的關(guān)鍵,對蛋白質(zhì)在界面上吸附問題的研究有著重要的理論和實(shí)際意義。目前對于蛋白質(zhì)在材料上吸附行為的研究較為成熟,對于其在材料上解吸附行為的研究還處于初級階段。當(dāng)前對于蛋白質(zhì)在云母表面解吸附的研究還未見報道,本文旨在探索出蛋白質(zhì)在云母上解吸附的方法。借助于原子力顯微鏡(AFM)直觀地觀察了牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶這兩種特征蛋白在云母表面的吸附、解吸附情況。解吸附是以十二烷基苯磺酸鈉(SDBS)和氫氧化鈉(NaOH)溶液為解吸附劑得以實(shí)現(xiàn)的。本論文的主要研究工作如下:1.SDBS誘導(dǎo)蛋白質(zhì)從云母表面解吸附的AFM研究。以SDBS為解吸附劑,通過SDBS與蛋白質(zhì)之間的相互作用,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)從云母表面的解吸附。AFM表征結(jié)果顯示,牛血清白蛋白和溶菌酶在云母表面的吸附量隨蛋白質(zhì)溶液濃度的增加而增加;隨吸附時間增加而增加;蛋白質(zhì)的脫附程度隨SDBS濃度增加而增大;隨脫附時間的增加而增大;中性環(huán)境下溶菌酶比BSA更容易吸附在云母表面;溶菌酶比BSA更不容易發(fā)生解吸附。2.NaOH誘導(dǎo)蛋白質(zhì)從云母表面解吸附的AFM研究。蛋白質(zhì)是氨基酸構(gòu)成的一種兩性電解質(zhì),在一定的溶液pH條件下可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。通過改變?nèi)芤旱膒H使蛋白質(zhì)帶負(fù)電或負(fù)電性增強(qiáng)從而使云母與蛋白質(zhì)的靜電斥力大于二者之間的引力,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)從云母上的解吸附。AFM表征結(jié)果顯示,將吸附樣品浸入到氫氧化鈉溶液中可以使BSA和溶菌酶從云母上解吸附下來;使BSA發(fā)生解吸附的pH值與其等電點(diǎn)相差很大,而使溶菌酶發(fā)生解吸附的pH值與其等電點(diǎn)基本一致。
[Abstract]:Protein is one of the most important components in organism, which is involved in almost all life activities and processes. Proteins can spontaneously adsorb on almost any material surface, a phenomenon that has long been known. The adsorption of proteins on the interface is a common phenomenon and the key to solve many problems in the field of interface science, biomaterials and bioengineering. It is of great theoretical and practical significance to study the problem of protein adsorption on the interface. At present, the study on the adsorption behavior of protein on the material is more mature, and the study on the desorption behavior of protein on the material is still in the primary stage. At present, the study of protein desorption on mica surface has not been reported. The purpose of this paper is to explore the method of protein desorption on mica surface. The adsorption and desorption of bovine serum albumin (BSA) (BSA) and lysozyme on mica surface were observed intuitively by atomic force microscope (AFM). The desorption was achieved by using sodium dodecylbenzene sulfonate (SDBS) and sodium hydroxide (NaOH) as desorption agents. The main work of this thesis is as follows: AFM study of 1.SDBS induced protein desorption from mica surface. Using SDBS as desorption agent, the desorption of protein from mica surface was realized by the interaction between SDBS and protein. The results of AFM characterization showed that, The adsorption of bovine serum albumin and lysozyme on mica surface increased with the increase of protein concentration. The desorption degree of protein increased with the increase of SDBS concentration, and increased with the increase of desorption time. Lysozyme was more easily adsorbed on the surface of mica than that of BSA in neutral environment. Lysozyme is less easily desorbed than BSA. AFM study of 2.NaOH induced protein desorption from mica surface. Protein is a amphoteric electrolyte composed of amino acids, which can be dissociated into negative or positively charged groups under certain solution pH conditions. By changing the pH of the solution, the protein with negative charge or negative charge is enhanced, so that the electrostatic repulsive force between mica and protein is greater than the gravity between them, and then the desorption of protein from mica is realized. The results of AFM characterization show that the electrostatic repulsive force between mica and protein is greater than that between mica and protein. BSA and lysozyme can be desorbed from mica by soaking the adsorbed sample into sodium hydroxide solution. The pH value of BSA desorbed was significantly different from its isoelectric point, but the pH value of lysozyme desorbed was basically consistent with its isoelectric point.
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：O647.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2374093