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基于不同類熒光物質(zhì)編碼微球的制備

發(fā)布時間:2017-10-10 21:07

  本文關(guān)鍵詞:基于不同類熒光物質(zhì)編碼微球的制備


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【摘要】:液相芯片技術(shù)作為一種新興的檢測技術(shù),相比于傳統(tǒng)的檢測技術(shù)有很多獨(dú)特優(yōu)點(diǎn),尤其可以實(shí)現(xiàn)快速實(shí)時高通量檢測,因而近年來成為臨床診斷領(lǐng)域和生命科學(xué)研究中的一大熱點(diǎn)。作為該技術(shù)的核心材料,熒光編碼微球承擔(dān)著分子識別和信號表達(dá)的任務(wù)。目前人類疾病診斷和免疫研究對熒光編碼微球的種類和數(shù)量有著巨大需求,同時實(shí)現(xiàn)微球表面的生物分子修飾也是其在生物檢測領(lǐng)域應(yīng)用的重要條件,因此研究和開發(fā)更多種類的熒光編碼微球及對其進(jìn)行表面官能團(tuán)修飾具有重要的實(shí)際意義。在以上實(shí)際需求的背景下,本論文先提出一種基于三種不同類型熒光團(tuán)的熒光微球制備方法并通過調(diào)節(jié)比例改變微球的熒光光譜最終獲得一系列的編碼;然后又制備了一系列基于共軛高分子的表面具有生物分子反應(yīng)位點(diǎn)且顏色可調(diào)的熒光微球并實(shí)現(xiàn)編碼。具體研究內(nèi)容分以下兩個方面闡述:(1)基于三種不同種類的熒光團(tuán)單分散光譜編碼微球的制備該體系提出一種基于熒光光譜制備編碼微球的策略:將稀土離子銪離子(Eu3+)和有機(jī)染料羅丹明6G(R6G)先分別后共同引入到多孔、單分散且在微米尺寸上的聚合物基質(zhì)微球(SPSDVB)上制備編碼微球。三種不同類型熒光團(tuán)(聚合物熒光團(tuán)SPSDVB、無機(jī)熒光團(tuán)Eu3+和有機(jī)熒光團(tuán)R6G)的多種組合提供了強(qiáng)大的基于發(fā)射光譜的編碼能力。經(jīng)過條件優(yōu)化后,我們制備了10種波長-強(qiáng)度組合的二元編碼微球和15種波長-強(qiáng)度組合的三元編碼微球。這些組合(或熒光碼)可在同一波長下激發(fā)。微觀研究表明,其他熒光團(tuán)的引入并未對基質(zhì)微球的單分散性、尺寸和表面形貌有明顯影響。此外,這些球體對洗滌和熱處理均有良好的穩(wěn)定性。(2)表面帶有反應(yīng)位點(diǎn)且顏色可調(diào)的聚對亞苯基亞乙烯(PPV)熒光微球的制備基于本課題組的研究基礎(chǔ),我們合成了帶有羧基側(cè)基的PPV前驅(qū)體(pre-PPVCOO-),經(jīng)實(shí)驗(yàn)條件探索和優(yōu)化后,將其引入到表面帶有氨基和羥基的聚甲基丙烯酸甘油單酯微球(APGMA)上獲得APGMA-(pre-PPVCOO-)微球;然后進(jìn)行簡單的熱處理并通過改變熱消除溫度得到一系列表面具有反應(yīng)位點(diǎn)且熒光發(fā)射不同的APGMA-PPVCOO-微球。微球的熒光發(fā)射波長隨著消除溫度的升高逐漸紅移,發(fā)射峰值的紅移最大值近100 nm。利用流式細(xì)胞對不同熱消除溫度下獲得的微球進(jìn)行測試,并利用所得熒光信號進(jìn)行編碼,獲得一系列不同的編碼。激光共聚焦等表征結(jié)果表明,微球尺寸均一、熒光發(fā)射均勻穩(wěn)定且具有明顯的核殼結(jié)構(gòu)。在高離子濃度的離子解離劑中,這些微球具有良好的穩(wěn)定性。此外這些微球還具有較高的熱穩(wěn)定、光穩(wěn)定性以及良好的生物分子偶合性。
【關(guān)鍵詞】:聚合物微球 熒光 編碼 共軛聚合物
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:O657.3
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 第一章 緒論10-30
  • 1.1 液相芯片技術(shù)10-16
  • 1.1.1 原理10-13
  • 1.1.2 優(yōu)點(diǎn)13-14
  • 1.1.3 應(yīng)用14-16
  • 1.2 熒光編碼微球16-28
  • 1.2.1 組成16-17
  • 1.2.2 分類17-26
  • 1.2.3 應(yīng)用26-28
  • 1.3 本論文課題的提出依據(jù)及論文的整體框架28-30
  • 第二章 基于三種不同種類熒光團(tuán)的單分散光譜編碼微球的制備30-46
  • 2.1 引言30-31
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)部分31-34
  • 2.2.1 實(shí)驗(yàn)原料與實(shí)驗(yàn)儀器31-32
  • 2.2.2 編碼微球的制備32-34
  • 2.2.2.1 SPSDVB-Eu微球的制備32-33
  • 2.2.2.2 SPSDVB-R6G微球的制備33
  • 2.2.2.3 SPSDVB-Eu-R6G微球的制備33-34
  • 2.3 結(jié)果與討論34-45
  • 2.3.1 微球的制備和條件優(yōu)化34-37
  • 2.3.2 微球編碼37-39
  • 2.3.3 宏觀和微觀圖像表征39-44
  • 2.3.4 穩(wěn)定性表征44-45
  • 2.4 本章小結(jié)45-46
  • 第三章 表面帶有反應(yīng)位點(diǎn)且顏色可調(diào)的聚對亞苯基亞乙烯(PPV)熒光微球的制備46-68
  • 3.1 引言46-47
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)部分47-50
  • 3.2.1 實(shí)驗(yàn)原料與實(shí)驗(yàn)儀器47-48
  • 3.2.2 APGMA-PPVCOO-微球的制備48-50
  • 3.2.2.1 pre-PPVCOO-的合成48-49
  • 3.2.2.2 APGMA-(pre-PPVCOO-)微球的制備49
  • 3.2.2.3 APGMA-PPVCOO-微球的制備49
  • 3.2.2.4 熒光微球與RBITC標(biāo)記的羊抗兔IgG及RBITC作用49-50
  • 3.3 結(jié)果與討論50-67
  • 3.3.1 單體與聚合物前驅(qū)體pre-PPVCOO-的合成與表征50-52
  • 3.3.2 微球制備和條件優(yōu)化52-55
  • 3.3.3 微球的熒光光譜表征55-56
  • 3.3.4 宏觀和微觀照片表征56-60
  • 3.3.5 流式細(xì)胞儀表征及微球編碼60-62
  • 3.3.6 穩(wěn)定性表征62-65
  • 3.3.7 熒光微球與生物分子作用65-67
  • 3.4 本章小結(jié)67-68
  • 第四章 結(jié)論與展望68-70
  • 4.1 本論文工作總結(jié)68
  • 4.2 本論文的創(chuàng)新點(diǎn)68-69
  • 4.3 工作展望69-70
  • 參考文獻(xiàn)70-82
  • 符號及縮寫82-83
  • 攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果83-84
  • 致謝84-86

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9 張琰s,

本文編號:1008591


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