本文關(guān)鍵詞：基于核酸適配體的17β-雌二醇檢測(cè)方法研究

  更多相關(guān)文章： 核酸適配體 納米金 共振散射法 比色法 熒光法

【摘要】：當(dāng)下,雌激素污染越來(lái)越受到人們的關(guān)注。17β-雌二醇是一種雌性活性最為強(qiáng)烈的雌激素。然而,目前針對(duì)17β-雌二醇的檢測(cè)方法,雖然有較低的檢測(cè)限和較好的靈敏度,但是這些方法在一定程度難以滿足實(shí)際樣品的現(xiàn)場(chǎng)-實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。本論文基于核酸適配體-納米金開(kāi)發(fā)了三種新型的生物傳感檢測(cè)體系來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)17β-雌二醇的檢測(cè),主要結(jié)果如下：(1)共振散射光譜法：利用氯化鈉可控制納米金的聚合程度,再結(jié)合共振散射光譜技術(shù)構(gòu)建一種生物傳感器的方法,該方法的檢測(cè)限達(dá)到1.26 nM,并且應(yīng)用到牛奶樣品的添加回收實(shí)驗(yàn)中,平均回收率在93.9%～108.3%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.6%-6.1%之間；(2)比色法：基于核酸適配體、納米金、陽(yáng)離子表面活性劑三者之間的相互作用,從而開(kāi)發(fā)了一種比色傳感器。該方法的檢測(cè)限為1.96nM,通過(guò)采集自來(lái)水和河水進(jìn)行添加回收實(shí)驗(yàn),平均回收率在95.3%～115.4%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.6%-8.6%之間;(3)熒光法：基于核酸適配體,利用納米金來(lái)淬滅羅丹明B的熒光,從而構(gòu)建了一種類(lèi)似于信號(hào)放大的熒光傳感體系。該方法的檢測(cè)限為0.51 nM,另外,通過(guò)水溶液中混合樣品的添加回收實(shí)驗(yàn),得到樣品的添加回收率范圍在94.26%～117.14%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍在0.049%～0.73%之間。研究結(jié)果表明,本論文開(kāi)發(fā)的三種新型的生物傳感器具有簡(jiǎn)單快速、靈敏度高、特異性好等優(yōu)點(diǎn),可為進(jìn)一步實(shí)際應(yīng)用提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：核酸適配體 納米金 共振散射法 比色法 熒光法
【學(xué)位授予單位】：上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-5
• abstract5-10
• 第1章 緒論10-17
• 1.1 17β-雌二醇的簡(jiǎn)介與危害10-12
• 1.1.1 17β-雌二醇的簡(jiǎn)介10
• 1.1.2 17β-雌二醇的危害10-12
• 1.2 17β-雌二醇檢測(cè)方法的研究進(jìn)展12-14
• 1.2.1 傳統(tǒng)檢測(cè)法12-13
• 1.2.2 免疫分析法13-14
• 1.2.3 電化學(xué)法14
• 1.3 基于核酸適配體-納米金在分析檢測(cè)領(lǐng)域中的應(yīng)用14-16
• 1.3.1 基于核酸適配體-納米金檢測(cè)金屬離子15
• 1.3.2 基于核酸適配體-納米金檢測(cè)抗生素15-16
• 1.3.3 基于核酸適配體-納米金檢測(cè)有機(jī)小分子16
• 1.4 研究的目的與意義16-17
• 1.4.1 研究的目的16
• 1.4.2 研究的意義16-17
• 第2章 基于核酸適配體的非標(biāo)記AuNPs共振散射光譜法檢測(cè)17β-雌二醇17-30
• 2.1 引言17-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 2.2.1 主要試劑18-19
• 2.2.2 主要儀器19
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法19-21
• 2.3.1 納米金的合成19-20
• 2.3.2 牛奶樣品的前處理20
• 2.3.3 17β-雌二醇的檢測(cè)20
• 2.3.4 核酸適配體和AuNPs的表征20-21
• 2.3.5 添加回收實(shí)驗(yàn)21
• 2.4 結(jié)果與討論21-29
• 2.4.1 檢測(cè)原理21-22
• 2.4.2 圓二色光譜表征22-23
• 2.4.3 透射電子顯微鏡表征23-24
• 2.4.4 檢測(cè)條件的優(yōu)化24-26
• 2.4.5 方法的靈敏度26-27
• 2.4.6 方法的特異性27-28
• 2.4.7 牛奶樣品添加回收率檢測(cè)28-29
• 2.5 小結(jié)29-30
• 第3章 基于核酸適配體的陽(yáng)離子表面活性劑聚集AuNPs比色法檢測(cè)17β-雌二醇30-43
• 3.1 引言30
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料30-32
• 3.2.1 主要試劑30-32
• 3.2.2 主要儀器32
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法32-34
• 3.3.1 納米金的合成32
• 3.3.2 檢測(cè)條件的優(yōu)化32-33
• 3.3.3 17β-雌二醇的檢測(cè)33
• 3.3.4 核酸適配體、CTAB和AuNPs的表征33-34
• 3.3.5 添加回收實(shí)驗(yàn)34
• 3.4 結(jié)果與討論34-42
• 3.4.1 檢測(cè)原理34-35
• 3.4.2 圓二色光譜表征35-36
• 3.4.3 透射電子顯微鏡表征36-37
• 3.4.4 檢測(cè)條件的優(yōu)化37-39
• 3.4.5 方法的靈敏度39-40
• 3.4.6 方法的特異性40-42
• 3.4.7 添加回收率實(shí)驗(yàn)42
• 3.5 小結(jié)42-43
• 第4章 基于核酸適配體的AuNPs淬滅羅丹明B熒光法檢測(cè)17β-雌二醇43-57
• 4.1 引言43
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料43-45
• 4.2.1 主要試劑43-45
• 4.2.2 主要儀器45
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法45-47
• 4.3.1 納米金的合成45
• 4.3.2 檢測(cè)條件的優(yōu)化45-46
• 4.3.3 17β-雌二醇的檢測(cè)46
• 4.3.4 AuNPs的表征46-47
• 4.3.5 添加回收實(shí)驗(yàn)47
• 4.4 結(jié)果與討論47-55
• 4.4.1 檢測(cè)原理47-48
• 4.4.2 電子透射電鏡表征48-49
• 4.4.3 檢測(cè)條件的優(yōu)化49-52
• 4.4.4 方法的靈敏度52-53
• 4.4.5 方法的特異性53-55
• 4.4.6 添加回收率實(shí)驗(yàn)55
• 4.5 小結(jié)55-57
• 第5章 總結(jié)與展望57-61
• 5.1 研究總結(jié)57-59
• 5.1.1 基于核酸適配體的非標(biāo)記AuNPs共振散射光譜法58
• 5.1.2 基于核酸適配體的陽(yáng)離子表面活性劑聚集AuNPs比色法58-59
• 5.1.3 基于核酸適配體的AuNPs淬滅羅丹明B熒光法59
• 5.2 創(chuàng)新點(diǎn)59-60
• 5.3 展望60-61
• 參考文獻(xiàn)61-67
• 致謝67-68
• 攻讀學(xué)位期間所開(kāi)展的科研項(xiàng)目和發(fā)表的學(xué)術(shù)論文68-69

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