本文關(guān)鍵詞：核酸納米技術(shù)在化學發(fā)光生物傳感分析中的研究與應用　出處：《青島科技大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： micro RNA 支化雜交鏈反應 DNA納米結(jié)構(gòu) 化學發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移

【摘要】：作為生物大分子之一的脫氧核糖核酸(DNA)由于具有獨特的理化性質(zhì),被廣泛的用于制造各種納米結(jié)構(gòu),目前DNA納米技術(shù)已成為納米科學最為活躍的研究領(lǐng)域。由DNA和RNA構(gòu)成的自組裝納米結(jié)構(gòu),憑借其易于標記、結(jié)構(gòu)設計靈活、穩(wěn)定等特點為生物傳感的設計和制作提供了一種新技術(shù)和新方法。本文利用核酸自組裝技術(shù)開展了如下工作:首先,利用靶micro RNA引發(fā)兩條發(fā)卡結(jié)構(gòu)的DNA的構(gòu)象發(fā)生改變,在聚合酶/剪切酶的作用下,生成大量辣根過氧化物DNA模擬酶,催化魯米諾/過氧化氫化學發(fā)光體系,實現(xiàn)了對micro RNA-122的高靈敏和高選擇性檢測,提出了一種基于鏈置換反應由靶引發(fā)的級聯(lián)循環(huán)放大免標記檢測mi RNAs的新方法;本方法實現(xiàn)了對micro RNA-122的精細檢測,得到線性范圍為1f M到100 p M,檢測限達到0.82 f M(3σ)。分別檢測四種不同堿基序列的mi RNA檢測mi RNA-122、mi RNA-let-7a、mi RNA-let-7b和mi RNA-let-7c。表現(xiàn)出良好的選擇性。第二,以micro RNA作為引物,在磁珠表面通過自組裝形成DNA網(wǎng)絡結(jié)構(gòu),構(gòu)建新型化學發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移生物傳感器,該結(jié)構(gòu)中包含辣根過氧化物DNA模擬酶和熒光素基團,從而實現(xiàn)化學發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移對micro RNA的高靈敏度檢測;檢測限為10 f M,分別檢測不同序列的mi RNA(空白,mi R-let-7a,mi R-let-7b,mi R-let-7c,mi R-122),表現(xiàn)出良好的選擇性。第三,基于鏈置換反應,由靶引發(fā)兩條DNA發(fā)卡結(jié)構(gòu)和一條環(huán)狀DNA結(jié)構(gòu)自組裝形成雙螺旋DNA發(fā)卡結(jié)構(gòu),靶mi RNA會釋放出來,同時引發(fā)新一輪的自組裝過程,從而實現(xiàn)引發(fā)鏈的等溫循環(huán)放大檢測,進而通過實時熒光檢測,實現(xiàn)對mi RNA的高靈敏度檢測。
【學位授予單位】：青島科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3

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