【摘要】：報(bào)道了α-糜蛋白酶(α-CT)催化活性及其與陽(yáng)離子雙子表面活性劑(N,N′-雙(十二烷基二甲基)-1,2-二溴化癸二銨,簡(jiǎn)寫為12-10-12)相互作用熱力學(xué)的關(guān)系。酶活性通過紫外-可見吸收光譜法測(cè)量底物醋酸2-萘酯(2-NA)分解速率進(jìn)行評(píng)估。在較短的培育時(shí)間內(nèi),12-10-12能夠激活α-CT,得到催化2-NA分解的超活性,同時(shí)也加速了酶變性的動(dòng)力學(xué)過程。在低于α-CT/12-10-12體系的臨界聚集濃度(cac12-10-12,CT)時(shí),顯示一個(gè)鐘形的大的超活性區(qū)。酶活性隨時(shí)間變化的結(jié)果表明,由12-10-12激活的α-CT有高的酶活性和低的變性穩(wěn)定性。進(jìn)而采用等溫滴定量熱(ITC)、穩(wěn)態(tài)熒光光譜和差示掃描量熱(DSC)技術(shù)研究了12-10-12誘導(dǎo)α-CT超活性的機(jī)理。結(jié)果表明酶的超活性來源于正電荷的12-10-12與α-CT相互作用對(duì)α-CT內(nèi)部結(jié)構(gòu)的擾動(dòng),使得酶的構(gòu)象變得比處于弱相互作用平衡的天然酶的構(gòu)象更加松弛,這有利于2-NA水解酸性產(chǎn)物釋放的動(dòng)力學(xué),而同時(shí)也導(dǎo)致了α-CT結(jié)構(gòu)的不穩(wěn)定性。
[Abstract]:The catalytic activity of 偽-chymotrypsin (偽-CT) and the relationship between 偽-chymotrypsin (偽-chymotrypsin) activity and the interaction thermodynamics of cationic Gemini surfactants (N- (dodecyl dimethyl)-1 (dodecyl dimethyl)-1 + 2-dibromodecylammonium) (12-10-12) are reported. The enzymatic activity was evaluated by UV-vis absorption spectrometry to measure the decomposition rate of substrates 2-naphthalene acetate (2-NA). In a short incubation time, 12-10-12 can activate 偽-CT, to catalyze the decomposition of 2-NA and accelerate the kinetic process of enzymatic denaturation. Below the critical aggregation concentration (cac12-10-12,CT) of 偽-CT/12-10-12 system, a large bell-shaped superactive region is shown. The results showed that 偽-CT activated by 12-10-12 had high enzyme activity and low denaturation stability. The mechanism of 偽-CT superactivity induced by 12-10-12 was studied by means of steady state fluorescence spectra and differential scanning calorimetry (DSC) techniques of isothermal drop quantitative thermal (ITC), and differential scanning calorimetry (DSC). The results show that the superactivity of the enzyme originates from the disturbance of the internal structure of 偽-CT by the interaction between 12-10-12 and 偽-CT, which makes the conformation of the enzyme more relaxed than that of the natural enzyme with weak interaction equilibrium. This is beneficial to the release kinetics of acidic products hydrolyzed by 2-NA, and also leads to the instability of 偽-CT structure.
【作者單位】： 河南師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院精細(xì)化學(xué)品綠色制造河南省協(xié)同創(chuàng)新中心綠色化學(xué)介質(zhì)與反應(yīng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河南科技學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院;
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(21273061,21573061) Scientific Research Project of Higher Education of Henan Province,China(17A150032)~~
【分類號(hào)】：O629.8;O647.2

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本文編號(hào)：2287550