嗜熱復(fù)合菌群高效降解偶氮染料的機(jī)制解析
發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 13:14
本研究以先前篩選構(gòu)建的一組能有效脫色降解偶氮染料的嗜熱復(fù)合菌群為研究對(duì)象,考察了環(huán)境因素對(duì)該菌群脫色降解的影響,并采用紫外光譜(UV-Vis)、傅里葉紅外光譜(FTIR)及液質(zhì)二級(jí)連用(HPLC-MS/MS)等技術(shù)對(duì)直接黑G(DBG)的降解中間產(chǎn)物進(jìn)行了分析,由此推理出了一條DBG可能的降解途徑。此外,為闡明該復(fù)合菌群的微生物多樣性及關(guān)鍵功能菌,采用梯度稀釋法并監(jiān)測(cè)不同稀釋梯度下偶氮染料脫色降解的關(guān)鍵指標(biāo),確定復(fù)合菌群實(shí)現(xiàn)偶氮染料脫色降解的臨界梯度,在此基礎(chǔ)上結(jié)合聚合酶鏈反應(yīng)-變性梯度凝膠電泳(PCR-DGGE)及高通量測(cè)序技術(shù)(HTST)對(duì)不同稀釋度下的樣品進(jìn)行測(cè)序分析。最后結(jié)合宏基因組測(cè)序技術(shù),解析菌群失去染料脫色降解功能前后的差異基因,進(jìn)而為偶氮染料廢水的高效生物處理提供一定的理論研究依據(jù)。本研究的主要結(jié)論如下:(1)嗜熱復(fù)合菌群脫色降解特性研究結(jié)果顯示:該菌群脫色降解較佳條件為:溫度55℃、初始pH208.0;染料濃度為200-60020mg/L時(shí),嗜熱復(fù)合菌群對(duì)DBG的脫色率都很高,培養(yǎng)2420h均可達(dá)到96%以上;NaCl的濃度為5%時(shí),培養(yǎng)4820h后的脫色率可達(dá)88%以...
【文章來(lái)源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 緒論
1.1 偶氮染料及偶氮染料廢水的危害
1.2 偶氮染料的處理方法
1.3 偶氮染料廢水的微生物處理
1.3.1 降解偶氮染料的微生物
1.3.2 偶氮染料脫色降解的影響因素
1.3.3 偶氮染料脫色降解相關(guān)酶
1.3.4 基因工程菌的研究
1.3.5 偶氮染料降解菌的群落結(jié)構(gòu)分析
1.3.6 偶氮染料降解代謝途徑及機(jī)理研究
1.4 課題來(lái)源、研究目的及意義
1.4.1 課題來(lái)源
1.4.2 研究目的及意義
1.4.3 研究技術(shù)路線(xiàn)
第二章 嗜熱復(fù)合菌群的脫色降解特性研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 菌種來(lái)源
2.1.2 脫色培養(yǎng)基
2.1.3 主要試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 脫色率的測(cè)定
2.3.2 染料濃度的測(cè)定
2.3.3 不同因素對(duì)偶氮染料脫色降解的影響
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 DBG的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
2.4.2 溫度對(duì)脫色的影響
2.4.3 pH對(duì)脫色的影響
2.4.4 初始染料濃度對(duì)脫色的影響
2.4.5 偶氮染料結(jié)構(gòu)對(duì)脫色的影響
2.4.6 鹽度對(duì)脫色的影響
2.5 本章小結(jié)
第三章 嗜熱復(fù)合菌群對(duì)DBG的脫色降解途徑研究
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 菌種來(lái)源
3.1.2 脫色培養(yǎng)基
3.1.3 主要試劑
3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 不同時(shí)間脫色液的紫外-可見(jiàn)光譜掃描
3.3.2 紅外光譜掃描分析
3.3.3 HPLC-MS/MS分析
3.3.4 DBG脫色產(chǎn)物的植物毒理測(cè)定
3.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 紫外-可見(jiàn)光譜掃描分析
3.4.2 紅外光譜掃描分析
3.4.3 LC-MS/MS分析
3.4.4 嗜熱復(fù)合菌群對(duì)DBG脫色降解途徑研究
3.4.5 DBG脫色產(chǎn)物的植物毒理測(cè)定
3.5 本章小結(jié)
第四章 嗜熱復(fù)合菌群結(jié)構(gòu)及關(guān)鍵降解菌分析
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 菌種來(lái)源
4.1.2 脫色培養(yǎng)基
4.1.3 主要試劑
4.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 稀釋梯度法確定脫色降解臨界點(diǎn)
4.3.2 DNA的提取及濃度檢測(cè)
4.3.3 16S V3區(qū)PCR擴(kuò)增
4.3.4 DGGE技術(shù)操作
4.3.5 高通量測(cè)序
4.3.6 基因序列登錄號(hào)
4.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 復(fù)合菌群脫色降解稀釋臨界點(diǎn)的確定
4.4.2 基因組DNA濃度檢測(cè)
4.4.3 16S V3區(qū)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)
4.4.4 變性梯度凝膠電泳(DGGE)
4.4.5 高通量測(cè)序技術(shù)研究不同稀釋梯度下微生物群落結(jié)構(gòu)的變化
4.4.6 結(jié)果與討論
4.5 本章小結(jié)
第五章 染料降解稀釋臨界點(diǎn)前后關(guān)鍵差異基因解析
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 測(cè)序樣品來(lái)源
