【摘要】:茶(Camellia sinensis),山茶科,常綠灌木或小喬木,茶樹葉子制成茶葉,泡水后即可飲用,是我國的傳統(tǒng)飲品,茶中富含茶多酚、咖啡堿、氨基酸、多糖等生物活性物質(zhì),具有降血壓、降血糖、抗衰老、助消化、緩解疲勞等功效。本文基于超高效液相色譜-質(zhì)譜法建立了針對茶葉中幾種主要有效成分的分析檢測方法,同時利用化學比色法對茶多酚的快速檢測進行了一定的研究。旨為茶葉品質(zhì)評價及漢中茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供分析檢測技術(shù)保障。研究的主要內(nèi)容可分為以下幾個方面。(1)建立了一種同時測定茶葉中8種有效成分(兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、茶氨酸、咖啡因)的UPLC-MS/MS分析方法。采用Waters ACQUITY BEH C18色譜柱分離,串聯(lián)四級桿質(zhì)譜多反應離子監(jiān)測測定,外標法定量。色譜系統(tǒng)流速為250μL/min,柱溫為30℃,流動相為0.1%甲酸和乙腈,梯度洗脫。結(jié)果表明,8種有效成分在各自的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)大于0.991;精密度實驗RSD值均小于5%,說明方法精密度良好;穩(wěn)定性實驗RSD值均小于5%,表明了該方法穩(wěn)定性良好;重復性實驗的RSD值均小于3%,表明了該方法的重復性良好;平均回收率(n=5)在94.7%~104.7%之間,方法的檢出限在3.0~60.0 ng/mL之間,方法的定量限在6.0~200.0 ng/mL之間。(2)在單因素試驗的基礎(chǔ)之上,采用響應面優(yōu)化茶葉茶多酚的樣品制備條件,優(yōu)化條件為:液料比為26:1(mL/g),浸提時間為24 min,浸提溫度為91℃,pH值為7.4,最大得率為20.56%。在優(yōu)化條件下制備樣品,采用超高效液相串聯(lián)質(zhì)譜測定并計算,茶多酚的得率能達到20.75%。結(jié)果表明,試驗研究建立的樣品制備工藝和條件可行,結(jié)合UPLC-MS/MS測定,能夠更準確的對茶葉中茶多酚進行定性、定量分析。(3)建立了一種快速測定紅茶中4種茶黃素(茶黃素、茶黃素-3-沒食子酸酯、茶黃素-3’-沒食子酸酯和茶黃素-3,3’-雙沒食子酸酯)的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的分析方法。樣品用70%的甲醇水浴提取,采用Waters ACQUITY BEH C18色譜柱分離,串聯(lián)四級桿質(zhì)譜多反應離子監(jiān)測,外標法定量;色譜系統(tǒng)流速為250μL/min,柱溫為30℃,流動相為0.1%甲酸和乙腈,梯度洗脫。結(jié)果表明,4種茶黃素在檢測范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)大于0.9991,平均回收率(n=5)在91.95%~105.37%之間,RSD在2.37%~4.03%之間;方法的檢出限在13.2~19.1 ng/mL之間,方法的定量限在39.7~52.6 ng/mL之間。該檢測方法能快速檢測紅茶中的茶黃素含量,有效分析評價紅茶的品質(zhì),合理控制紅茶生產(chǎn)質(zhì)量。(4)利用化學比色技術(shù),探究了氯化鐵溶液(0.02 g/mL)、高錳酸鉀溶液(0.002 g/mL)及酒石酸亞鐵溶液快速檢測茶多酚的方法。研究結(jié)果表明:氯化鐵色度曲線在0.10~0.70mg/mL的濃度范圍內(nèi)具相應的準確性,大于0.70 mg/mL后不具有區(qū)分性;高錳酸鉀色度曲線在0~0.80 mg/mL的濃度范圍內(nèi)具相應的準確性,大于0.80 mg/mL后不具有區(qū)分性;酒石酸亞鐵曲線在0~0.50 mg/mL的濃度范圍內(nèi)具相應的準確性,大于0.50 mg/mL后不具有區(qū)分性。利用建立的色度曲線對樣品進行了檢測,結(jié)果表明:氯化鐵測得樣品茶多酚在1.50~2.00 mg/mL之間;高錳酸鉀測得樣品茶多酚含量在1.20~1.80 mg/mL之間;酒石酸亞鐵測得樣品在1.50~2.00 mg/mL之間。綜合三種方法的結(jié)果,可以推測茶多酚濃度在1.50~1.80 mg/mL之間樣品,但該檢測技術(shù)的靈敏度還有待進一步研究。論文建立的用于分析檢測茶葉中的茶多酚、茶色素、茶氨酸及咖啡堿的方法具有分析速度快、檢測靈敏度高、準確度高等特點,為茶葉品質(zhì)分析評價研究提供新的技術(shù);茶多酚快速檢測技術(shù)的構(gòu)建,為茶葉中有效成分快速分析提供一種思路。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:陜西理工大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:O657.63;TS272.7
【參考文獻】
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2344494
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