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基于核酸適配體的水中重金屬檢測(cè)技術(shù)條件優(yōu)化及適用性研究

發(fā)布時(shí)間:2025-01-10 23:14
  重金屬在地殼和水環(huán)境中分布廣泛,在自然狀況下,微量的重金屬一般不會(huì)對(duì)人類健康造成影響。但近些年,隨著人類社會(huì)的發(fā)展,重金屬被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、醫(yī)藥等領(lǐng)域,人為的造成大量重金屬進(jìn)入環(huán)境,使得環(huán)境受到污染。重金屬污染的主要特點(diǎn)是可以在環(huán)境中通過食物鏈富集,只能轉(zhuǎn)移,而不能被降解。對(duì)環(huán)境中重金屬的監(jiān)測(cè)已經(jīng)引起廣泛的關(guān)注。 常用的重金屬檢測(cè)傳統(tǒng)方法有原子發(fā)射光譜法、原子吸收光譜法、紫外-可見分光光度法、原子熒光法、質(zhì)譜法等。這些傳統(tǒng)檢測(cè)方法對(duì)操作人員專業(yè)性要求較高,設(shè)備大,不便攜。而近些年發(fā)展起來的基于重金屬核酸探針的生物傳感器技術(shù),具有響應(yīng)快速,操作方便等優(yōu)點(diǎn),因而具有很好的應(yīng)用前景。 本論文基于核酸適配體能夠與重金屬離子特異性結(jié)合,利用核酸適配體(aptamer)和核酸染料SYBR Green I構(gòu)建了生物傳感體系,對(duì)水中重金屬離子Ag+和Hg2+進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,對(duì)適用性進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容如下: (1)胞嘧啶-胞嘧啶(C-C)/胸腺嘧啶-胸腺嘧啶(T-T)錯(cuò)配堿基對(duì)在有Ag+/Hg2+存在時(shí),能夠特異性的形成穩(wěn)定的C-Ag+-C/T-Hg2+-T復(fù)合物。當(dāng)反應(yīng)體系...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1SELEX技術(shù)篩選過程

圖1.1SELEX技術(shù)篩選過程

SELEX技術(shù)通過特定的分離手段從寡核苷酸文庫排除弱親和力或非特異性序列,結(jié)合PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)高親和力的寡核苷酸序列進(jìn)行逐級(jí)指數(shù)放大富集。SELEX技術(shù)的步驟如圖1.1所示:


圖1.2熒光的產(chǎn)生Fig.1.2Theprogressoffluorescenceoccure

圖1.2熒光的產(chǎn)生Fig.1.2Theprogressoffluorescenceoccure

這些激發(fā)態(tài)的分子又是不穩(wěn)定的,通過無輻射躍遷和輻射躍遷兩種方式釋放返回基態(tài)。其中由輻射躍遷過程產(chǎn)生熒光。熒光的產(chǎn)生過程如圖1.2所示:的熒光,P為產(chǎn)生的磷光,S0、S1及S2分別代表不同的能級(jí)。


圖2.1Ag+檢測(cè)機(jī)理Fig.2.1ThemechanismofAg+detection

圖2.1Ag+檢測(cè)機(jī)理Fig.2.1ThemechanismofAg+detection

圖2.1Ag+檢測(cè)機(jī)理Fig.2.1ThemechanismofAg+detection征手段熒光發(fā)射光譜表征表征機(jī)理


圖2.2加入Ag+前后SSO溶液熒光光譜圖

圖2.2加入Ag+前后SSO溶液熒光光譜圖

圖2.2加入Ag+前后SSO溶液熒光光譜圖Fig.2.2FluorescencespectraofsolutionofSSOinthepresenceandabsence明SSO對(duì)銀離子的特異性,實(shí)驗(yàn)中用另外一條DNA鏈作為對(duì)比TTTTT....



本文編號(hào):4025574

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