本文關(guān)鍵詞：增強(qiáng)型熒光探針的設(shè)計(jì)及在硫化氫和pH檢測(cè)方面的應(yīng)用

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【摘要】：近年來(lái),由于熒光探針在檢測(cè)和標(biāo)記方面應(yīng)用的日趨成熟,使其成為科學(xué)探究的重要手段,在很多領(lǐng)域都展示出了廣闊的應(yīng)用前景,如環(huán)保、化工、食品、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等。目前絕大多數(shù)熒光探針具有提供定量檢測(cè)信息的特征,但不具有特異的靶向性。這不能滿足人們對(duì)某些生理過(guò)程進(jìn)行深入觀測(cè)的研究。所以,急需研發(fā)具有定位功能的熒光探針。本論文從尼羅紅、熒光素兩種發(fā)色團(tuán)出發(fā),通過(guò)引入其他的結(jié)構(gòu)單元,對(duì)其結(jié)構(gòu)自身進(jìn)行修飾,發(fā)掘新特性的同時(shí)也能彌補(bǔ)一些自身的缺點(diǎn)。本文合成了種增強(qiáng)型熒光探針NRS,它能夠在與硫化氫作用后,產(chǎn)生強(qiáng)烈熒光,并且能夠定位于線粒體�；诠庹T導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移(PET)機(jī)理,將吸電子的2,4-二硝基苯結(jié)構(gòu)單元引入母體尼羅紅衍生物9-Dimethylamino-2-hydroxy-5H-benzo[a] phenoxazin-5-one)上,構(gòu)建了熒光探針NRS。探針NRS表現(xiàn)了優(yōu)異的特性；NRS可以快速對(duì)硫化氫做出響應(yīng),在相同條件下,有其他陰陽(yáng)離子、活性氧、活性氮等物種的存在干擾下,探針NRS依然能對(duì)硫化氫產(chǎn)生專一的響應(yīng),表明探針NRS對(duì)硫化氫的這種響應(yīng)是具有很高的選擇性的。通過(guò)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞的線粒體里出現(xiàn)熒光,說(shuō)明探針NRS能夠進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部,具有細(xì)胞膜的透過(guò)性。與Rh123進(jìn)行共定位成像進(jìn)一步說(shuō)明探針NRS能夠定位于細(xì)胞的線粒體。本文第二部分合成了一種線粒體靶向型pH熒光探針FDI。探針FDI能夠快速的定位于線粒體中,且該探針具有較長(zhǎng)的熒光發(fā)射光譜(650-750nm)、有pH響應(yīng)范圍寬、響應(yīng)快速的特點(diǎn)。FDI對(duì)于pH值的響應(yīng),可以很直觀的體現(xiàn)在顏色的變化上,不同pH下的探針FDI溶液顏色有明顯差異。進(jìn)行了光穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,探針FDI光穩(wěn)定性很好,光照下也不易分解。熒光共聚焦顯微成像實(shí)驗(yàn)也說(shuō)明探針FDI有較好的溶解性和生物兼容性,表明這類探針具有較好的細(xì)胞通透性。
【關(guān)鍵詞】：熒光探針 尼羅紅 熒光素 硫化氫 pH
【學(xué)位授予單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-11
• 第1章 引言11-16
• 1.1 背景介紹11-13
• 1.1.1 熒光分子探針11
• 1.1.2 熒光分子探針機(jī)理11-12
• 1.1.3 熒光分子探針的發(fā)展12-13
• 1.2 線粒體探針的研究進(jìn)展13-14
• 1.3 pH探針的研究進(jìn)展14-15
• 1.4 課題研究目的與意義15
• 1.5 課題研究?jī)?nèi)容15-16
• 第2章 基于尼羅紅衍生物的增強(qiáng)型硫化氫熒光探針NRS16-37
• 2.1 概述16-18
• 2.2 作用機(jī)理18-19
• 2.3 合成路線19
• 2.4 實(shí)驗(yàn)部分19-23
• 2.4.1 儀器和原料19
• 2.4.2 中間體1的合成19-20
• 2.4.3 中間體2的合成20
• 2.4.4 探針NRS的制備20
• 2.4.5 溶液的配置20-21
• 2.4.6 測(cè)試實(shí)驗(yàn)方法21-23
• 2.5 結(jié)果與討論23-37
• 2.5.1 探針NRS的結(jié)構(gòu)表征23-24
• 2.5.2 探針NRS的光譜性質(zhì)24-35
• 2.5.3 探針NRS的細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)35-37
• 第3章 線粒體靶向型近紅外pH熒光探針FDI37-53
• 3.1 概述37
• 3.2 作用機(jī)理37-38
• 3.3 合成路線38-39
• 3.4 實(shí)驗(yàn)部分39-41
• 3.4.1 儀器和原料39
• 3.4.2 中間體1熒光素單醛的制備方法39
• 3.4.3 中間體2熒光素烯醛的制備方法39
• 3.4.4 FDI的制備方法39-40
• 3.4.5 溶液的配制40
• 3.4.6 測(cè)試實(shí)驗(yàn)方法40-41
• 3.5 結(jié)果與討論41-53
• 3.5.1 探針FDI的光譜性質(zhì)41-51
• 3.5.2 探針FDI的熒光共聚焦顯微成像51-53
• 結(jié)論與展望53-54
• 致謝54-55
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加科研情況59

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李靜;范大和;李紅波;袁淑軍;;水溶性汞離子熒光探針的研究新進(jìn)展[J];光譜實(shí)驗(yàn)室;2010年03期

2 吳世康;熒光化學(xué)傳感器研究中的光化學(xué)與光物理問(wèn)題[J];化學(xué)進(jìn)展;2004年02期

3 王敬國(guó);尼羅紅在測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞中聚-β-羥基丁酸和其他脂類貯藏物質(zhì)中的應(yīng)用[J];微生物學(xué)報(bào);1994年01期

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本文編號(hào)：1075934