發(fā)布時(shí)間：2018-06-04 06:17

  本文選題：納米金/銀 + 碳量子點(diǎn)　； 參考：《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：食品安全問(wèn)題已經(jīng)成為全球性話題,保證食品安全,食品的檢驗(yàn)檢測(cè)起著很重要的作用。常用的色譜技術(shù)、免疫分析技術(shù)主要存在耗時(shí)長(zhǎng)、成本高、需要專門的操作人員、樣品前處理過(guò)程復(fù)雜等劣勢(shì),制約了傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展。因此需要建立簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確靈敏的食品安全檢測(cè)技術(shù)。金(銀)納米粒子因其特殊的結(jié)構(gòu)以及光學(xué)特性,在環(huán)境、食品、化工、生物制藥、生命科學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛關(guān)注。本文基于納米金(銀)(AuNPs/AgNPs)的等離子體共振作用以及催化作用,建立了比色和熒光法檢測(cè)食品中有害物質(zhì),如啶蟲脒、卡那霉素、赭曲霉毒素A。具體研究?jī)?nèi)容如下:(1)以檸檬酸三鈉為還原劑制得AuNPs,通過(guò)透射電鏡表征平均粒徑在13nm左右,呈現(xiàn)穩(wěn)定的分散狀態(tài),肉眼看到的是紅色。在高濃度鹽溶液下,由于AuNPs表面結(jié)構(gòu)變化,改變了介電常數(shù)使顏色以及等離子共振吸收(SPR)均發(fā)生變化。本文利用核酸適配體功能化AuNPs,使其在高濃度NaCl溶液下仍保持穩(wěn)定的分散狀態(tài),當(dāng)啶蟲脒存在時(shí),啶蟲脒與核酸適配體特異性結(jié)合,進(jìn)而改變了AuNPs表面性質(zhì),使其在高濃度NaCl溶液中發(fā)生聚集,達(dá)到對(duì)啶蟲脒的定量檢測(cè)。通過(guò)優(yōu)化核酸適配體濃度(40 nM)、NaCl濃度(20 mM)、pH環(huán)境(7.4)以及啶蟲脒與核酸適配體之間的反應(yīng)時(shí)間(10 min)。在上述條件下,最低檢出限為1.2 nM,啶蟲脒濃度在0-20 nM、20-100 nM之間均有良好的線性關(guān)系。在實(shí)際樣品檢測(cè)中獲得了92.2%-112.6%較好的回收率。該比色法選擇性強(qiáng)、靈敏度高、響應(yīng)快。在食品檢測(cè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。(2)利用卡那霉素對(duì)AuNPs催化能力的影響。建立了AuNPs催化TMBH_2O_2體系,實(shí)現(xiàn)卡那霉素的定量檢測(cè)。本文考察了卡那霉素與AuNPs具體的作用過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)卡那霉素首先通過(guò)-NH_2與AuNPs上的-COOH靜電吸附作用結(jié)合,再與卡那霉素上的葡糖苷共同作用,改變AuNPs的外貌性質(zhì),通過(guò)配位作用產(chǎn)生大量的·OH和Au~(3+)。其次,·OH作為活性氧物質(zhì)促進(jìn)TMB與H_2O_2反應(yīng),Au~(3+)作為氧化劑促進(jìn)TMB的氧化。在兩者的共同作用下,提高了AuNPs的催化活性。在最佳反應(yīng)條件(pH 7.5,TMB濃度為0.56 m M,H_2O_2濃度為0.17 M,反應(yīng)時(shí)間為45分鐘)下,卡那霉素檢出限達(dá)到0.1 nM。在牛奶、豬肉、雞肉等實(shí)際樣品檢測(cè)中回收率分別為100.3%-119.5%、99.6%-113.2%和98.6%-102.7%。與其他氨基糖苷類抗生素比較,均無(wú)明顯干擾現(xiàn)象。證明了此方法在實(shí)際樣品中卡那霉素的檢測(cè)中具一定的適用性。(3)基于AgNPs與碳量子點(diǎn)之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移作用,根據(jù)熒光強(qiáng)度的變化,設(shè)計(jì)了一種快速、靈敏檢測(cè)赭曲霉毒素A(OTA)的方法。分別對(duì)AgNPs和C-dots進(jìn)行功能化修飾-SH-aptamer(probe I)和-NH_2-cDNA(probeII),利用probe I與probeII之間的堿基互補(bǔ)配對(duì)作用,將C-dots與AgNPs之間的距離減小,利于FRET的發(fā)生,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低。加入目標(biāo)物OTA后,由于OTA與probeI之間的特異性結(jié)合,使AgNPs和C-dots的距離增大,從而使C-dots的熒光強(qiáng)度恢復(fù),以此定量檢測(cè)OTA。在實(shí)驗(yàn)最佳條件下,OTA最低檢出限為8.7 nM,線性范圍為0 nM-5000 nM。在面粉和啤酒中均得到較好的加標(biāo)回收率。這種新型的熒光法檢測(cè)OTA生物傳感器簡(jiǎn)單、快速、靈敏,為OTA實(shí)時(shí)檢測(cè)提供了一個(gè)新思路。
[Abstract]:On the basis of the plasma resonance effect and catalytic action of Au ( Ag ) ( AuSn / Ag2O ) , it is necessary to establish a simple , rapid , accurate and sensitive detection technology for food safety . In the present paper , we have established the simple and quick , accurate and sensitive detection technology of food safety . The detection limit of Kanamycin is 1.2 nM , the concentration of acetamidines is between 0 - 20 nM and 20 - 100 nM . The detection limit of Kanamycin is 100 . 3 % - 119.5 % , 99 . 6 % - 113.2 % and 98 . 6 % - 102.7 % . ( 3 ) Based on the change of fluorescence intensity , a method for rapid and sensitive detection of Ochxin A ( OTA ) was designed based on the change of fluorescence intensity between Ag2O and carbon quantum dots . The distance between the C - terminus and the probeII was reduced by the complementary pairing between the probe I and probeII . The results showed that the detection limit of the OTA was 8.7 nM and the linear range was 0 nM - 5000 nM . The new fluorescence method was simple , rapid and sensitive in the detection of OTA biosensor .
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：O657.3;TS207.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1976321