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陽離子鋁酞菁紅區(qū)熒光探針在納克級RNA定量分析中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2017-12-27 08:24

  本文關(guān)鍵詞:陽離子鋁酞菁紅區(qū)熒光探針在納克級RNA定量分析中的應(yīng)用 出處:《光譜學(xué)與光譜分析》2016年03期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:荷正電的四取代三甲基碘化銨鋁酞菁(Tetra(trimethylammionio)aluminum phthalocyanine,TTMAAlPc)是新近出現(xiàn)的、很有應(yīng)用潛力的新型紅區(qū)熒光化合物。研究表明,弱堿性條件,RNA對TTMAAlPc的熒光具有高效猝滅作用,且猝滅程度與RNA含量呈線性正相關(guān)。據(jù)此發(fā)現(xiàn)建立了可測定納克級RNA的高靈敏定量分析新方法,并對原理進(jìn)行了討論?疾炝藀H、緩沖體系、反應(yīng)時(shí)間、溫度、TTMAAlPc濃度的影響,確定了最佳反應(yīng)條件(pH 8.0的廣泛緩沖液、反應(yīng)5 min、室溫、濃度為2×10-6 mol·L-1的TTMAAlPc)。在最佳條件下,方法的線性回歸方程為y=-15.0+0.51x,相關(guān)系數(shù)r=0.998 6,線性范圍7.71~1 705.57ng·mL-1,檢測限為1.55ng·mL-1。本法靈敏度高、線性范圍寬、對RNA測定常見干擾物質(zhì)包括陰、陽離子、表面活性劑和維生素等的抗干擾能力強(qiáng),且操作簡便。該法應(yīng)用于實(shí)際樣品RNA含量的測定,取得了滿意的結(jié)果。還以參比法首次測定了不同pH下TTMAAlPc的熒光量子產(chǎn)率,結(jié)果顯示TTMAAlPc具有較高的熒光量子產(chǎn)率,且對大范圍的酸度穩(wěn)定,表明TTMAAlPc是極具應(yīng)用潛力的新型紅色熒光探針,值得深入研究,開拓其應(yīng)用。
[Abstract]:Positively charged four substituted three methyl ammonium iodide aluminum phthalocyanine (Tetra (trimethylammionio) aluminum phthalocyanine, TTMAAlPc) is a new and promising new red fluorescent compound. The results show that RNA has a high efficiency quenching effect on the fluorescence of TTMAAlPc, and the degree of quenching is linearly and positively correlated with the content of RNA. A new method of high sensitivity and quantitative analysis for the determination of NAC grade RNA is found, and the principle is discussed. The effects of pH, buffer system, reaction time, temperature and TTMAAlPc concentration were investigated. The best reaction conditions (pH 8 wide buffer, 5 min, room temperature and 2 L-1 10-6 mol L-1 TTMAAlPc) were determined. Under the optimal conditions, the linear regression equation of the method is y=-15.0+0.51x, the correlation coefficient r=0.998 6, the linear range 7.71~1 705.57ng. ML-1, and the detection limit of 1.55ng mL-1. This method has high sensitivity and wide linear range. It has strong anti-interference ability to RNA for the determination of common interfering substances, including anion, cationic, surfactant and vitamin, and it is easy to operate. The method is applied to the determination of the RNA content in the actual sample, and the satisfactory results have been obtained. The reference method for the first time the determination of fluorescence quantum yield of pH under different TTMAAlPc, the result shows that the fluorescence quantum yield of TTMAAlPc is higher, and the acidity of stability in a wide range, indicating that TTMAAlPc is a novel red fluorescent probe has great application potential, expand the application is worthy of further research.
【作者單位】: 廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院抗癌研究中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃項(xiàng)目(90206016) 福建省科技重點(diǎn)項(xiàng)目(2012Y0081) 省屬公益類科研院所基本科研專項(xiàng)(2014R1102,2015R1101031-2) 廈門市科技計(jì)劃項(xiàng)目(3502Z20143015)資助
【分類號】:O657.3;O629.74
【正文快照】: 引言隨著生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)的快速發(fā)展,傳統(tǒng)的熒光探針越來越顯示出其局限性。因?yàn)樯铩⑨t(yī)學(xué)和環(huán)境樣品通常組成復(fù)雜,在進(jìn)行熒光分析時(shí)常受到背景熒光和散射光的顯著干擾,客觀上要求發(fā)展新一代熒光探針以解決這一問題。因此,長波熒光檢測技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生[1-2]。金屬酞菁化合物

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本文編號:1340929

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