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基于二氧化錳納米片層快速檢測(cè)生物小分子的新方法研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-29 22:22

  本文選題:生物小分子 + 二氧化錳納米片層; 參考:《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:葡萄糖、氨基酸、谷胱甘肽等生物小分子是組成生物大分子的構(gòu)件分子,在生命活動(dòng)中起著特別重要的作用。這些小分子的含量及狀態(tài)直接關(guān)系到生物體的健康情況,因此深入研究生物小分子對(duì)于在分子水平上闡明生命過(guò)程、疾病治療、藥物開(kāi)發(fā)等方面具有重要意義。特別是建立快速、靈敏、高效的對(duì)生物分子的檢測(cè)方法更成為了化學(xué)生物分析領(lǐng)域的研究前沿和熱點(diǎn)。本論文基于納米材料,發(fā)展了簡(jiǎn)便、快速、靈敏地葡萄糖和谷胱甘肽檢測(cè)的新方法,具體包括以下三個(gè)方面:1、葡萄糖在生物新陳代謝過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用,同時(shí)它的含量也與肥胖或低血糖癥有著緊密聯(lián)系。本實(shí)驗(yàn)建立了一種基于二氧化錳納米片層的簡(jiǎn)單、快速比色檢測(cè)葡萄糖的傳感方法。葡萄糖可以在葡萄糖氧化酶的存在下生成葡萄糖酸和雙氧水,雙氧水在中性條件下進(jìn)一步通過(guò)消解二氧化錳納米片層,使在其在376 nm處的吸光度下降;诖,通過(guò)檢測(cè)二氧化錳納米片層水溶液在376 nm處的吸光度變化,建立起了葡萄糖濃度和吸光度變化值的關(guān)系。該方法對(duì)葡萄糖的檢測(cè)范圍為0.5μM-50μM,檢測(cè)限達(dá)到0.17μM。同時(shí)基于二氧化錳溶液的顏色變化可以發(fā)展成一種可視化半定量的檢測(cè)手段,這種方法在血清中檢測(cè)葡萄糖仍可以得到可靠的結(jié)果,進(jìn)而提供一種低成本、高靈敏的生物和臨床診斷方法。本實(shí)驗(yàn)提出的檢測(cè)方法檢測(cè)過(guò)程較快、便捷、簡(jiǎn)單、環(huán)保,不需要制備復(fù)雜的功能納米探針,無(wú)需昂貴的儀器,進(jìn)一步提供了雙氧水涉及的目標(biāo)物檢測(cè)潛力。2、谷胱甘肽廣泛存在于哺乳動(dòng)物和真核生物的細(xì)胞中,可以減少細(xì)胞代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基、維持新陳代謝過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)基于二氧化錳納米片層溶液建立起了一種快速免標(biāo)、高靈敏和高選擇性的谷胱甘肽的比色檢測(cè)方法。由于具有較強(qiáng)的還原性,谷胱甘肽可以直接將二氧化錳納米片層消解為二價(jià)錳離子。體系中的二氧化錳納米片層含量減少,溶液在376 nm處的紫外吸收強(qiáng)度明顯降低,同時(shí)溶液顏色變淺。基于此,我們建立起了利用比色法檢測(cè)谷胱甘肽的方法。該方法具有較寬的檢測(cè)范圍0.5-10μM,檢測(cè)限達(dá)到0.1μM。二氧化錳納米片層制備簡(jiǎn)單,原料廉價(jià)易得。該方法檢測(cè)過(guò)程較快,可以在10分鐘內(nèi)完成檢測(cè),同時(shí)也實(shí)現(xiàn)了復(fù)雜生物樣品中谷胱甘肽的定量檢測(cè)。進(jìn)而,本方法為在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域快速便捷檢測(cè)谷胱甘肽提供一種新選擇。3、本章建立了一種基于層析試紙條技術(shù)的熒光恢復(fù)法檢測(cè)谷胱甘肽技術(shù)。首先將制備的生物素化的量子點(diǎn)和二氧化錳納米片層混合制備成納米復(fù)合物,將復(fù)合物涂于結(jié)合墊處,硝酸纖維素膜上畫上鏈霉親和素(SA)線,組裝成成品試紙條。當(dāng)谷胱甘肽水溶液滴加到樣品墊上時(shí),在毛細(xì)作用下谷胱甘肽水溶液向前流動(dòng),在結(jié)合墊上谷胱甘肽可以將二氧化錳納米片層消解掉,同時(shí)釋放出游離的生物素化的量子點(diǎn),量子點(diǎn)的熒光恢復(fù)。生物素化的量子點(diǎn)在硝酸纖維素膜上向前流動(dòng),直到被檢測(cè)線上的鏈霉親和素捕獲。溶液中谷胱甘肽的濃度越高,消解的二氧化錳納米片層越多,釋放出游離的生物素化的量子點(diǎn)越多,同時(shí)會(huì)使檢測(cè)線上捕獲的生物素化的量子點(diǎn)增多,熒光信號(hào)越強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)建立的檢測(cè)谷胱甘肽的方法將層析試紙條技術(shù)和生物素化的量子點(diǎn)二氧化錳納米復(fù)合物結(jié)合起來(lái),進(jìn)而提供一種便攜式的、快速的生物和臨床診斷方法。本實(shí)驗(yàn)建立的方法檢測(cè)范圍為0.05mM-1.5mM,在該范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,檢測(cè)限達(dá)到0.03mM。且在血清中應(yīng)用具有較好的選擇性。該方法無(wú)需復(fù)雜昂貴的儀器及繁瑣的操作過(guò)程,過(guò)程十分簡(jiǎn)便,有利于方法的規(guī)模推廣,同時(shí)為診斷其它目標(biāo)物提供一種檢測(cè)平臺(tái)。在醫(yī)學(xué)檢測(cè)及臨床應(yīng)用方向具有重要意義。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:O657.3

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本文編號(hào):2083588

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