【摘要】：聚合物整體柱因具有制備方法簡(jiǎn)單、傳質(zhì)快、滲透性好等優(yōu)點(diǎn),而被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)和生物科學(xué)等領(lǐng)域的色譜分離分析中。本文通過采用氧化還原體系引發(fā)制備了兩種聚合物整體柱,旨在改善聚合物整體柱分離小分子化合物的柱效和提高其對(duì)于生物大分子的選擇性。首先以二甲基丙烯酸-1,6-己二醇酯作為單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑,環(huán)己醇和1,4-丁二醇為二元致孔劑,過氧化苯甲酰和N,N-二甲基苯胺組成的氧化還原體系為引發(fā)劑,在30℃水浴下成功地制備了聚合物整體柱。分別通過掃描電子顯微鏡、氮吸附-脫附法、壓汞法對(duì)該整體柱進(jìn)行了表征,結(jié)果表明該整體柱具有孔徑分布較均勻的多孔骨架結(jié)構(gòu)。高效液相色譜實(shí)驗(yàn)表明,將該整體柱作為固定相,成功地分離了七種芳香族化合物的混合物,其中柱效最高可達(dá)21,000理論塔板/米。同時(shí)對(duì)掌葉大黃中的五種活性成分進(jìn)行了分離和定量分析,方法的回收率在98.48%至101.57%之間,五種活性成分的檢測(cè)限和定量限分別小于33.7 ng和90.8 ng。其次,采用相同的引發(fā)體系,以氯化血紅素和甲基丙烯酸月桂酯為二元單體;乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑;正丁醇、乙二醇、N,N-二甲基甲酰胺為三元致孔劑;在室溫下制備了聚合物整體柱。通過掃描電子顯微鏡、氮吸附-脫附法、壓汞法探究了該整體柱的內(nèi)部孔結(jié)構(gòu),表明該整體柱具有均勻的多孔結(jié)構(gòu)。以該整體柱作為高效液相色譜固定相,對(duì)五種芳香族化合物的混合物進(jìn)行了分離,最高柱效可達(dá)19,880理論塔板/米。此外,該整體柱對(duì)于復(fù)雜的生物樣品,如人血漿、雞卵清、蝸牛酶等中的蛋白質(zhì)具有良好的選擇性和分離能力。值得一提的是,該整體柱能夠在線去除人血漿中的三種高豐度蛋白,并同時(shí)對(duì)人血漿中的其他蛋白質(zhì)進(jìn)行分級(jí)分離,展現(xiàn)了氯化血紅素對(duì)于改善整體柱對(duì)蛋白質(zhì)的選擇性的重要作用。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本文通過氧化還原引發(fā)體系制備的整體柱能夠在一定程度上提高分離小分子化合物的柱效,基于氯化血紅素的整體柱則較大程度的改善了聚合物整體柱對(duì)于復(fù)雜生物基質(zhì)中蛋白質(zhì)的選擇性。
[Abstract]:Polymer monolithic columns have been widely used in chromatographic separation and analysis in life sciences, environmental sciences and biological sciences due to their advantages of simple preparation, fast mass transfer and good permeability. In this paper, two kinds of polymer monolithic columns were prepared by using redox system to improve the column efficiency of separation of small molecular compounds and their selectivity to biomolecules. Firstly, the redox system composed of dimethacrylate and N-dimethylaniline as monomer, ethylene glycol dimethacrylate as crosslinker, cyclohexanol and 1-butanediol as binary pore-forming agent, benzoyl peroxide and N- N-dimethylaniline as initiators. The polymer monolithic column was successfully prepared in water bath at 30 鈩，

本文編號(hào)：2145574