【摘要】：隨著經(jīng)濟的發(fā)展,全球化學(xué)品的產(chǎn)量和使用量日漸增加。因此,大量的化學(xué)品不可避免的通過各種途徑進入到自然水體中,對人類和野生動物的健康造成潛在的威脅。因此,本研究以斑馬魚胚胎為實驗?zāi)Ｐ?基于斑馬魚生長激素/胰島素樣生長因子(growth hormone/insulin-like growth factors,GH/IGFs)軸上的19個基因,建立了斑馬魚胚胎/仔魚的GH/IGFs軸基因表達譜,研究了典型重金屬類和阻燃劑類環(huán)境污染物的發(fā)育毒性。其主要結(jié)果如下:1.基于正常的培養(yǎng)條件下,斑馬魚仔魚的體長在72 hpf(受精后72小時)到96hpf體長的增長速率要大于96 hpf到120 hpf體長的增長速率,說明96 hpf是斑馬魚仔魚體長發(fā)育相對敏感的暴露窗口時期。除此之外,也檢測到斑馬魚GH/IGFs軸上的一些基因在96 hpf的表達量有顯著性。根據(jù)OECD斑馬魚胚胎急性毒性測試標準,本研究采取96 hpf作為評價化學(xué)品發(fā)育毒性的采樣時間點。2.將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度的雙酚A(BPA),全氟辛烷磺酸(PFOS),三(1,3-二氯異丙基)磷酸酯(TDCIPP),氯化鎘(CdCl_2),氯化汞(HgCl_2),乙酸鉛(PbAc)六種代表性的化學(xué)污染物中,暴露時間從2 hpf至96 hpf。在96 hpf時檢測斑馬魚仔魚的發(fā)育終點指標和GH/IGFs軸的基因表達。我們發(fā)現(xiàn)暴露于這六種化學(xué)品后,相比存活率,孵化率,畸形率,心率等指標,斑馬魚仔魚的體長是相對敏感的發(fā)育終點指標。伴隨著仔魚體長的減短,斑馬魚GH/IGFs軸基因的表達譜發(fā)生顯著變化,進一步通過相關(guān)性分析表明觀察到的仔魚體長的降低可能是由于GH/IGFs軸的基因表達失調(diào)導(dǎo)致的。因此,斑馬魚胚胎/仔魚的GH/IGFs軸基因表達譜可以用來評估化學(xué)物質(zhì)對GH/IGFs內(nèi)分泌系統(tǒng)的不良影響。
【圖文】：

魚胚胎/仔魚在 72, 96, 120 hpf 時的體長。每組 30 條仔魚為一個重復(fù)，每個濃度 3 個平行標準偏差 (mean±SD )。***P< 0.001 表示實驗組與對照組具有顯著性差異。ody length in zebrafish/larvae in 72, 96, 120 hpf. Results are given as mean values of three replicach exposure condition at 3 or 5 dpf. Values represent mean±SD. Significant difference from thedicated by ***P<0.001.驗統(tǒng)計了孵化后斑馬魚仔魚在 72, 96, 120 hpf 時的魚體長度，分析體長隨時間變化的規(guī)律，結(jié)果顯示：隨著時間的增加，斑馬魚的體趨勢（圖 1）。在 72, 96 和 120 hpf 時，斑馬魚仔魚的體長分別為 7±0.10 mm 和 3.88±0.08 mm。在 72 hpf 到 96 hpf 時，，體長的增長，在 96 hpf 到 120 hpf 時，體長的增長率為 0.05 mm/hpf。這表明斑長發(fā)育過程中，體長隨時間變化顯著性增加。并且體長的增長率在f 要大于 96 hpf 到 120 hpf。

14圖 2 在 2, 24, 48, 72, 96, 120 hpf 時斑馬魚胚胎/仔魚的 GH/IGFs 軸基因表達情況。每組 3 個平行。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準偏差 (mean±SD)。*P<0.05，**P< 0.01，***P< 0.001 表示實驗組與對照組具有顯著性差異。Figure 2 Relative gene expression in GH/IGFs aix in zebrafish in 2, 24, 48, 72, 96, 120 hpf. Values represent mean±S(n=3). Significant difference from the control group is indicated by *P < 0.05, **P < 0.01 and ***P<0.001 .
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：X171.5

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