酶電極法快速測定甘油含量的研究
本文關(guān)鍵詞:酶電極法快速測定甘油含量的研究
【摘要】:利用酶固定化技術(shù),以甘油激酶(GK)、甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)為反應(yīng)酶,研究GK、GPO的固定化方法及固定化模式,制備甘油酶膜、甘油酶電極,并利用其測定甘油含量。結(jié)果表明,GK、GPO按1∶1比例固定化時,酶電極電流信號最高;最高效固定模式為:GK固定于核微孔膜,共價偶聯(lián)GPO固定于Biodyne膜,形成共價雙酶膜,進(jìn)而組裝為甘油酶電極。性能研究表明,甘油酶電極最適pH值為7.0,最佳溫度為28~32℃;最佳實驗條件下,線性范圍為0.05~9.00 g/L;回收率為98.4%~102.4%,穩(wěn)定性高,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)5%;測定結(jié)果與高效液相色譜法、高碘酸氧化法比較,無明顯差異(P0.05),且該方法操作簡單,專一性強(qiáng),檢測快速,適于實際生產(chǎn)中甘油的實時定量及監(jiān)控。
【作者單位】: 山東省科學(xué)院能源研究所;山東省生物質(zhì)氣化技術(shù)重點實驗室;山東省科學(xué)院生物研究所;山東省生物傳感器重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 甘油 固定化酶膜 酶電極
【基金】:山東省重點研發(fā)項目(2015GSF121047);山東省重點研發(fā)項目(2015GSF117034) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201503135-04) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2016YL007)資助項目
【分類號】:TQ920.6;O657.1
【正文快照】: 甘油是一種重要的微生物碳源,發(fā)酵生產(chǎn)中,甘油作為碳源廣泛應(yīng)用于基因工程菌培養(yǎng)及生物活性大分子表達(dá)[1]。當(dāng)前發(fā)酵領(lǐng)域廣泛采用的畢赤酵母(Pichiapastoris),其生長階段以甘油為唯一碳源,表達(dá)階段以甲醇為碳源。研究表明,混合碳源的流加控制[2]、培養(yǎng)溫度[3]等條件均影響畢赤
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本文編號:1029438
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