本文關(guān)鍵詞：基于硫黃素T熒光調(diào)控的生化分析新方法研究　出處：《華東師范大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：熒光分子探針的設(shè)計(jì)及其應(yīng)用是當(dāng)前國內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。熒光分子探針具有操作簡單、響應(yīng)迅速、選擇性好、不受電場、磁場的影響、分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn),具有超高靈敏度、可實(shí)現(xiàn)單分子分析、可原位檢測和實(shí)時(shí)檢測。開發(fā)新型的熒光分子探針,對于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、食品安全和環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域而言是一項(xiàng)重要內(nèi)容。本論文基于硫黃素T的熒光調(diào)控及其生化分析為研究目標(biāo),結(jié)合當(dāng)前這一領(lǐng)域的發(fā)展趨勢,進(jìn)一步利用不同封閉系統(tǒng)如簡單陰陽離子、DNA、稀土有機(jī)配位聚合物等構(gòu)建硫黃素T熒光調(diào)控新策略,以此開發(fā)了簡單高效、靈敏度高、選擇性好的熒光分子探針,應(yīng)用于快速檢測金屬離子(Ag+)、陰離子(Ⅰ-)及環(huán)境參數(shù)(溫度),為環(huán)境監(jiān)測與保護(hù)、食品和藥物安全分析、醫(yī)學(xué)診斷及臨床治療和生化分析等重要領(lǐng)域提供了新的設(shè)計(jì)思路和方法。本論文由四個(gè)部分組成,具體如下：第一章緒論首先,介紹幾種常見的熒光分子探針及其當(dāng)前的研究進(jìn)展,然后著重論述了硫黃素T熒光染料分子,包括硫黃素T的光學(xué)性質(zhì)、硫黃素T熒光調(diào)控策略以及硫黃素T熒光探針的研究進(jìn)展。最后闡述了本論文研究的意義和主要內(nèi)容。第二章簡單陰陽離子調(diào)控硫黃素T熒光的分析策略構(gòu)建及銀離子檢測應(yīng)用本章利用銀離子(Ag+)、碘離子(Ⅰ-和硫黃素T(ThT)在水溶液中形成ThT@AgI超微粒設(shè)計(jì)出一種檢測Ag+的比率型熒光探針,該探針對Ag+具有良好的選擇性和靈敏度,在Ag-濃度為0.1-10μM時(shí),該方法呈現(xiàn)很好的線性,最低檢測限約為50 nM。ThT水溶液熒光很弱,主要以ThT單分子形式存在,熒光發(fā)射峰位于49011m處；然而,在ThT@AgI超微粒中,ThT以二聚體的形式存在,熒光增強(qiáng),熒光發(fā)射峰紅移至546 n1T1處。該方法還可用于邏輯門的設(shè)計(jì)和實(shí)際樣中Ag+的檢測,在自來水樣中得到了很好的回收率。通過往ThT溶液加入簡單陰陽離子Ag+、Ⅰ-或S2-可以調(diào)控ThT的熒光,開辟了用簡單陰陽離子調(diào)控ThT熒光的新途徑,對ThT在受限環(huán)境下的熒光增強(qiáng)機(jī)制的研究大有幫助。第三章DNA調(diào)控硫黃素T熒光的分析策略構(gòu)建及碘離子檢測應(yīng)用本章基于DNA調(diào)控硫黃素T(ThT)熒光開發(fā)了一種簡單、快速的無標(biāo)記分子信標(biāo)熒光探針,并將其成功應(yīng)用于碘離子(Ⅰ--)的檢測。我們通過“一鍋法”將ThT、一段特定序列的DNA(記為MSD)和汞離子(Hg2+)混合得到ThT/MSD/Hg2+無標(biāo)記熒光探針,并考察該探針檢測Ⅰ-的選擇性、線性以及最低檢測限。結(jié)果表明,在干擾離子濃度是Ⅰ-濃度十倍的混合樣品中,該探針對Ⅰ-仍具有良好的選擇性,因?yàn)棰?可以將Hg2+從"T-Hg2+-T"結(jié)構(gòu)中剝奪出來。我們引入了常用的生物巰基屏蔽劑N-乙基馬來酰亞胺(NEM)來消除生物巰基對Ⅰ-檢測的影響,以提高ThT/MSD/Hg2+無標(biāo)記分子信標(biāo)探針的選擇性。在Ⅰ-濃度為0.5-6μM時(shí),該方法呈現(xiàn)很好的線性,最低檢測限為158 nM。該方法還可用于邏輯門的設(shè)計(jì)和實(shí)際樣中Ⅰ-的檢測,在人體尿樣和人工尿樣中得到了很好的回收率,這表明ThT/MSD/Hg2+無標(biāo)記分子信標(biāo)熒光探針在實(shí)際應(yīng)用中展現(xiàn)出巨大的潛力。第四章稀土有機(jī)配位聚合物調(diào)控硫黃素T熒光的分析策略構(gòu)建及溫度檢測應(yīng)用本章基于硫黃素T(ThT)和稀土有機(jī)配位聚合物開發(fā)了一種簡單、快速的無標(biāo)記熒光探針并成功應(yīng)用于溫度的檢測。我們通過“一鍋法”將ThT、硝酸銪(Eu(NO3)3)和鳥苷酸(GMP)混合得到ThT/Eu/GMP無標(biāo)記熒光探針,Eu(NO3)3和GMP在自組裝形成Eu/GMP稀土有機(jī)配位聚合物時(shí),可以將ThT包被進(jìn)去,造成ThT熒光增強(qiáng)。我們考察該探針作為溫度傳感器的可行性,結(jié)果表明,ThT/Eu/GMP無標(biāo)記熒光探針可以實(shí)現(xiàn)對溫度的可視化、可逆檢測,該探針不需要化學(xué)修飾和熒光標(biāo)記,合成簡單、成本低。第五章總結(jié)與展望本章總結(jié)了本論文研究的意義和主要內(nèi)容的創(chuàng)新特色之處,并闡述了今后本研究方向的展望與設(shè)想。
[Abstract]:In this paper , we have developed a new type of fluorescent molecular probe , which is simple , efficient , sensitive and sensitive . It can be used for the detection of Ag + in water solution . It can be used in the design of logic gates and the detection of Ag + . It can be used in the design of logic gates and the detection of Ag + .

【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3

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