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一種基于磁性石墨烯的紙基電化學(xué)發(fā)光夾心免疫分析方法

發(fā)布時間:2018-10-31 11:45
【摘要】:基于電化學(xué)發(fā)光及磁懸浮免疫分析策略,結(jié)合磁性石墨烯獨特的物理化學(xué)特性以及紙基電極價格低廉、樣品用量少的優(yōu)勢,建立了一種新型免疫分析方法。以人免疫球蛋白G(IgG)為分析物,采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺/N-羥基硫代琥珀酰亞胺(EDC/NHS)法將一抗(Ab_1,捕獲抗體)固定在磁性石墨烯上,通過直接標記法進行二抗(Ab_2,信號抗體)的電化學(xué)發(fā)光試劑標記,采用磁懸浮夾心免疫技術(shù)最大程度減少非特異性吸附,通過紙基電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)測定目標物的濃度?疾炝瞬东@抗體及信號抗體的固定(標記)效果,發(fā)現(xiàn)采用的磁性石墨烯不僅提高了免疫物質(zhì)的負載量,還可以促進電子傳遞,構(gòu)建的磁懸浮紙基電化學(xué)發(fā)光夾心免疫分析法的電化學(xué)發(fā)光響應(yīng)峰面積在0.32~1000 ng/mL濃度范圍內(nèi),與IgG濃度對數(shù)值呈良好的線性關(guān)系,檢出限為6.4 pg/mL。本方法可實現(xiàn)IgG的定量檢測,在低成本、快速免疫檢測領(lǐng)域有一定的應(yīng)用前景。
[Abstract]:Based on the strategies of electrochemiluminescence and maglev immunoassay, a novel immunoassay method was established based on the unique physical and chemical properties of magnetic graphene and the advantages of low price of paper based electrode and less sample consumption. Using human immunoglobulin G (IgG) as the analytical material, the first antibody (Ab_1,) was determined by 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) -carbodiimide / N-hydroxythiosuccinimide (EDC/NHS) method. The captured antibody was immobilized on the magnetic graphene, and the electrochemiluminescence (ECL) labeling of the second antibody (Ab_2, signal antibody) was carried out by direct labeling method. The magnetic levitation sandwich immunoassay was used to minimize the nonspecific adsorption. The concentration of the target was determined by paper-based electrochemiluminescence (ECL). The immobilization (labeling) effect of capture antibody and signal antibody was investigated. It was found that magnetic graphene not only increased the load of immune material, but also promoted electron transfer. The electrochemical luminescence response peak area of magnetic levitation paper based electrochemiluminescence sandwich immunoassay was within the concentration range of 0.32 ~ 1000 ng/mL, which showed a good linear relationship with the logarithmic value of IgG concentration, and the detection limit was 6.4 pg/mL.. This method can be used for quantitative detection of IgG, and has a certain application prospect in the field of low cost and fast immune detection.
【作者單位】: 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實驗科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.81401752) 廣州市科技計劃(No.201607010121) 軍隊后勤保障項目(No.CGZ16J002)資助~~
【分類號】:O657.1

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本文編號:2302058

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