深圳海域赤潮水樣溶藻菌的分離鑒定及Arenibacter sp.6A1溶藻活性物質(zhì)的研究
發(fā)布時(shí)間:2022-05-08 10:09
近年來,有害赤潮的頻繁爆發(fā)破壞了海洋生態(tài)平衡,嚴(yán)重影響了人類生產(chǎn)與生活。海洋赤潮的預(yù)防與控制是當(dāng)前的世界性難題。綠色環(huán)保的生物防治法被認(rèn)為是目前具有較好發(fā)展前景的赤潮防治方法之一。本文從深圳南澳東山碼頭采集赤潮水樣,從中成功分離獲得41個(gè)菌株,包括34株細(xì)菌,7株放線菌,所有菌株都利用16s rDNA鑒定了菌屬。從中篩選出具有血紅哈卡藻溶藻活性的菌株25株,1%體積比下殺藻活性達(dá)到90%以上的菌株3株。對(duì)其中一株Arenibacter sp.6A1進(jìn)行溶藻活性物質(zhì)分析,將其放大發(fā)酵后用乙酸乙酯萃取,最終分離純化獲得6個(gè)主成分化合物,分別為胸腺嘧啶(1)、環(huán)脯氨酸-酪氨酸-二肽(2)、尿嘧啶(3)、吡咯-2-羧酸(4)、對(duì)羥基苯甲酸(5)、鄰氨基苯甲酸(6);進(jìn)一步將六個(gè)化合物及其衍生物對(duì)三種常見赤潮藻進(jìn)行溶藻活性檢測(cè),發(fā)現(xiàn)吡咯-2-羧酸(4)對(duì)血紅哈卡藻、塔瑪亞歷山大藻和卡盾藻都有具有較好的溶藻活性,EC50分別為30.4μg·mL-1、40.2μg·mL-1、57.8μg·mL-1;pH對(duì)吡咯-2...
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 前言
1.2 赤潮研究進(jìn)展
1.2.1 赤潮概況
1.2.2 赤潮微藻的種類
1.2.3 溶藻菌的定義
1.2.4 溶藻菌的分類
1.2.5 溶藻菌的作用方式
1.2.6 溶藻菌的應(yīng)用
1.2.7 溶藻活性物質(zhì)的種類
1.2.8 溶藻活性物質(zhì)的作用機(jī)理
1.3 課題主要研究內(nèi)容及技術(shù)路線
第二章 實(shí)驗(yàn)方法與材料
2.1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料與試劑
2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
2.1.3 培養(yǎng)基及試劑的配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法與流程
2.2.1 菌株與藻種來源及培養(yǎng)方法
2.2.2 赤潮水樣菌種分離及鑒定
2.2.3 菌種溶藻活性初篩及成分分析
2.2.4 6A1溶藻活性物質(zhì)分析
2.2.5 6A1放大發(fā)酵及萃取
2.2.6 乙酸乙酯層主成分的分離純化與鑒定
2.2.7 化合物及其衍生物對(duì)三株赤潮藻的溶藻活性
2.2.8 pH對(duì)吡咯-2-羧酸溶藻效率的影響
2.2.9 吡咯-2-羧酸對(duì)三種赤潮藻形態(tài)的影響
2.2.10 吡咯-2-羧酸的其它生物學(xué)活性
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 菌種分離與鑒定
3.2 溶藻菌溶藻活性評(píng)價(jià)及成分分析
3.2.1 菌株溶藻活性及溶藻菌活性評(píng)價(jià)
3.2.2 溶藻菌成分分析及活性檢測(cè)
3.3 6A1溶藻活性物質(zhì)分析
3.4 乙酸乙酯層主成分分離及鑒定
3.4.1 乙酸乙酯層主成分分離
3.4.2 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
3.5 化合物及其衍生物對(duì)三株赤潮藻的溶藻活性檢測(cè)
3.6 pH對(duì)吡咯-2-羧酸溶藻效率的影響
3.7 吡咯-2羧酸對(duì)三種赤潮藻形態(tài)的影響
3.8 吡咯-2-羧酸的其它生物學(xué)活性
3.8.1 抗臨床致病細(xì)菌活性
3.8.2 抗植物致病真菌活性
3.8.3 對(duì)淡水藍(lán)藻(銅綠微囊藻)的溶藻活性
第四章 結(jié)論和討論
4.1 菌種分離、鑒定與活性初篩
4.2 Arenibactersp.6A1溶藻活性物質(zhì)的研究
4.3 吡咯-2-羧酸對(duì)三株赤潮藻細(xì)胞形態(tài)的影響
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蕁麻根水煎液化學(xué)成分研究(英文)[J]. 王夢(mèng)月,馮曉茹,張澄沁,陳珺,劉恩佳,孫立昂,李曉波. Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences. 2016(10)
[2]藻毒素的生物降解研究進(jìn)展[J]. 包子云,王沛芳,錢進(jìn),喬旭. 長江科學(xué)院院報(bào). 2015(05)
[3]青霉菌I09F 484抗菌活性物質(zhì)研究[J]. 劉玉鳳,甘茂羅,楊延輝,劉憶霜,關(guān)艷,肖春玲. 中國藥學(xué)雜志. 2014(08)
[4]赤潮過程中“藻-菌”關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 周進(jìn),陳國福,朱小山,陳璐,蔡中華. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2014(02)
[5]中國海域赤潮發(fā)生趨勢(shì)的年際變化[J]. 張青田. 中國環(huán)境監(jiān)測(cè). 2013(05)
[6]鏈霉菌YIM 245次生代謝產(chǎn)物的研究[J]. 靳榮線,曹艷茹,苗翠蘋,李文均,姜怡,吳少華. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2012(S1)
[7]廈門海域2011年中肋骨條藻和血紅哈卡藻赤潮期間細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變化[J]. 李祎,楊彩云,李東,田蘊(yùn),鄭天凌. 微生物學(xué)報(bào). 2012(10)
