近年來,我國沿海海域環(huán)境有逐漸惡化的趨勢,重金屬、有機及無機污染日趨嚴重。厚殼貽貝是浙江舟山海域重要的特色經(jīng)濟貝類,具有較高的經(jīng)濟價值和營養(yǎng)價值。作為一種濾食附著生存的生物,厚殼貽貝對海洋環(huán)境中的污染物具有很強的生物富集作用。一方面貝類富集的重金屬和持久性有機物可通過食物鏈傳遞,進而對人體造成傷害;另一方面當富集超標時,對厚殼貽貝自身也會造成傷害,以致抗病力減弱,病害頻發(fā)。深入了解厚殼貽貝響應外界環(huán)境刺激的應激機制,篩選抗逆分子靶標,可為厚殼貽貝抗逆育種提供理論支持,對厚殼貽貝產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展意義重大。鑒于細胞色素P450超家族是一種亞鐵血紅素-硫醇鹽蛋白,在內源性化合物的生物合成和外源性物質的代謝轉化中起著關鍵作用,本研究克隆了厚殼貽貝CYP450家族重要成員CYP3A的兩個亞型:McCYP3A1和McCYP3A2,鑒定了其分子特征,分析了McCYP3A1和McCYP3A2在鎘和苯并芘單一及復合暴露下的時空表達模式。同時分析了鎘和苯并芘單一及復合暴露下厚殼貽貝脂質過氧化水平（通過測定丙二醛MDA含量）以及抗氧化酶系統(tǒng)包括超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）的抗氧化反應。主要研... 

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文獻綜述
    1.1 厚殼貽貝及其養(yǎng)殖現(xiàn)狀
    1.2 主要海洋污染物及相關研究進展
        1.2.1 海洋重金屬污染
        1.2.2 海洋有機物污染
        1.2.3 重金屬有機物污染的相關研究
    1.3 細胞色素P450 的結構和功能
        1.3.1 細胞色素P450 的結構特征
        1.3.2 細胞色素P450 的功能
    1.4 細胞色素P4503A
    1.5 抗氧化防御系統(tǒng)
        1.5.1 超氧化物歧化酶(SOD)
        1.5.2 過氧化氫酶(CAT)
        1.5.3 脂質過氧化(LPO)與丙二醛(MDA)
    1.6 研究目的和意義
第二章 厚殼貽貝CYP3A基因CDNA克隆
    2.1 實驗材料
        2.1.1 樣品材料
        2.1.2 實驗試劑及儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 總RNA的提取與質量檢測
        2.2.2 逆轉錄合成cDNA
        2.2.3 厚殼貽貝CYP3A核心序列擴增
        2.2.4 PCR產(chǎn)物的鑒定和膠回收
        2.2.5 生物信息學分析
    2.3 結果與討論
        2.3.1 厚殼貽貝基因克隆及分子特征分析
        2.3.2 厚殼貽貝系統(tǒng)進化樹分析
第三章 厚殼貽貝CYP3A基因在苯并芘和鎘暴露下在鰓和消化腺組織的表達模式
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗樣品
        3.1.2 實驗儀器及試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 苯并芘脅迫
        3.2.2 重金屬鎘脅迫
        3.2.3 RNA的提取與cDNA的合成
        3.2.4 熒光定量PCR
        3.2.5 數(shù)據(jù)分析
    3.3 實驗結果
        3.3.1 厚殼貽貝CYP3A基因在鰓組織的表達模式
        3.3.2 厚殼貽貝CYP3A基因在消化腺組織的表達模式
    3.4 討論
第四章 苯并芘和鎘暴露對厚殼貽貝鰓和消化腺組織抗氧化系統(tǒng)的影響
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗樣品
        4.1.2 實驗儀器和試劑
        4.1.3 樣品制備
    4.2 解毒代謝指標測定方法
    4.3 數(shù)據(jù)處理和分析
    4.4 實驗結果
        4.4.1 厚殼貽貝鰓組織SOD,CAT活力及MDA含量的影響
        4.4.2 厚殼貽貝消化腺組織SOD,CAT活力及MDA含量的影響
    4.5 討論
結論
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學術論文及研究成果
附錄


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]鎘、銅分別脅迫蝦夷扇貝的毒性作用機制研究[D]. 孟曉林.中國科學院研究生院（海洋研究所） 2013
[2]幾種重金屬和有機污染物對文蛤Meretrxi meretrix生態(tài)毒理效應的研究[D]. 王清.中國科學院研究生院（海洋研究所） 2010

碩士論文
[1]重金屬與苯并芘在貽貝體內的復合毒性效應[D]. 張翼飛.浙江大學 2017
[2]汞和鎘對紫貽貝（Mytilus edulis）的單一與聯(lián)合作用效應[D]. 潘京津.中國海洋大學 2015
[3]多環(huán)芳烴化合物對櫛孔扇貝致毒機理的研究[D]. 苗晶晶.中國海洋大學 2006



本文編號：3710094