本文選題：熒光探針 + 活性氧�。� 參考：《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：活性氧基團(tuán)(ROS)通常是細(xì)胞氧化代謝的產(chǎn)物。一方面,活性氧在眾多生理功能中發(fā)揮重要作用;另一方面,過量的ROS也會產(chǎn)生氧化應(yīng)激現(xiàn)象,引發(fā)一系列疾病。因此具有較好的選擇性和靈敏度的檢測活性氧的方法顯得尤為重要。在多種檢測ROS方法中,熒光探針法因操作簡單、靈敏度高、成本低、時空分辨率高等優(yōu)點脫穎而出。本論文設(shè)計并合成了四種熒光探針用于環(huán)境水樣及活細(xì)胞中活性氧的檢測。通過核磁共振波譜和質(zhì)譜等方式確認(rèn)其結(jié)構(gòu),通過測量紫外吸收光譜和熒光發(fā)射光譜研究了探針對活性氧的識別效果。主要研究內(nèi)容如下:(1)在BODIPY熒光團(tuán)母體中接入2,4-二硝基苯肼制備出一種新型的熒光探針,并用于次氯酸根的定性、定量檢測。因結(jié)構(gòu)中的碳氮異構(gòu)化作用,探針1幾乎無熒光;而加入次氯酸根后,碳氮雙鍵會被氧化斷裂,體系恢復(fù)綠色的熒光。溶液的顏色也從原本的粉色變?yōu)槌壬Ｓ捎谶@種特異性反應(yīng),探針可在其他活性氧的干擾下專一識別出次氯酸根。隨著次氯酸根濃度的增加,熒光強(qiáng)度也越來越強(qiáng),且在0-340μM范圍內(nèi)兩者呈良好的線性關(guān)系,因此可對次氯酸根進(jìn)行定量檢測,檢出限為228 nM。利用體系熒光和顏色的變化而制備了探針測試條,可用于次氯酸根的可視化檢測。另外,用二氨基馬來腈代替2,4-二硝基苯肼制備了探針2,具有更低的檢出限(19.8 nM)和更快的響應(yīng)速度(10 s)。探針2檢測次氯酸根的檢測有很好的選擇性,不受其他活性氧離子的干擾。用探針2溶液浸泡后得到的測試條可對次氯酸根進(jìn)行可視化檢測。更重要的是,探針2不僅在緩沖液有良好的檢測性質(zhì),還能定量分析自來水、長江水和次氯酸鈉消毒水中次氯酸根。(2)基于次氯酸根和肟基團(tuán)間特異性反應(yīng)設(shè)計并合成了一種香豆素?zé)晒馓结?探針3),并成功運用于環(huán)境水樣品和生物樣品中次氯酸根的檢測。研究發(fā)現(xiàn),探針本身無熒光,與次氯酸根反應(yīng)后發(fā)射出很強(qiáng)的藍(lán)色熒光。熒光強(qiáng)度在20 s內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定,且不受其他離子的干擾,即探針有很好的選擇性。并且由熒光值和次氯酸根濃度間的線性關(guān)系可得探針3對ClO-檢出限為8.3 nM,如此高的靈敏度使得基于探針3的測試條可初步檢測自來水中的次氯酸。加標(biāo)回收實驗也驗證了探針3能在自來水、長江水、湖水和次氯酸鈉消毒水中定量測出次氯酸根的濃度,回收率達(dá)到98.3%以上。此外,探針3水溶性好且生物相容性好,還成功應(yīng)用于巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞中外源性次氯酸根的可視化檢測。(3)以硼酸酯為識別基團(tuán)制備了一種定量、定性檢測過氧化氫的熒光探針(探針4)。研究了探針中加入過氧化氫后紫外吸收光譜和熒光發(fā)射光譜,發(fā)現(xiàn)紫外最大吸收峰從321 nm變?yōu)?72 nm,也出現(xiàn)了一個以451 nm為中心的熒光發(fā)射峰。在加入的過氧化氫濃度為0-180μM范圍內(nèi),熒光強(qiáng)度隨著濃度的增加而越來越大,通過兩者間的線性關(guān)系計算出檢出限為118.2 nM。并且即使在其他干擾離子的存在下,熒光值也幾乎不受影響。此外,探針在偏堿性的環(huán)境下對過氧化氫的檢測效果最好,因此將其用于巨噬細(xì)胞RAW264.7和結(jié)腸癌細(xì)胞SW480成像實驗。結(jié)果顯示探針可以很好的進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),并能檢測到活體細(xì)胞中外源性的過氧化氫。
[Abstract]:Active oxygen species ( ROS ) is usually the product of cellular oxidative metabolism . On the one hand , reactive oxygen plays an important role in many physiological functions , and the detection limit is 228 nM . In addition , the probe 2 is prepared by measuring ultraviolet absorption spectrum and fluorescence emission spectrum . A quantitative and qualitative detection of hypochlorite in tap water has been carried out by using the linear relationship between the fluorescence intensity and the hypochlorite concentration . The results show that the probe can be used in the detection of hypochlorite in tap water , Yangtze River water , lake water and sodium hypochlorite .

【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：O657.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1792160