本文選題：分子印跡 + SiO_2@MPS-CdTe/CdS　； 參考：《湘潭大學》2017年碩士論文

【摘要】：光化學生物傳感器是對生物體及活細胞中生物分子實時分析檢測的重要工具。光化學生物傳感器具有多種內(nèi)在優(yōu)點,如靈敏度高、儀器簡單、高通量的篩選能力。本論文基于分子印跡技術、鏈置換循環(huán)擴增技術構建了三種不同的光化學生物傳感器,并用于對生物分子甲肝病毒HAV及MicroRNA-122的高靈敏度高選擇性檢測。主要研究工作如下:(1)溫敏型甲肝病毒分子印跡共振光傳感器的構建及研究通過溫敏印跡聚合物包覆SiO_2構建了一個共振光病毒分子印跡傳感器高選擇性檢測HAV。該傳感器以N-異丙基丙烯酰胺作為溫度敏感單體,對病毒的特異性識別性能可以通過溫度調(diào)控,在40°C時特異性捕獲病毒引起分子印跡聚合物共振光增強,20°C時釋放病毒共振光減弱。此外,傳感器的響應時間為30 min,檢出限為1.1 pM。該傳感器成功應用于稀釋人體血清中HAV的檢測。三個不同濃度的HAV回收率為90.8%-108.3%。該傳感器為病毒高靈敏度高選擇性檢測提供了一個快速有效的方法。(2)SiO_2@MPS-CdTe/CdS MIP熒光傳感器的構建及對甲肝病毒的檢測通過溶膠-凝膠聚合反應,使用甲肝病毒作為模板合成了一個新型SiO_2@MPS-CdTe/CdS@MIPs熒光傳感器用于特異性識別檢測甲肝病毒(HAV)。當HAV存在時,CdTe/CdS的能量轉移給HAV造成熒光淬滅。傳感器的熒光強度在20 min內(nèi)顯著下降,檢出限為88 pM。該傳感器成功應用于稀釋200倍人體血清中HAV的檢測,三個不同濃度HAV的回收率為96.7%-103.8%。該傳感器克服了分子印跡病毒傳感器響應時間長的問題,為病毒檢測提供了一個快速有效的方法。(3)基于鏈擴增技術的比率型熒光傳感器對miRNA-122的檢測通過利用2-氨基嘌呤(2-AP)和硫黃素T(ThT)作信號源,構建了一個新型的基于雜交鏈反應的比率型熒光傳感器檢測miRNA-122。隨著mi RNA-122濃度的增加,發(fā)夾DNA序列H1環(huán)部修飾的2-AP經(jīng)鏈置換反應至雙鏈DNA中,2-AP的熒光淬滅;同時由于H1打開,K+穩(wěn)定的G-四聯(lián)體形成,ThT熒光增強。該熒光傳感器對miRNA-122的檢測表現(xiàn)出高的選擇性及低的檢出限72 pM;響應時間為80 min。此外,該傳感器成功應用于人體癌細胞提取液中mi RNA-122的檢測。這個簡單、免酶切的比率型熒光傳感器不僅豐富了microRNAs傳感器的研究,而且在miRNA相關生物化學研究及臨床診斷具有潛在的應用。
[Abstract]:Photochemical biosensor is an important tool for real-time analysis and detection of biomolecules in organisms and living cells. Photochemical biosensor has many inherent advantages, such as high sensitivity, simple instrument and high throughput screening ability. In this paper, three different photochemical biosensors were constructed based on molecular imprinting technique and chain displacement cyclic amplification technique, and they were used to detect HAV and MicroRNA-122 with high sensitivity and high selectivity. The main work of this paper is as follows: (1) the construction of thermo-sensitive molecular imprinting resonance light sensor for hepatitis A virus and the construction of a highly selective SiO_2 sensor based on thermo-imprinted polymer coated with SiO_2. The sensor uses N- isopropylacrylamide as a temperature sensitive monomer, and the specific recognition performance of the virus can be controlled by temperature. The specific viral capture at 40 擄C caused a decrease in the resonant light intensity of the molecular imprinted polymer at 20 擄C. In addition, the response time of the sensor is 30 min and the detection limit is 1.1 pm. The sensor has been successfully applied to the detection of HAV in diluted human serum. The recoveries of three different concentrations of HAV ranged from 90.8 to 108.3. The sensor provides a rapid and effective method for the high sensitivity and high selectivity of virus detection. The construction of MPS-CdTe / CDs MIP fluorescent sensor and the detection of hepatitis A virus by sol-gel polymerization. A novel SiO_2@MPS-CdTe/CdS@MIPs fluorescence sensor was synthesized using hepatitis A virus as a template for specific identification and detection of hepatitis A virus (HAV). The energy transfer of CdTe / CDs in the presence of HAV results in fluorescence quenching of HAV. The fluorescence intensity of the sensor decreased significantly within 20 min, and the detection limit was 88 pm. The sensor has been successfully applied to the detection of HAV in human serum of 200 times dilution. The recoveries of three different concentrations of HAV are 96.7- 103.8. The sensor overcomes the problem of long response time of the molecularly imprinted virus sensor. To provide a rapid and effective method for virus detection, a ratio fluorescence sensor based on chain amplification technique was used to detect miRNA-122 by using 2-Aminopurine 2-AP) and thiocyanin Thytht as signal sources. A novel ratio fluorescence sensor based on hybrid chain reaction was constructed to detect miRNA-122. With the increase of the concentration of mi RNA-122, the H1 ring modified 2-AP of hairpin DNA sequence was quenched by chain replacement reaction to the fluorescence of 2-AP in double-stranded DNA. The fluorescence sensor showed high selectivity and low detection limit of 72 pm for miRNA-122 detection, and the response time was 80 min. In addition, the sensor has been successfully applied to the detection of mi RNA-122 in human cancer cell extract. This simple, digested ratio fluorescent sensor not only enriches the research of microRNAs sensors, but also has potential applications in the biochemical research and clinical diagnosis of miRNA.
【學位授予單位】：湘潭大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R373;O657.3

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本文編號：1797744