鹽析和雙水相萃取法在純化藻藍蛋白過程中的研究
本文關(guān)鍵詞:鹽析和雙水相萃取法在純化藻藍蛋白過程中的研究
【摘要】:本論文以新鮮巢湖水華藍藻為研究對象,通過凍融破壁方法提取藻藍蛋白粗提液,以藻藍蛋白的純度和得率為指標(biāo),在此基礎(chǔ)上,研究了不同鹽析劑對藻藍蛋白提純效果的影響和雙水相法提純藻藍蛋白的條件。另外,探索了鹽析法和雙水相萃取法的結(jié)合方式。主要實驗結(jié)果摘要如下:1.不同鹽析劑對藻藍蛋白提純效果的影響研究。通過凍融破壁法獲得一定量藻藍蛋白粗提液。選取硫酸銨、檸檬酸三銨、檸檬酸鉀三種鹽析劑進行兩步鹽析實驗,結(jié)合光譜掃描法選取三種鹽析劑的最優(yōu)投加量,最終優(yōu)選出最佳的鹽析劑。結(jié)果表明:硫酸銨是最佳的藻藍蛋白鹽析劑。硫酸銨鹽析劑兩步鹽析的最佳投加量分別為1.2mol/L和2.Omol/L,藻藍蛋白純度可達到1.95.2.PEG-硫酸銨體系對藻藍蛋白提純效果的影響。以藻藍蛋白純度和回收率為指標(biāo),經(jīng)過凍融和鹽析所得的藻藍蛋白液,再用正交法選取雙水相體系中聚乙二醇的分子量和其他實驗條件,之后用單因素法進一步確認(rèn)不同條件對藻藍蛋白提取效果的影響。結(jié)果表明:選用聚乙二醇1000和硫酸銨構(gòu)成雙水相體系。聚乙二醇質(zhì)量濃度為9%,硫酸銨質(zhì)量濃度為26%、使用未調(diào)節(jié)pH的原水樣、NaC1質(zhì)量濃度0。3.鹽析法和雙水相法結(jié)合方式的探索?疾炝讼入p水相后鹽析和先鹽析后雙水相的結(jié)合方法。結(jié)果表明,由于聚乙二醇在藻藍蛋白液中較難去除,所以雙水相萃取實驗后再接鹽析比較難以實現(xiàn),且粗提液接雙水相純度提高沒有鹽析效果好,所以鹽析和雙水相實驗相結(jié)合的方式應(yīng)為鹽析后接雙水相。
【學(xué)位授予單位】:合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:TQ936;O658.2
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本文編號:1203198
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