本文關(guān)鍵詞：硝基呋喃類四種藥物殘留快速檢測方法的研究

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【摘要】：硝基呋喃類抗生素曾被廣泛用于動物疾病預(yù)防和治療,或作為添加劑促進(jìn)動物生長。因硝基呋喃對人類有潛在的致癌和致突變危險,現(xiàn)已被禁用于動物養(yǎng)殖中。該類抗生素抗菌譜廣,價格低廉,違規(guī)使用情況較為嚴(yán)重,尤其是呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮和呋喃唑酮四種藥物。目前關(guān)于這4種硝基呋喃類抗生素代謝物(SEM、AHD、AMOZ和AOZ)的檢測方法的報道大部分免疫檢測法為ELISA,有關(guān)于直接競爭化學(xué)發(fā)光酶免疫分析檢測方法(dc-CLEIA)的報道較少。而且在已報道的膠體金免疫層析方法中,絕大多數(shù)是檢測單一硝基呋喃類抗生素代謝物殘留的,而能同時檢測多種該類抗生素殘留已成發(fā)展的趨勢。本文旨在建立SEM、AHD、AMOZ和AOZ的直接競爭化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法,建立可以同時檢測SEM、AHD、AMOZ和AOZ的膠體金免疫層析方法。1、SEM、AHD、AMOZ和AOZ的dc-CLEIA的建立。本試驗通過碳二亞胺法成功制備了酶標(biāo)物CPAMOZ-HRP、CPAOZ-HRP、CPAHD-HRP和CPSEM-HRP。根據(jù)本試驗建立的AMOZ dc-CLEIA方法可知:在0.0625-8 ng/mL范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程為y=-0.397x+0.286,R2=0.992,IC50為0.289 ng/mL;批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為2.24%和3.21%;樣品最低檢出限為0.0596μg/kg,添加AMOZ的回收率范圍為85%-91.93%。根據(jù)本試驗建立的AOZ dc-CLEIA方法可知:在0.0625-8 ng/mL范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程為y=-0.329x+0.274,R2=0.992,IC50為0.206ng/mL;批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為3.31%和5.48%;樣品最低檢出限為0.1052μg/kg,添加AOZ的回收率范圍為78%-103%。根據(jù)本試驗建立的SEM dc-CLEIA方法可知:在0.0625-8 ng/mL范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程為y=-0.35x+0.302,R2=0.991,IC50為0.271 ng/mL;批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為2.37%和2.6%;樣品最低檢出限為0.1165μg/kg,添加SEM的回收率范圍為82%-95%。根據(jù)本試驗建立的AHD dc-CLEIA方法可知:在0.125-32 ng/mL范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程為y=-0.358x+0.427,R2=0.992,IC50為0.625 ng/mL;批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為3.86%和5.93%;樣品最低檢出限為0.3635μg/kg,添加AHD的回收率范圍為75%-94%。2、建立同時檢測SEM、AHD、AMOZ和AOZ的膠體金免疫層析方法。研制的硝基呋喃類四種抗生素代謝物的膠體金試紙條:AOZ靈敏度可達(dá)到0.75 ng/mL,AMOZ、AHD和SEM為1ng/mL。該方法特異性好,與硝基呋喃類母藥及其代謝物、磺胺類藥物、甲硝唑等不發(fā)生交叉反應(yīng)。膠體金試紙條測定的20份空白樣本假陽性率為0,測定的50份陽性樣本假陰性率為0。在實際樣品檢測中,膠體金試紙條檢測結(jié)果與ELISA檢測結(jié)果一致。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：O657.63

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1 陳瑞清;;液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測鰻魚肌肉組織中4種硝基呋喃類代謝物殘留量[J];福建農(nóng)業(yè)學(xué)報;2007年01期

2 王媛;蔡友瓊;賈東芬;于慧娟;黃冬梅;史永富;錢蓓蕾;史志霞;;高效液相色譜法檢測水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量[J];分析試驗室;2009年12期

3 劉謙;顏紅;王鋒;劉麗麗;;動物源性食品中硝基呋喃類獸殘檢測關(guān)鍵控制點[J];計量與測試技術(shù);2013年03期

4 王t，

本文編號：1207476