本文關鍵詞：PBDE-209和Cd的聯(lián)合肝毒性效應及機理研究

  更多相關文章： 十溴聯(lián)苯醚 鎘 肝癌細胞系 共同暴露 聯(lián)合肝毒性

【摘要】：多溴聯(lián)苯醚和重金屬都是水體、大氣、土壤中檢出率比較高的污染物,二者往往同時存在于環(huán)境中,呈現共同暴露的狀態(tài)。因此,對于二者共同暴露是否會產生更為嚴重的聯(lián)合毒性需要引起關注。本文選取了應用廣泛的十溴聯(lián)苯醚(PBDE-209)和毒性較大的重金屬鎘(Cd)來研究二者共同暴露所產生的聯(lián)合毒性。采用兩種人肝癌細胞系,HepG2細胞和SMMC-7721細胞作為實驗材料,研究PBDE-209和Cd共同暴露對肝臟細胞的聯(lián)合毒性效應。具體研究內容和結論如下:1)首先進行了PBDE-209和Cd對人肝癌細胞系單獨暴露實驗,并用AB法檢測細胞活性。發(fā)現兩種細胞對PBDE-209在考察濃度范圍內無明顯濃度依賴性,對Cd有明顯濃度依賴性。根據單獨暴露實驗結果成功篩選了共同暴露濃度。2)探究了PBDE-209和Cd共同暴露對人肝癌細胞系細胞狀態(tài)、線粒體和細胞膜的毒性效應。觀察了共同暴露后細胞形態(tài)變化。通過MTT法證明共同暴露極可能造成了線粒體損傷。另外,通過檢測LDH證明,在考察的濃度范圍內,細胞膜并沒有明顯損傷,毒性效應并不是通過損傷細胞膜造成的。3)使用JC-1熒光探針檢測PBDE-209和Cd共同暴露后人肝癌細胞系的線粒體膜電位變化。結合MTT實驗結果,確定PBDE-209和Cd共同暴露會造成人肝癌細胞系線粒體損傷。同時,流式結果顯示PBDE-209和Cd共同暴露會引起人肝癌細胞系細胞凋亡。因此,PBDE-209和Cd共同暴露產生的聯(lián)合毒性是通過線粒體通路引起人肝癌細胞系細胞凋亡造成的。4)使用DCFH-DA探針檢測了PBDE-209和Cd共同暴露后人肝癌細胞系細胞ROS水平的變化。實驗發(fā)現,兩種污染物共同暴露會引起人肝癌細胞系細胞ROS水平明顯升高,這說明細胞內氧化應激反應加劇。ROS水平變化可能是細胞毒性效應的機制之一,并可能是引起細胞凋亡的原因之一。
【關鍵詞】：十溴聯(lián)苯醚 鎘 肝癌細胞系 共同暴露 聯(lián)合肝毒性
【學位授予單位】：河北科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：X171.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-19
• 1.1 研究目的及意義9-10
• 1.2 持久性有機污染物的污染現狀10-11
• 1.3 多溴聯(lián)苯醚簡介11-12
• 1.4 多溴聯(lián)苯醚毒性研究進展12-15
• 1.4.1 對神經系統(tǒng)的毒性效應13
• 1.4.2 對甲狀腺的毒性效應13-14
• 1.4.3 對生殖系統(tǒng)的毒性效應14
• 1.4.4 對免疫系統(tǒng)的毒性效應14
• 1.4.5 致癌毒性效應14
• 1.4.6 對肝組織的毒性效應14-15
• 1.5 重金屬及鎘污染現狀15-16
• 1.6 重金屬鎘的毒性研究進展16
• 1.7 持久性有機污染物和重金屬共同暴露的研究現狀16-17
• 1.8 研究內容及方法17-19
• 第2章 PBDE-209和Cd共同暴露濃度的篩選19-27
• 2.1 材料與方法19-22
• 2.1.1 實驗材料與試劑19
• 2.1.2 主要實驗儀器19-20
• 2.1.3 細胞培養(yǎng)方法20-21
• 2.1.4 Alamar Blue(AB)法檢測細胞活性21
• 2.1.5 實驗分析21-22
• 2.2 實驗結果與討論22-25
• 2.2.1 PBDE-209和Cd單獨暴露對細胞活性的影響22-24
• 2.2.2 PBDE-209和Cd共同暴露對細胞活性的影響24-25
• 2.3 本章小結25-27
• 第3章 PBDE-209和Cd共同暴露損傷細胞情況27-37
• 3.1 材料與方法27-28
• 3.1.1 實驗材料與試劑27
• 3.1.2 主要實驗儀器27
• 3.1.3 觀察細胞形態(tài)27
• 3.1.4 MTT法檢測細胞線粒體損傷27-28
• 3.1.5 LDH法檢測細胞膜損傷28
• 3.2 實驗結果與討論28-34
• 3.2.1 PBDE-209和Cd共同暴露對細胞形態(tài)的影響28-32
• 3.2.2 PBDE-209和Cd共同暴露對細胞線粒體的影響32-33
• 3.2.3 PBDE-209和Cd共同暴露對細胞細胞膜的影響33-34
• 3.3 本章小結34-37
• 第4章 PBDE-209和Cd共同暴露引起細胞凋亡37-43
• 4.1 材料與方法37-38
• 4.1.1 實驗材料與試劑37
• 4.1.2 主要實驗儀器37
• 4.1.3 JC-1檢測細胞線粒體膜電位37-38
• 4.1.4 流式細胞凋亡檢測38
• 4.2 實驗結果與討論38-41
• 4.2.1 PBDE-209和Cd共同暴露引起細胞線粒體膜電位變化38-39
• 4.2.2 PBDE-209和Cd共同暴露引起細胞凋亡39-41
• 4.3 本章小結41-43
• 第5章 PBDE-209和Cd共同暴露影響細胞ROS水平43-48
• 5.1 材料與方法43-44
• 5.1.1 實驗材料與試劑43
• 5.1.2 主要實驗儀器43
• 5.1.3 細胞ROS水平檢測43-44
• 5.2 實驗結果與討論44-46
• 5.3 本章小結46-48
• 結論48-50
• 參考文獻50-54
• 攻讀碩士學位期間所發(fā)表的論文54-56
• 致謝56

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