[8]赤潮微藻海洋卡盾藻研究[J]. 安鑫龍,么強(qiáng),李雪梅. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(32)
[9]我國赤潮的成因和防治[J]. 張蕾. 江蘇教育學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(04)
[10]南極海單胞菌BSw10005發(fā)酵液化學(xué)成分的研究[J]. 高海鋒,張道敬,魏鴻剛,沈國敏,陳波,李元廣. 中國海洋藥物. 2008(02)
碩士論文
[1]海洋弧菌S-9801次級(jí)代謝產(chǎn)物抑藻作用及作用機(jī)制研究[D]. 牛燕.青島科技大學(xué) 2009
本文編號(hào):3651458
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 前言
1.2 赤潮研究進(jìn)展
1.2.1 赤潮概況
1.2.2 赤潮微藻的種類
1.2.3 溶藻菌的定義
1.2.4 溶藻菌的分類
1.2.5 溶藻菌的作用方式
1.2.6 溶藻菌的應(yīng)用
1.2.7 溶藻活性物質(zhì)的種類
1.2.8 溶藻活性物質(zhì)的作用機(jī)理
1.3 課題主要研究內(nèi)容及技術(shù)路線
第二章 實(shí)驗(yàn)方法與材料
2.1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料與試劑
2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
2.1.3 培養(yǎng)基及試劑的配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法與流程
2.2.1 菌株與藻種來源及培養(yǎng)方法
2.2.2 赤潮水樣菌種分離及鑒定
2.2.3 菌種溶藻活性初篩及成分分析
2.2.4 6A1溶藻活性物質(zhì)分析
2.2.5 6A1放大發(fā)酵及萃取
2.2.6 乙酸乙酯層主成分的分離純化與鑒定
2.2.7 化合物及其衍生物對(duì)三株赤潮藻的溶藻活性
2.2.8 pH對(duì)吡咯-2-羧酸溶藻效率的影響
2.2.9 吡咯-2-羧酸對(duì)三種赤潮藻形態(tài)的影響
2.2.10 吡咯-2-羧酸的其它生物學(xué)活性
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 菌種分離與鑒定
3.2 溶藻菌溶藻活性評(píng)價(jià)及成分分析
3.2.1 菌株溶藻活性及溶藻菌活性評(píng)價(jià)
3.2.2 溶藻菌成分分析及活性檢測(cè)
3.3 6A1溶藻活性物質(zhì)分析
3.4 乙酸乙酯層主成分分離及鑒定
3.4.1 乙酸乙酯層主成分分離
3.4.2 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
3.5 化合物及其衍生物對(duì)三株赤潮藻的溶藻活性檢測(cè)
3.6 pH對(duì)吡咯-2-羧酸溶藻效率的影響
3.7 吡咯-2羧酸對(duì)三種赤潮藻形態(tài)的影響
3.8 吡咯-2-羧酸的其它生物學(xué)活性
3.8.1 抗臨床致病細(xì)菌活性
3.8.2 抗植物致病真菌活性
3.8.3 對(duì)淡水藍(lán)藻(銅綠微囊藻)的溶藻活性
第四章 結(jié)論和討論
4.1 菌種分離、鑒定與活性初篩
4.2 Arenibactersp.6A1溶藻活性物質(zhì)的研究
4.3 吡咯-2-羧酸對(duì)三株赤潮藻細(xì)胞形態(tài)的影響
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蕁麻根水煎液化學(xué)成分研究(英文)[J]. 王夢(mèng)月,馮曉茹,張澄沁,陳珺,劉恩佳,孫立昂,李曉波. Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences. 2016(10)
[2]藻毒素的生物降解研究進(jìn)展[J]. 包子云,王沛芳,錢進(jìn),喬旭. 長江科學(xué)院院報(bào). 2015(05)
[3]青霉菌I09F 484抗菌活性物質(zhì)研究[J]. 劉玉鳳,甘茂羅,楊延輝,劉憶霜,關(guān)艷,肖春玲. 中國藥學(xué)雜志. 2014(08)
[4]赤潮過程中“藻-菌”關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 周進(jìn),陳國福,朱小山,陳璐,蔡中華. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2014(02)
[5]中國海域赤潮發(fā)生趨勢(shì)的年際變化[J]. 張青田. 中國環(huán)境監(jiān)測(cè). 2013(05)
[6]鏈霉菌YIM 245次生代謝產(chǎn)物的研究[J]. 靳榮線,曹艷茹,苗翠蘋,李文均,姜怡,吳少華. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2012(S1)
[7]廈門海域2011年中肋骨條藻和血紅哈卡藻赤潮期間細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變化[J]. 李祎,楊彩云,李東,田蘊(yùn),鄭天凌. 微生物學(xué)報(bào). 2012(10)
[8]赤潮微藻海洋卡盾藻研究[J]. 安鑫龍,么強(qiáng),李雪梅. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(32)
[9]我國赤潮的成因和防治[J]. 張蕾. 江蘇教育學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(04)
[10]南極海單胞菌BSw10005發(fā)酵液化學(xué)成分的研究[J]. 高海鋒,張道敬,魏鴻剛,沈國敏,陳波,李元廣. 中國海洋藥物. 2008(02)
碩士論文
[1]海洋弧菌S-9801次級(jí)代謝產(chǎn)物抑藻作用及作用機(jī)制研究[D]. 牛燕.青島科技大學(xué) 2009
本文編號(hào):3651458
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