HPLC研究甘草次酸對(duì)三種黃酮血漿濃度和組織分布的影響
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《廣西大學(xué)》 2013年
HPLC研究甘草次酸對(duì)三種黃酮血漿濃度和組織分布的影響
覃苑
【摘要】:通過總結(jié)分析近年的中藥復(fù)方配伍規(guī)律發(fā)現(xiàn),中藥活性成分間的藥代動(dòng)力學(xué)相互影響已有不少的報(bào)道,說明一種中藥(或其中的某種成分)對(duì)其它中藥(或其中的某種成分)的血漿濃度和組織分布存在較大的影響。甘草是最常用的中藥,有十方九草之說,然而從甘草和其配伍中藥的成分的血漿濃度和組織分布的影響進(jìn)行甘草配伍的研究未見報(bào)道。 本課題選擇最常用的中藥甘草的配伍為切入點(diǎn),應(yīng)用高效液相色譜法研究甘草的主要活性成分甘草次酸對(duì)中藥活性成分山奈酚、橙皮素及槲皮素血漿濃度及其組織分布的影響來闡明甘草的配伍組方機(jī)理。這也是中藥組方規(guī)律研究的一種有意義的新探索。研究?jī)?nèi)容主要包括下列幾個(gè)部分。 一、建立HPLC測(cè)定大鼠血漿及組織中山奈酚含量的方法,并應(yīng)用于研究山奈酚與甘草次酸合用前后大鼠血漿及組織中山奈酚含量的變化。以SD大鼠為對(duì)象,灌胃給藥后摘眼球取血,解剖摘取大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦組織。血漿樣品在水浴中加鹽酸水解,以乙腈為萃取劑,超聲波輔助提取,利用高效液相色譜法測(cè)定血漿中山奈酚的濃度。色譜條件:流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸55:45(v/v),檢測(cè)波長(zhǎng)為370nnm,柱溫為32℃。往組織中加入生理鹽水制成組織勻漿液,用乙腈沉淀組織勻漿中的蛋白質(zhì),并在氮?dú)饬鞅Wo(hù)下吹干乙腈溶液,加流動(dòng)相復(fù)溶后直接用高效液相色譜法測(cè)定山奈酚的含量。色譜條件:流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸45:55(v/v),檢測(cè)波長(zhǎng)為370nm,柱溫為32℃。研究發(fā)現(xiàn)在高濃度服藥時(shí),甘草次酸的存在能快速在吸收階段顯著提高血漿的山奈酚濃度,表現(xiàn)了協(xié)同增強(qiáng)的作用。山奈酚單獨(dú)用藥在大鼠體內(nèi)組織分布特征是C肝C腎C肺C心,加入甘草次酸并未改變山奈酚在大鼠體的組織分布特征。 二、建立HPLC測(cè)定大鼠橙皮素與甘草次酸配伍前后血漿及組織中橙皮素含量的方法,并用于甘草次酸對(duì)其血漿濃度和組織分布影響的研究。以SD大鼠為對(duì)象灌胃給藥后摘眼球取血,解剖摘取大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦組織。血漿樣品在水浴中加鹽酸水解,以乙腈為萃取劑,超聲波輔助提取,利用高效液相色譜法測(cè)定血漿中橙皮素的濃度。色譜條件:流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸52:48(v/v),檢測(cè)波長(zhǎng)為288nm,柱溫為25℃。往組織中加入生理鹽水,制成組織勻漿液,用乙腈沉淀組織勻漿中的蛋白質(zhì),并在氮?dú)饬鞅Wo(hù)下吹干乙腈溶液,加流動(dòng)相復(fù)溶后直接用高效液相色譜法測(cè)定橙皮素的含量。色譜條件:流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸55:45(v/v),檢測(cè)波長(zhǎng)為288nm,柱溫為32℃。研究發(fā)現(xiàn)橙皮素與甘草次酸同時(shí)服用時(shí),橙皮素高濃度組在消除階段的血藥濃度有顯著性增大。橙皮素單獨(dú)用藥在大鼠體內(nèi)組織分布特征是C肝C腎C肺,加入甘草次酸并未改變橙皮素在大鼠體的組織分布特征。 三、建立HPLC測(cè)定大鼠槲皮素與甘草次酸合用前后血漿及組織中槲皮素含量的方法,并用于甘草次酸對(duì)其血漿濃度和組織分布影響的研究。以SD大鼠為對(duì)象灌胃給藥后摘眼球取血,解剖摘取大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦組織。血漿在水浴中加鹽酸水解,以乙腈為萃取劑,超聲波為輔助提取,利用高效液相色譜法測(cè)定血漿中槲皮素的濃度,流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸溶液50:50(v/v),檢測(cè)波長(zhǎng)為370nm,流速為1.0mL/min,柱溫箱控制在30℃,流動(dòng)相經(jīng)過0.45μmm薄膜過濾,進(jìn)樣量為20μL。往組織中加入生理鹽水,制成組織勻漿液,用乙腈沉淀組織勻漿中的蛋白質(zhì),并在氮?dú)饬鞅Wo(hù)下吹干乙腈溶液,加流動(dòng)相復(fù)解后直接用高效液相色譜法測(cè)定槲皮素的含量。組織樣品分析的流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸溶液52:48(v/v),柱溫箱控制在32℃,流動(dòng)相均經(jīng)過0.45μm薄膜過濾,進(jìn)樣量為20μL。研究發(fā)現(xiàn)服藥初期槲皮素在體內(nèi)血漿濃度積累處于平衡,在消除相時(shí)期顯出明顯的濃度差。甘草次酸的存在能延遲槲皮素在肝臟中的分布吸收。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:O657.72;R284.2;R285.5
【目錄】:
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