本文關(guān)鍵詞：核桃青皮成分分析及相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)　出處：《昆明理工大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： 核桃青皮 多酚 α-淀粉酶 相互作用 酵素產(chǎn)品

【摘要】：核桃青皮是核桃的主要副產(chǎn)品之一。核桃收獲期間,大量的核桃青皮作為廢棄物堆放,造成環(huán)境污染和資源浪費,只有少數(shù)量藥用。核桃青皮有抗癌、抗氧化、抗衰老、降血糖等功能。加強其綜合利用的研究與開發(fā),具有重要的社會經(jīng)濟價值及生態(tài)價值。本文以核桃青皮為原料分析其營養(yǎng)成分,同時采用75%乙醇提取核桃青皮多酚,對其抗氧化活性、a-淀粉酶活性抑制作用及其穩(wěn)定性進行初步研究,采用LC-MS技術(shù)鑒定其多酚成分,分析其不同多酚成分在α-淀粉酶活性抑制中的相互作用,探究其沒食子酸與α-淀粉酶的相互作用機制。并采用常溫固液發(fā)酵,制備核桃青皮果蔬酵素。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：1.核桃青皮的常規(guī)營養(yǎng)成分分析結(jié)果表明,核桃青皮具有豐富的營養(yǎng)。核桃青皮富含鉀、鈣、磷、鎂、鐵等多種礦質(zhì)元素,且呈現(xiàn)高鉀、低鈉的特點。核桃青皮中除色氨酸外的氨基酸總含量為33.31%,其必需氨基酸與總氨基酸的比例為34.56%,必需氨基酸與非必須氨基酸的比例為52.81%,與世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(WHO/FAO)提出的食物蛋白氨基酸理想比例(EAA/TAA=40%, EAA/NEAA=60%)相接近。2.采用75%乙醇提取核桃青皮汁與青皮渣的總多酚,使用福林酚法測定提取物總多酚含量,通過測定粗提物清除DPPH自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基的能力來評價青皮多酚提取物的抗氧化能力,測定其α-淀粉酶活性抑制作用來評價青皮多酚提取物的降糖活性。結(jié)果表明,核桃青皮青皮汁與青皮皮渣總多酚含量分別為125.58mg/g和112.42mg/g,黃酮含量分別為92.60mg/g和61.72mg/g,青皮汁中總多酚與總黃酮含量明顯高于青皮渣中含量。核桃青皮汁多酚對DPPH自由基,羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除率IC50值分別為為3.4 1μg/mL,33.94μg/mL和0.47mg/mL,具有較好的自由基清除能力,并呈濃度依賴關(guān)系。核桃青皮多酚對α-淀粉酶活性有較好的抑制作用,并且呈現(xiàn)濃度依賴關(guān)系,其IC50值為20.70mg/mL。3.探討不同環(huán)境條件包括溫度、濕度、光照對核桃青皮粗提物多酚穩(wěn)定性的影響,采用溫度30±2℃、相對濕度60±5%、光照條件對核桃青皮汁粗提物進行加速氧化處理,測定其多酚物質(zhì)穩(wěn)定性以及抗氧化、α-淀粉酶活性抑制作用的功能穩(wěn)定性。結(jié)果表明,高溫、高濕和光照條件下,隨著處理時間的延長,總多酚總黃酮含量降低,其DPP H自由基和羥自由基清除率以及α-淀粉酶活性抑制率的IC50隨著處理時間的延長而增大,抗氧化活性及淀粉酶活性抑制活性降低。LC-MS分析結(jié)果表明,氧化處理前粗提物一共有16中多酚類物質(zhì),其中單沒食子酰基葡萄糖含量最高(20.17%),沒食子酸、新綠原酸等含量也較大。氧化處理后,多酚類物質(zhì)組成改變,處理后粗提物少了香草酸、焦性沒食子酸等五種多酚,增加了HHDP-葡萄糖異構(gòu)體和2倍酰基葡萄糖兩種多酚類物質(zhì),同時,一些物質(zhì)含量發(fā)生變化。4.采用等輻射分析(Isobologram)法分析核桃青皮多酚物質(zhì)兩兩混合后對α-淀粉酶活性的抑制作用,研究表明新綠原酸與焦性沒食子酸、沒食子酸與鞣花酸對α-淀粉酶活性抑制作用在一定范圍內(nèi)具有拮抗效果,前者組合的拮抗作用明顯,新綠原酸與3-沒食子酰葡萄糖苷、鞣花酸與焦性沒食子酸對α-淀粉酶的活性抑制作用在一定范圍內(nèi)具有協(xié)同效果,當鞣花酸與焦性沒食子酸比例為3：1時復合物對α-淀粉酶協(xié)同作用最強。5.通過紫外光譜、普通熒光光譜、同步熒光光譜、三維熒光光譜等方法探究沒食子酸與α-淀粉酶的相互作用機制。研究發(fā)現(xiàn)沒食子酸對α-淀粉酶有明顯的熒光猝滅作用,其猝滅方式為靜態(tài)猝滅,沒食子酸與α-淀粉酶之間形成了沒食子酸-α-淀粉酶復合物,同時,沒食子酸的加入使α-淀粉酶蛋白分子的α-螺旋數(shù)量減少,氨基酸殘基π-π*共軛系統(tǒng)的轉(zhuǎn)變能級(ΔE)降低,電子轉(zhuǎn)移增加,蛋白質(zhì)內(nèi)芳香族氨基酸的微環(huán)境從分子內(nèi)疏水環(huán)境變?yōu)闃O性親水環(huán)境。6.本文充分利用核桃資源變廢為寶,采用常溫液固發(fā)酵,試制了核桃青皮果蔬酵素,所得酵素口感好,香氣回味長久,顏色清亮,呈橙紅／棕紅色。
[Abstract]:Walnut peel is one of the main products of walnut. The walnut harvest period, a large number of walnut green husk as waste dumps, environmental pollution and waste of resources, only a few amount of medicinal. Walnut peel has anti-cancer, anti-oxidation, anti-aging, reducing blood sugar and other functions. The research and development to strengthen its comprehensive utilization, has the value and ecological value the social and economic importance. Based on the analysis of the nutritional components of walnut peel as raw material, using 75% ethanol extraction of polyphenols from walnut peel, the antioxidant activity of a-, amylase activity inhibition and stability was investigated by using LC-MS technique to identify the components of polyphenols, analysis of interactions of the different components of polyphenols in inhibiting the activity of amylase in the the interaction, and explore its mechanism of gallic acid and alpha amylase. And the normal temperature solid-liquid fermentation, preparation of walnut peel fruit and vegetable enzyme. The main research contents and The results are as follows: conventional nutritional component analysis results of 1. walnut peel showed that walnut peel has rich nutrition. Walnut peel is rich in potassium, calcium, phosphorus, magnesium, iron and other mineral elements, and has high potassium, low sodium. The total amino acid content except tryptophan in the walnut peel was 33.31%. The essential amino acid and total amino acid ratio of 34.56%, the proportion of essential amino acids and non essential amino acids was 52.81%, and the WHO and the United Nations Food and Agriculture Organization (WHO/FAO) proposed food protein amino acids (EAA/TAA=40%, EAA/NEAA =60% ratio) is close to the total polyphenol extract.2. of walnut peel juice and peel residue with 75% ethanol, the determination of total polyphenol the