本文關(guān)鍵詞：毛細(xì)管電泳—電化學(xué)發(fā)光靈敏檢測藥物及藥物與蛋白相互作用研究　出處：《信陽師范學(xué)院》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：毛細(xì)管電泳(CE)具有分離效率高、分析耗時(shí)短、樣品消耗量少和經(jīng)濟(jì)節(jié)約等優(yōu)點(diǎn),使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。電化學(xué)發(fā)光(ECL)具有靈敏度高、儀器設(shè)備簡單、操作方便、易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等特點(diǎn),廣泛地應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、臨床、環(huán)境、食品、免疫和核酸雜交分析和工業(yè)分析等領(lǐng)域�；贑E的高分離效率、ECL的高檢測靈敏度,本論文充分采用CE-ECL聯(lián)用技術(shù)開展了毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光靈敏檢測藥物及藥物與蛋白相互作用的研究等方面工作。主要?jiǎng)?chuàng)新研究內(nèi)容如下：1.發(fā)展了一種基于聯(lián)吡啶釕分離檢測酒石酸美托洛爾(ME)和富馬酸比索洛爾(BF)的CE-ECL新方法,并開展了藥物與蛋白相互作用的研究。對影響CE分離和ECL檢測的實(shí)驗(yàn)條件,如：添加劑的種類、濃度、緩沖溶液的濃度和pH、分離電壓及檢測電位等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,ME和BF在10 min內(nèi)得到了良好分離和檢測。ME和BF的線性范圍分別是0.05～60μmol L~(-1)和0.5～40 μmol L~(-1); ME和BF的檢出限LODs(S/N＝3)分別為1.9×10-9和9.4×10~(-8) mol L~(-1);在人尿樣中ME和BF的定量限LOQs (S/N=10)分別為3.3×10-7 mol L~(-1)和1.4×10-6 mol L~(-1)。ME和BF在日內(nèi)遷移時(shí)間RSDs分別為4.5%和6.7%,日間遷移時(shí)間RSDs分別為7.4%和7.9%；日內(nèi)峰面積RSDs分別為2.1%和3.8%,日間峰面積RSDs分別為3.1%和5.5%。發(fā)展的CE-ECL新方法成功應(yīng)用于人尿樣中的ME和BF的檢測,加標(biāo)回收率在89.0%~(-1)26.0%,RSDs不大于7.4%。利用發(fā)展的方法研究了ME和BF分別與人血清白蛋白(HSA)相互作用,得到ME和BF與HSA的結(jié)合位點(diǎn)分別為1.2和1.1,結(jié)合常數(shù)分別為2.8 ×103 L mol~(-1)和2.7×103 L mol~(-1)。2.建立了一種CE結(jié)合Ru(bpy)32+-ECL靈敏檢測四種局麻藥奴佛卡因(PAH)、丁卡因(TCH)、丙美卡因(PCH)和地布卡因(CIN)的新方法。使用鈾摻雜的普魯士藍(lán)(Eu-PB)修飾工作電極提高目標(biāo)物檢測靈敏度。研究了影響CE分離、ECL檢測的實(shí)驗(yàn)條件,如：添加劑的種類及濃度、緩沖溶液濃度和pH、分離電壓和檢測電位等。在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下,上述四種局麻藥能在10 min內(nèi)得到基線分離。PAH、 TCH、PCH和CIN的線性范圍分別是0.2～75μmol L~(-1)、0.5～50μmol L~(-1)、0.5～100μmolL~(-1)和0.5～100 μmol L~(-1)。PAH、TCH、PCH和CIN的LODs(S/N=3)分別為5.5×10~(-8) mol L~(-1),9.6×10~(-8) mol L~(-1)、2.5 ×10~(-8) mol L~(-1)和3.5×10~(-8) mol L~(-1)。在人尿樣中,PAH、TCH、PCH和CIN的LOQs(S/N=10)分別為5.9 ×10-7 mol L~(-1)、9.2×10-7 mol L~(-1),8.3×10-7 mol L~(-1)和5.0 ×10-7 mol L~(-1)。四種分析物日內(nèi)遷移時(shí)間RSDs為1.2%～2.5%,日間RSDs為2.4%～4.9%；日內(nèi)峰面積RSDs為1.7%～3.3%；日間峰面積RSDs為2.2%～5.6%。PAH、TCH、PCH和CIN在人尿樣中的加標(biāo)回收率為87.6%～107.7%, RSDs不大于5.9%。以PAH為例,開展了PAH與HSA之間的相互作用研究,得到二者之間的結(jié)合位點(diǎn)是1.03,結(jié)合常數(shù)是2.4 ×104L mol~(-1)。3.提出了一種基于金納米(AuNPs)增強(qiáng)CE-ECL信號靈敏檢測p-受體阻斷劑心得安(Pro)和醋丁酰心安(Ace)的新方法。對影響CE分離、ECL檢測以及AuNPs的用量進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化。在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下,Pro的線性范圍是0.01～100μmol L~(-1), LOD(S/N=3) 為3.6×10-9 mol L~(-1); Ace的線性范圍是0.02~(-1)00μmol L~(-1), LOD (S/N ＝3)是5.0×10-9 mol L~(-1)。人尿樣中Pro和Ace的LOQs (S/N=10)分別為1.1×10-7 mol L~(-1)和9.5 ×10~(-8) mol L~(-1)。 Pro和Ace在日內(nèi)的遷移時(shí)間RSDs為1.9%～2.4%,日間RSDs為2.9%～3.8%；日內(nèi)峰面積RSDs為3.2%～3.7%,日間峰面積RSDs為4.3%4.6%。將提出的CE-ECL新方法應(yīng)用于人尿樣中Pro和Ace的檢測,加標(biāo)回收率為98.0%～106.7%,RSDs不大于4.2%。此外,我們還以Pro為例,研究其與HSA之間的相互作用,所得結(jié)合位點(diǎn)為1.0,結(jié)合常數(shù)為2.3 ×104 L mol~(-1)。
【學(xué)位授予單位】：信陽師范學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：O657;TQ460

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張效偉;張召香;;二維毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測尿樣中的β-阻斷劑[J];分析化學(xué);2010年05期

2 ;Electrocatalytic oxidation of methanol at platinum electrode modified with Eu-Fe cyanide-bridged binuclear complexes[J];Chinese Chemical Letters;2010年03期

3 ;Capillary electrophoresis with electrochemiluminescence detection for the analysis of quinolone drugs and pharmacokinetics study[J];Chinese Chemical Letters;2008年08期

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本文編號：1313569