發(fā)布時間：2018-04-01 17:26

  本文選題：枇杷葉　切入點：科羅索酸　出處：《上海海洋大學》2016年碩士論文

【摘要】：近年來糖尿病患病率持斷上升,從天然產(chǎn)物中提取高效又無毒副作用的降血糖功能成分,成為糖尿病研究的熱門話題。枇杷葉是我國常用傳統(tǒng)中藥,科羅索酸屬于枇杷葉中主要的功能成分——三萜酸類物化合物。本論文以枇杷葉為原料,建立高效液相色譜法測定科羅索酸含量的方法,優(yōu)化科羅索酸的提取、分離純化工藝,并研究其降血糖作用。主要研究結(jié)果如下:1.建立了高效液相色譜法快速測定枇杷葉中科羅索酸含量的新方法。樣品通過HPLC在Kromasil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上分離,以甲醇-1%醋酸水(體積比為92:8)作為流動相,流速為1.0 m L/min,柱溫30℃,在波長210 nm處檢測。結(jié)果表明:科羅索酸標準品的線性回歸方程為:y=3.78×106x-6227.14,R2=0.9991,在0.0125-0.4 mg/m L的科羅索酸濃度范圍內(nèi),響應(yīng)峰面積與濃度有良好的線性關(guān)系,平均加標回收率為99.67%。2.研究比較了不同提取方法提取科羅索酸的最佳工藝:采用超聲輔助提取法,按料液比1:20(g/mL)加入90%乙醇溶液,在50℃下超聲提取30 min得率最高,為0.68%;采用微波輔助提取法,按料液比1:10(g/mL)加入90%乙醇溶液,在微波功率200 W條件下提取4 min得率最高,為0.52%。最優(yōu)提取條件下,超聲提取得率比微波提取得率高30.77%,而微波提取能節(jié)約提取時間87%,節(jié)約50%提取溶劑。3.聯(lián)合采取大孔吸附樹脂富集純化、硅膠柱層析和重結(jié)晶的方法對粗提物進一步分離純化。大孔樹脂分離純化工藝條件為:最佳大孔吸附樹脂為HZ802,粗提物上樣質(zhì)量濃度8 mg/mL,上樣流速2 BV/h,上樣體積3 BV;洗脫劑為90%乙醇,洗脫流速2 BV/h,洗脫劑用量2.5 BV,由此得到的科羅索酸純度為34.12%;硅膠柱層析工藝條件為:干法上樣量為:樣品:硅膠(1:50),洗脫劑為石油醚:乙酸乙酯(2:1,v/v),最終得到的科羅索酸純度為53.28%;分離樣品用90%乙醇重結(jié)晶精制,得到科羅索酸純度為96.43%。4.研究含科羅索酸提取物對鏈脲佐菌素(STZ)誘導的糖尿病小鼠(DM)的降血糖功能。以腹腔一次性注射160 mg/kg STZ建立DM模型。實驗分為7組:正常對照組,DM對照組,含科羅索酸提取物低、中、高劑量組(50,150,300 mg/kg BW),格列齊特陽性對照組(50 mg/kg BW)和科羅索酸標準品對照組(5 mg/kg BW)�？疾扈凌巳~中含科羅索酸提取物對小鼠生理生化指標及臟器指數(shù)的影響。結(jié)果表明各給藥組空腹血糖濃度(FBG)極顯著下降(P0.01);中、高劑量組和格列齊特組胰島素水平(INS)顯著增加(P0.05);各組HDL-C顯著增加,中劑量組和格列齊特組血清TC、TG顯著下降(P0.05),而對LDL-C和臟器指數(shù)無明顯影響。表明含科羅索酸提取物具有降血糖和調(diào)節(jié)血脂代謝作用。此研究結(jié)果為科羅索酸的藥物開發(fā)和臨床應(yīng)用提供了依據(jù)和參考。
[Abstract]:In recent years, the prevalence rate of diabetes has been rising, and the extraction of hypoglycemic functional components from natural products has become a hot topic in the study of diabetes. Loquat leaf is a traditional Chinese medicine commonly used in China. Corozo acid is a major functional component in loquat leaves-triterpenoid acids. In this paper, a HPLC method for the determination of Corozo acid in loquat leaves was established to optimize the extraction, separation and purification of Corozo acid. The main results are as follows: 1. A new method for rapid determination of colosorbic acid in loquat leaves by high performance liquid chromatography (HPLC) was established. The samples were separated by HPLC on a Kromasil C18 column of 250mm 脳 4.6mm ~ 5 渭 m. Methanol-1% acetic acid water (92: 8 by volume) was used as mobile phase, flow rate was 1.0 mL / min, column temperature was 30 鈩，

本文編號：1696589