5.1.2 主要試劑
5.2 實(shí)驗(yàn)儀器
5.3 實(shí)驗(yàn)方法
5.3.1 宏基因組測(cè)序
5.3.2 熒光定量PCR(qPCR)測(cè)定差異基因的表達(dá)量
5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5.4.1 宏基因組測(cè)序結(jié)果
5.4.2 qPCR測(cè)定差異基因的表達(dá)量
5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
6.1 結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷
Ⅰ.發(fā)表論文情況
Ⅱ.主要獲獎(jiǎng)情況
附錄1
本文編號(hào):3177366
【文章來(lái)源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 緒論
1.1 偶氮染料及偶氮染料廢水的危害
1.2 偶氮染料的處理方法
1.3 偶氮染料廢水的微生物處理
1.3.1 降解偶氮染料的微生物
1.3.2 偶氮染料脫色降解的影響因素
1.3.3 偶氮染料脫色降解相關(guān)酶
1.3.4 基因工程菌的研究
1.3.5 偶氮染料降解菌的群落結(jié)構(gòu)分析
1.3.6 偶氮染料降解代謝途徑及機(jī)理研究
1.4 課題來(lái)源、研究目的及意義
1.4.1 課題來(lái)源
1.4.2 研究目的及意義
1.4.3 研究技術(shù)路線(xiàn)
第二章 嗜熱復(fù)合菌群的脫色降解特性研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 菌種來(lái)源
2.1.2 脫色培養(yǎng)基
2.1.3 主要試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 脫色率的測(cè)定
2.3.2 染料濃度的測(cè)定
2.3.3 不同因素對(duì)偶氮染料脫色降解的影響
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 DBG的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
2.4.2 溫度對(duì)脫色的影響
2.4.3 pH對(duì)脫色的影響
2.4.4 初始染料濃度對(duì)脫色的影響
2.4.5 偶氮染料結(jié)構(gòu)對(duì)脫色的影響
2.4.6 鹽度對(duì)脫色的影響
2.5 本章小結(jié)
第三章 嗜熱復(fù)合菌群對(duì)DBG的脫色降解途徑研究
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 菌種來(lái)源
3.1.2 脫色培養(yǎng)基
3.1.3 主要試劑
3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 不同時(shí)間脫色液的紫外-可見(jiàn)光譜掃描
3.3.2 紅外光譜掃描分析
3.3.3 HPLC-MS/MS分析
3.3.4 DBG脫色產(chǎn)物的植物毒理測(cè)定
3.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 紫外-可見(jiàn)光譜掃描分析
3.4.2 紅外光譜掃描分析
3.4.3 LC-MS/MS分析
3.4.4 嗜熱復(fù)合菌群對(duì)DBG脫色降解途徑研究
3.4.5 DBG脫色產(chǎn)物的植物毒理測(cè)定
3.5 本章小結(jié)
第四章 嗜熱復(fù)合菌群結(jié)構(gòu)及關(guān)鍵降解菌分析
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 菌種來(lái)源
4.1.2 脫色培養(yǎng)基
4.1.3 主要試劑
4.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 稀釋梯度法確定脫色降解臨界點(diǎn)
4.3.2 DNA的提取及濃度檢測(cè)
4.3.3 16S V3區(qū)PCR擴(kuò)增
4.3.4 DGGE技術(shù)操作
4.3.5 高通量測(cè)序
4.3.6 基因序列登錄號(hào)
4.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 復(fù)合菌群脫色降解稀釋臨界點(diǎn)的確定
4.4.2 基因組DNA濃度檢測(cè)
4.4.3 16S V3區(qū)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)
4.4.4 變性梯度凝膠電泳(DGGE)
4.4.5 高通量測(cè)序技術(shù)研究不同稀釋梯度下微生物群落結(jié)構(gòu)的變化
4.4.6 結(jié)果與討論
4.5 本章小結(jié)
第五章 染料降解稀釋臨界點(diǎn)前后關(guān)鍵差異基因解析
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 測(cè)序樣品來(lái)源
5.1.2 主要試劑
5.2 實(shí)驗(yàn)儀器
5.3 實(shí)驗(yàn)方法
5.3.1 宏基因組測(cè)序
5.3.2 熒光定量PCR(qPCR)測(cè)定差異基因的表達(dá)量
5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5.4.1 宏基因組測(cè)序結(jié)果
5.4.2 qPCR測(cè)定差異基因的表達(dá)量
5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
6.1 結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷
Ⅰ.發(fā)表論文情況
Ⅱ.主要獲獎(jiǎng)情況
附錄1
本文編號(hào):3177366
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