content of extracts using Folin phenol method, through the determination of the crude extract of DPPH free radical scavenging capacity, hydroxyl radicals and superoxide anion radicals to evaluate the antioxidant capacity of polyphenols peel extract, To evaluate the hypoglycemic activity of peel polyphenol extracts inhibition of alpha - amylase activity and its determination. The results showed that the walnut peel peel juice and peel pomace polyphenol content were 125.58mg/g and 112.42mg/g, flavonoids content is respectively 92.60mg/g and 61.72mg/g, and the content of total polyphenol and total flavonoid content in peel juice was significantly higher than that of peel slag. Walnut peel juice polyphenols on DPPH free radical, hydroxyl radical and superoxide anion free radical rate of IC50 were 3.41 g/mL, 33.94 g/mL and 0.47mg/mL, with free radical scavenging ability better, and in a concentration dependent relationship. Polyphenol walnut peel on amylase activity had good inhibitory effect, and in concentration dependence of 20.70mg/mL.3. on different environmental conditions including temperature, humidity and its IC50 value, illumination effect on Walnut Seedcases extracts polyphenol stability, the temperature of 30 - 2 DEG C, phase The humidity of 60 + 5%, light conditions of crude extracts of walnut peel juice accelerated oxidation treatment, determination of polyphenols and antioxidant function of stability, stability of alpha amylase activity inhibition. The results showed that high temperature, high humidity and light conditions, with the prolonging of treatment time, reduce the total flavonoids content of total polyphenols the DPP, H and hydroxyl free radical scavenging rate and amylase activity inhibition rate of IC50 increased with the prolonging of treatment time, the amylase activity of antioxidant activity and inhibitory activity decreased the.LC-MS analysis results show that the oxidation treatment before the crude extract of a total of 16 polyphenols, including single galloyl glucose content was the highest (20.17%) neochlorogenic acid, gallic acid, the content is larger. After oxidation treatment, polyphenols composition changes after the treatment of crude extract less vanillic acid, pyrogallic acid and other five kinds of polyphenols, increased by HHD P- glucose isomers and 2 times acyl glucose two kinds of polyphenols, at the same time, some material content changes.4. by isobolographic analysis (Isobologram) method to analyze the inhibitory effect on alpha amylase activity of the mixture of walnut Peel Polyphenols 22, studies show that chlorogenic acid and pyrogallol, gallic acid and ellagic acid on alpha amylase the inhibitory activity of the antagonistic effect in a certain range, the combination of obvious antagonism, neochlorogenic acid and 3- galloyl glucoside, ellagic acid and gallic acid on the activity of alpha amylase inhibition has a synergistic effect in a certain range, when ellagic acid and pyrogallic acid ratio of 3:1 complexes the synergistic effect of the strongest.5. alpha amylase by ultraviolet spectroscopy, fluorescence spectroscopy, synchronous fluorescence, three-dimensional fluorescence spectroscopy method study of gallic acid and alpha. The interaction mechanism of powder enzyme. It was found that the fluorescence quenching of gallic acid had obvious effect on alpha amylase, the quenching mechanism is static quenching, gallic acid and alpha amylase formed between gallic acid alpha amylase complex, at the same time, adding gallic acid alpha amylase protein alpha helix to reduce the number of change the level of amino acid residues pi pi * conjugate system (E) is reduced, the electron transfer increases, micro environment within the protein of aromatic amino acids from the intramolecular hydrophobic environment for polar hydrophilic.6. environment by utilizing the resources of walnut waste to treasure, using solid fermentation liquid, preparation of walnut peel fruit enzyme the enzyme has good taste, aroma, long aftertaste, color is clear, orange / red brown.

【學位授予單位】：昆明理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：TS209;O657.63

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