【摘要】：枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)WB600平板涂布于含有不同濃度鉛溶液的固體培養(yǎng)基中(每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù)),過(guò)夜培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果顯示該菌株具有較高的鉛耐受性,其最高耐受性為900 mg/L Pb。采用添加新鮮濃縮菌液的方式,添加枯草芽孢桿菌WB600至魚(yú)用顆粒飼料中并使飼料中活菌水平最終達(dá)到10~9 CFU/g。以個(gè)體均勻的鯽魚(yú)(Carassius auratus)為試驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)設(shè)置8組,分別為Ⅰ組(空白對(duì)照組);Ⅱ組(益生菌對(duì)照組);益生菌治療Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ組分別為0.05 mg/L Pb+WB600、0.5 mg/L Pb+WB600、1.0 mg/L Pb+WB600;鉛暴露Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ組分別為0.05、0.5、1.0 mg/L Pb;每組3個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)60天后,收集血液、腦、鰓、肝胰臟、軀干腎、腸道以及背部肌肉等組織,檢測(cè)其鉛含量指標(biāo)、抗氧化酶活性指標(biāo)、免疫相關(guān)指標(biāo)以及觀察腸道組織顯微結(jié)構(gòu)的變化。對(duì)比鯽魚(yú)各組織鉛蓄積量變化,我們發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌WB600可顯著降低鯽魚(yú)各組織的鉛蓄積量,而隨著鉛濃度的提高,其對(duì)鯽魚(yú)腦及肌肉的鉛代謝影響逐漸減小。與對(duì)照組相比,益生菌陽(yáng)性對(duì)照組鯽魚(yú)肝胰臟及軀干腎超氧化物歧化酶(SOD)活性、還原性谷胱甘肽(GSH)含量、總抗氧化能力(T-AOC)均顯著提高,肝胰臟過(guò)氧化氫酶(CAT)活性降低,無(wú)顯著差異,軀干腎過(guò)氧化氫酶(CAT)活性顯著提高;血清免疫球蛋白(IgM)含量、溶菌酶(LZM)活力顯著提高;近端腸及遠(yuǎn)端腸絨毛高度、寬度及肌層厚度均顯著提高。在0.05 mg/L鉛暴露下,與鉛暴露組相比,益生菌治療組鯽魚(yú)肝胰臟及軀干腎SOD、CAT及GSH水平均顯著提高,肝胰臟T-AOC水平提高不顯著,軀干腎T-AOC水平提高顯著;在0.5 mg/L鉛暴露下,與鉛暴露組相比,益生菌治療組鯽魚(yú)肝胰臟及軀干腎GSH含量,軀干腎SOD及CAT活性均顯著提高,肝胰臟SOD、CAT、T-AOC及軀干腎T-AOC水平提高不顯著;在1 mg/L鉛暴露下,與鉛暴露組相比,益生菌治療組鯽魚(yú)肝胰臟及軀干腎GSH、T-AOC水平均顯著提高,軀干腎SOD、CAT活性顯著提高,肝胰臟SOD、CAT活性提高不顯著。在3種濃度鉛暴露下,與鉛暴露組相比,益生菌治療組鯽魚(yú)血清免疫球蛋白(IgM)含量、溶菌酶(LZM)活力及氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)活力均不同程度提高;其中,Ⅷ組IgM含量顯著高于Ⅶ組,Ⅳ組LZM活性顯著高于Ⅲ組,Ⅵ組ALAD活性顯著高于Ⅴ組;與鉛暴露組相比,益生菌治療組鯽魚(yú)遠(yuǎn)端腸及近端腸的絨毛高度、高度及肌層厚度均有不同程度增加,且具有較好的絨毛完整性,其中,遠(yuǎn)端腸絨毛高度、及肌層厚度有顯著差異。由此可見(jiàn),長(zhǎng)期處于不同濃度鉛暴露下,飼喂枯草芽孢桿菌WB600對(duì)鯽魚(yú)抗氧化酶活力、免疫相關(guān)指標(biāo)及腸道結(jié)構(gòu)均有積極影響,從而可以緩解鉛對(duì)鯽魚(yú)機(jī)體造成的毒性作用。
【圖文】：

圖 1 枯草芽孢桿菌 WB600 生長(zhǎng)曲線(xiàn)Fig.1 The growth curve of Bacillus subtilis WB6003.2 枯草芽孢桿菌對(duì)鉛的耐受性枯草芽孢桿菌 WB600 在不同濃度鉛溶液培養(yǎng)基中的活菌數(shù)量變化如下圖 2 所示，約在 200 mg/L Pb 之后隨著鉛濃度升高，活菌數(shù)逐漸降低，其最高耐受濃度可達(dá)到 900 mg/LPb。

圖 1 枯草芽孢桿菌 WB600 生長(zhǎng)曲線(xiàn)Fig.1 The growth curve of Bacillus subtilis WB600桿菌對(duì)鉛的耐受性菌 WB600 在不同濃度鉛溶液培養(yǎng)基中的活菌數(shù)量變化如 之后隨著鉛濃度升高，，活菌數(shù)逐漸降低，其最高耐受濃度
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：X503.225;X172

【參考文獻(xiàn)】

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