本文關鍵詞：基于核酸適配體的17β-雌二醇檢測方法研究

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【摘要】：當下,雌激素污染越來越受到人們的關注。17β-雌二醇是一種雌性活性最為強烈的雌激素。然而,目前針對17β-雌二醇的檢測方法,雖然有較低的檢測限和較好的靈敏度,但是這些方法在一定程度難以滿足實際樣品的現(xiàn)場-實時定量檢測。本論文基于核酸適配體-納米金開發(fā)了三種新型的生物傳感檢測體系來實現(xiàn)對17β-雌二醇的檢測,主要結果如下：(1)共振散射光譜法：利用氯化鈉可控制納米金的聚合程度,再結合共振散射光譜技術構建一種生物傳感器的方法,該方法的檢測限達到1.26 nM,并且應用到牛奶樣品的添加回收實驗中,平均回收率在93.9%～108.3%之間,相對標準偏差在4.6%-6.1%之間；(2)比色法：基于核酸適配體、納米金、陽離子表面活性劑三者之間的相互作用,從而開發(fā)了一種比色傳感器。該方法的檢測限為1.96nM,通過采集自來水和河水進行添加回收實驗,平均回收率在95.3%～115.4%之間,相對標準偏差在2.6%-8.6%之間;(3)熒光法：基于核酸適配體,利用納米金來淬滅羅丹明B的熒光,從而構建了一種類似于信號放大的熒光傳感體系。該方法的檢測限為0.51 nM,另外,通過水溶液中混合樣品的添加回收實驗,得到樣品的添加回收率范圍在94.26%～117.14%之間,相對標準偏差范圍在0.049%～0.73%之間。研究結果表明,本論文開發(fā)的三種新型的生物傳感器具有簡單快速、靈敏度高、特異性好等優(yōu)點,可為進一步實際應用提供理論依據(jù)。
【關鍵詞】：核酸適配體 納米金 共振散射法 比色法 熒光法
【學位授予單位】：上海應用技術學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-5
• abstract5-10
• 第1章 緒論10-17
• 1.1 17β-雌二醇的簡介與危害10-12
• 1.1.1 17β-雌二醇的簡介10
• 1.1.2 17β-雌二醇的危害10-12
• 1.2 17β-雌二醇檢測方法的研究進展12-14
• 1.2.1 傳統(tǒng)檢測法12-13
• 1.2.2 免疫分析法13-14
• 1.2.3 電化學法14
• 1.3 基于核酸適配體-納米金在分析檢測領域中的應用14-16
• 1.3.1 基于核酸適配體-納米金檢測金屬離子15
• 1.3.2 基于核酸適配體-納米金檢測抗生素15-16
• 1.3.3 基于核酸適配體-納米金檢測有機小分子16
• 1.4 研究的目的與意義16-17
• 1.4.1 研究的目的16
• 1.4.2 研究的意義16-17
• 第2章 基于核酸適配體的非標記AuNPs共振散射光譜法檢測17β-雌二醇17-30
• 2.1 引言17-18
• 2.2 實驗材料18-19
• 2.2.1 主要試劑18-19
• 2.2.2 主要儀器19
• 2.3 實驗方法19-21
• 2.3.1 納米金的合成19-20
• 2.3.2 牛奶樣品的前處理20
• 2.3.3 17β-雌二醇的檢測20
• 2.3.4 核酸適配體和AuNPs的表征20-21
• 2.3.5 添加回收實驗21
• 2.4 結果與討論21-29
• 2.4.1 檢測原理21-22
• 2.4.2 圓二色光譜表征22-23
• 2.4.3 透射電子顯微鏡表征23-24
• 2.4.4 檢測條件的優(yōu)化24-26
• 2.4.5 方法的靈敏度26-27
• 2.4.6 方法的特異性27-28
• 2.4.7 牛奶樣品添加回收率檢測28-29
• 2.5 小結29-30
• 第3章 基于核酸適配體的陽離子表面活性劑聚集AuNPs比色法檢測17β-雌二醇30-43
• 3.1 引言30
• 3.2 實驗材料30-32
• 3.2.1 主要試劑30-32
• 3.2.2 主要儀器32
• 3.3 實驗方法32-34
• 3.3.1 納米金的合成32
• 3.3.2 檢測條件的優(yōu)化32-33
• 3.3.3 17β-雌二醇的檢測33
• 3.3.4 核酸適配體、CTAB和AuNPs的表征33-34
• 3.3.5 添加回收實驗34
• 3.4 結果與討論34-42
• 3.4.1 檢測原理34-35
• 3.4.2 圓二色光譜表征35-36
• 3.4.3 透射電子顯微鏡表征36-37
• 3.4.4 檢測條件的優(yōu)化37-39
• 3.4.5 方法的靈敏度39-40
• 3.4.6 方法的特異性40-42
• 3.4.7 添加回收率實驗42
• 3.5 小結42-43
• 第4章 基于核酸適配體的AuNPs淬滅羅丹明B熒光法檢測17β-雌二醇43-57
• 4.1 引言43
• 4.2 實驗材料43-45
• 4.2.1 主要試劑43-45
• 4.2.2 主要儀器45
• 4.3 實驗方法45-47
• 4.3.1 納米金的合成45
• 4.3.2 檢測條件的優(yōu)化45-46
• 4.3.3 17β-雌二醇的檢測46
• 4.3.4 AuNPs的表征46-47
• 4.3.5 添加回收實驗47
• 4.4 結果與討論47-55
• 4.4.1 檢測原理47-48
• 4.4.2 電子透射電鏡表征48-49
• 4.4.3 檢測條件的優(yōu)化49-52
• 4.4.4 方法的靈敏度52-53
• 4.4.5 方法的特異性53-55
• 4.4.6 添加回收率實驗55
• 4.5 小結55-57
• 第5章 總結與展望57-61
• 5.1 研究總結57-59
• 5.1.1 基于核酸適配體的非標記AuNPs共振散射光譜法58
• 5.1.2 基于核酸適配體的陽離子表面活性劑聚集AuNPs比色法58-59
• 5.1.3 基于核酸適配體的AuNPs淬滅羅丹明B熒光法59
• 5.2 創(chuàng)新點59-60
• 5.3 展望60-61
• 參考文獻61-67
• 致謝67-68
• 攻讀學位期間所開展的科研項目和發(fā)表的學術論文68-69

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