本文關(guān)鍵詞：PBDE-209和Cd的聯(lián)合肝毒性效應(yīng)及機(jī)理研究

  更多相關(guān)文章： 十溴聯(lián)苯醚 鎘 肝癌細(xì)胞系 共同暴露 聯(lián)合肝毒性

【摘要】：多溴聯(lián)苯醚和重金屬都是水體、大氣、土壤中檢出率比較高的污染物,二者往往同時(shí)存在于環(huán)境中,呈現(xiàn)共同暴露的狀態(tài)。因此,對(duì)于二者共同暴露是否會(huì)產(chǎn)生更為嚴(yán)重的聯(lián)合毒性需要引起關(guān)注。本文選取了應(yīng)用廣泛的十溴聯(lián)苯醚(PBDE-209)和毒性較大的重金屬鎘(Cd)來研究二者共同暴露所產(chǎn)生的聯(lián)合毒性。采用兩種人肝癌細(xì)胞系,HepG2細(xì)胞和SMMC-7721細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料,研究PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)肝臟細(xì)胞的聯(lián)合毒性效應(yīng)。具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下:1)首先進(jìn)行了PBDE-209和Cd對(duì)人肝癌細(xì)胞系單獨(dú)暴露實(shí)驗(yàn),并用AB法檢測(cè)細(xì)胞活性。發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞對(duì)PBDE-209在考察濃度范圍內(nèi)無明顯濃度依賴性,對(duì)Cd有明顯濃度依賴性。根據(jù)單獨(dú)暴露實(shí)驗(yàn)結(jié)果成功篩選了共同暴露濃度。2)探究了PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞狀態(tài)、線粒體和細(xì)胞膜的毒性效應(yīng)。觀察了共同暴露后細(xì)胞形態(tài)變化。通過MTT法證明共同暴露極可能造成了線粒體損傷。另外,通過檢測(cè)LDH證明,在考察的濃度范圍內(nèi),細(xì)胞膜并沒有明顯損傷,毒性效應(yīng)并不是通過損傷細(xì)胞膜造成的。3)使用JC-1熒光探針檢測(cè)PBDE-209和Cd共同暴露后人肝癌細(xì)胞系的線粒體膜電位變化。結(jié)合MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確定PBDE-209和Cd共同暴露會(huì)造成人肝癌細(xì)胞系線粒體損傷。同時(shí),流式結(jié)果顯示PBDE-209和Cd共同暴露會(huì)引起人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞凋亡。因此,PBDE-209和Cd共同暴露產(chǎn)生的聯(lián)合毒性是通過線粒體通路引起人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞凋亡造成的。4)使用DCFH-DA探針檢測(cè)了PBDE-209和Cd共同暴露后人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞ROS水平的變化。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),兩種污染物共同暴露會(huì)引起人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞ROS水平明顯升高,這說明細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)加劇。ROS水平變化可能是細(xì)胞毒性效應(yīng)的機(jī)制之一,并可能是引起細(xì)胞凋亡的原因之一。
【關(guān)鍵詞】：十溴聯(lián)苯醚 鎘 肝癌細(xì)胞系 共同暴露 聯(lián)合肝毒性
【學(xué)位授予單位】：河北科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：X171.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-19
• 1.1 研究目的及意義9-10
• 1.2 持久性有機(jī)污染物的污染現(xiàn)狀10-11
• 1.3 多溴聯(lián)苯醚簡(jiǎn)介11-12
• 1.4 多溴聯(lián)苯醚毒性研究進(jìn)展12-15
• 1.4.1 對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的毒性效應(yīng)13
• 1.4.2 對(duì)甲狀腺的毒性效應(yīng)13-14
• 1.4.3 對(duì)生殖系統(tǒng)的毒性效應(yīng)14
• 1.4.4 對(duì)免疫系統(tǒng)的毒性效應(yīng)14
• 1.4.5 致癌毒性效應(yīng)14
• 1.4.6 對(duì)肝組織的毒性效應(yīng)14-15
• 1.5 重金屬及鎘污染現(xiàn)狀15-16
• 1.6 重金屬鎘的毒性研究進(jìn)展16
• 1.7 持久性有機(jī)污染物和重金屬共同暴露的研究現(xiàn)狀16-17
• 1.8 研究?jī)?nèi)容及方法17-19
• 第2章 PBDE-209和Cd共同暴露濃度的篩選19-27
• 2.1 材料與方法19-22
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑19
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器19-20
• 2.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)方法20-21
• 2.1.4 Alamar Blue(AB)法檢測(cè)細(xì)胞活性21
• 2.1.5 實(shí)驗(yàn)分析21-22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論22-25
• 2.2.1 PBDE-209和Cd單獨(dú)暴露對(duì)細(xì)胞活性的影響22-24
• 2.2.2 PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)細(xì)胞活性的影響24-25
• 2.3 本章小結(jié)25-27
• 第3章 PBDE-209和Cd共同暴露損傷細(xì)胞情況27-37
• 3.1 材料與方法27-28
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑27
• 3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器27
• 3.1.3 觀察細(xì)胞形態(tài)27
• 3.1.4 MTT法檢測(cè)細(xì)胞線粒體損傷27-28
• 3.1.5 LDH法檢測(cè)細(xì)胞膜損傷28
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論28-34
• 3.2.1 PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響28-32
• 3.2.2 PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)細(xì)胞線粒體的影響32-33
• 3.2.3 PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)細(xì)胞細(xì)胞膜的影響33-34
• 3.3 本章小結(jié)34-37
• 第4章 PBDE-209和Cd共同暴露引起細(xì)胞凋亡37-43
• 4.1 材料與方法37-38
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑37
• 4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器37
• 4.1.3 JC-1檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位37-38
• 4.1.4 流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)38
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論38-41
• 4.2.1 PBDE-209和Cd共同暴露引起細(xì)胞線粒體膜電位變化38-39
• 4.2.2 PBDE-209和Cd共同暴露引起細(xì)胞凋亡39-41
• 4.3 本章小結(jié)41-43
• 第5章 PBDE-209和Cd共同暴露影響細(xì)胞ROS水平43-48
• 5.1 材料與方法43-44
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑43
• 5.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器43
• 5.1.3 細(xì)胞ROS水平檢測(cè)43-44
• 5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論44-46
• 5.3 本章小結(jié)46-48
• 結(jié)論48-50
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 攻讀碩士學(xué)位期間所發(fā)表的論文54-56
• 致謝56

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