本文關(guān)鍵詞：千層塔中生物堿化學(xué)成分的研究

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【摘要】：千層塔[Huperzia serrata(Thunb.)Trev]為多年生草本植物蛇足石杉的全草,民間普遍用于治療肺炎、跌打損傷、痔瘡便血、腫毒等疾病。研究表明,千層塔中的生物堿類化合物含量較多,有些具有抗乙酰膽堿酯酶作用以及提高學(xué)習(xí)和記憶力的功效,在臨床醫(yī)學(xué)、食品和保健品方面具有廣闊的應(yīng)用前景。因此,千層塔中生物堿成分的分離和分析成為研究的熱點(diǎn)。本試驗(yàn)以千層塔中的生物堿提取物作為研究對(duì)象,運(yùn)用超高效液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)建立了一種快速檢測(cè)分析生物堿化學(xué)成分的現(xiàn)代研究方法,為生物堿的分離和應(yīng)用提供了科學(xué)的依據(jù)；應(yīng)用現(xiàn)代色譜法對(duì)生物堿進(jìn)行分離研究,并通過核磁共振技術(shù)對(duì)得到的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,為千層塔中生物堿的開發(fā)應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。研究主要內(nèi)容及結(jié)論如下：(1)運(yùn)用JPLC-Q-TOF-MS技術(shù)對(duì)千層塔中的生物堿提取物在正離子模式下進(jìn)行檢測(cè),選擇25eV,45eV兩個(gè)碰撞能量對(duì)其做二級(jí)質(zhì)譜檢測(cè)分析。對(duì)所得質(zhì)譜信息進(jìn)行分析,共鑒定出24個(gè)生物堿化合物,其中Fawcettimine型生物堿共有12個(gè),Lycopodine型生物堿和Miscellaneous型生物堿各有6個(gè)；在25eV的碰撞能量下,生物堿主要脫掉側(cè)鏈的羥基或氧原子等官能團(tuán)形成(M+-17)或(M+-16)的碎片峰,而在45eV的碰撞能量下,Fawcettimine型生物堿易脫掉碳氧雙鍵形成(M+-28)的特征峰,脫掉碳氧雙鍵的環(huán)隨后也會(huì)斷裂形成m/z152的特征峰,Lycopodine型生物堿在失去羥基或氧原子后還會(huì)進(jìn)行更深程度的裂解,形成1n/z105或m/z137的基峰,Miscellaneous型生物堿在脫去側(cè)鏈后則會(huì)脫掉一個(gè)或多個(gè)六元環(huán)形成m/z263、m/z150的基峰。(2)采用硅膠柱色譜法、薄層制備色譜法等,共分離純化得到了3個(gè)生物堿單體化合物,應(yīng)用核磁共振13C-NMR和1H-NMR檢測(cè)技術(shù),并對(duì)照參考文獻(xiàn)鑒定出化合物1和化合物2分別為石杉?jí)A甲(Huperzine A)和6α-hydroxylycopodine,而化合物3由于難溶于各種常見的有機(jī)氘代溶劑,無法對(duì)其進(jìn)行更深一步的結(jié)構(gòu)鑒定。另外,在試驗(yàn)過程中還得到2個(gè)非生物堿,即化合物4和化合物5,經(jīng)鑒定兩者都屬于三萜類化合物,分別為21β-hydroxy-serrat-14-en-3β-ol和21α-hydroxy-serrat-14-en-3β-y1-acetate。
【關(guān)鍵詞】：千層塔 生物堿 UPLC-Q-TOF-MS 色譜法 分離 核磁共振
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R284;O657
【目錄】：

• 摘要10-11
• Abstract11-13
• 1 前言13-23
• 1.1 千層塔概述13-16
• 1.1.1 千層塔簡(jiǎn)介13
• 1.1.2 千層塔中的化學(xué)成分13-15
• 1.1.2.1 生物堿類化合物13-14
• 1.1.2.2 三萜類化合物14
• 1.1.2.3 黃酮類化合物14-15
• 1.1.3 千層塔中生物堿的生理活性15-16
• 1.2 生物堿的分離純化方法概述16-19
• 1.2.1 常壓硅膠柱層析法16
• 1.2.2 高速逆流色譜法16-17
• 1.2.3 高效制備液相色譜法17
• 1.2.4 離子交換樹脂法17-18
• 1.2.5 超臨界流體萃取法18
• 1.2.6 自動(dòng)真空液相色譜法18-19
• 1.2.7 Sephadex LH20法19
• 1.3 生物堿的分析方法概述19-21
• 1.3.1 高效液相色譜法19-20
• 1.3.2 超臨界流體色譜法20
• 1.3.3 超高效液相色譜-四級(jí)桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法20-21
• 1.4 千層塔中生物堿的分離純化方法研究現(xiàn)狀21-22
• 1.5 千層塔中生物堿的分析方法研究現(xiàn)狀22
• 1.6 本研究的目的及意義22-23
• 2 UPLC-Q-TOF-MS法分析千層塔中的生物堿23-35
• 2.1 千層塔中生物堿的提取與檢測(cè)23-25
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料23
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法23
• 2.1.2.1 生物堿的提取方法23
• 2.1.2.2 生物堿的HPLC檢測(cè)方法23
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備23-24
• 2.1.3.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑23-24
• 2.1.3.2 儀器設(shè)備24
• 2.1.4 結(jié)果與分析24-25
• 2.1.4.1 總生物堿提取結(jié)果24
• 2.1.4.2 HPLC檢測(cè)結(jié)果24-25
• 2.2 UPLC-Q-TOF-MS法分析千層塔中的生物堿25-33
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料25
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法25
• 2.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備25-26
• 2.2.3.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑25
• 2.2.3.2 儀器設(shè)備25-26
• 2.2.4 結(jié)果與分析26-33
• 2.2.4.1 生物堿樣品的正離子模式總離子流圖26
• 2.2.4.2 生物堿樣品的質(zhì)譜分析26-33
• 2.3 小結(jié)與討論33-35
• 3 千層塔中總生物堿提取物的分離及其結(jié)構(gòu)的鑒定35-53
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料35
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法35-37
• 3.2.1 千層塔中總生物堿提取物的分離方法35-37
• 3.2.1.1 生物堿提取物的TLC分析35
• 3.2.1.2 生物堿樣品的自動(dòng)真空液相色譜分離35-36
• 3.2.1.3 1C樣品的柱色譜法分離與純化36-37
• 3.2.2 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定方法37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備37-38
• 3.3.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑37-38
• 3.3.2 儀器設(shè)備38
• 3.4 結(jié)果與分析38-52
• 3.4.1 千層塔中生物堿提取物的分離結(jié)果38-42
• 3.4.1.1 生物堿提取物的TLC檢測(cè)結(jié)果38-39
• 3.4.1.2 生物堿真空液相色譜分離結(jié)果39
• 3.4.1.3 1C樣品柱色譜法分離純化實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-42
• 3.4.2 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果42-52
• 3.4.2.1 化合物1的核磁共振光譜的解析42-44
• 3.4.2.2 化合物2的核磁共振光譜的解析44-47
• 3.4.2.3 化合物3的核磁共振光譜的解析47
• 3.4.2.4 化合物4的核磁共振光譜的解析47-50
• 3.4.2.5 化合物5的核磁共振光譜的解析50-52
• 3.5 小結(jié)與討論52-53
• 4 結(jié)論與討論53-55
• 4.1 結(jié)論53-54
• 4.2 討論54-55
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 附錄60-70
• 致謝70-71

【相似文獻(xiàn)】

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