【摘要】：多環(huán)芳烴(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是一種普遍分布在自然環(huán)境中典型的具有持久性、高毒性有機(jī)污染物,微生物修復(fù)是去除環(huán)境中PAHs的主要手段之一。其中菲是PAHs中的典型模式化合物。在這項(xiàng)研究中,首先從被石油污染的土壤中分離出菲降解菌株P(guān)seudomonas aeruginosa PH1,并以其為研究對(duì)象構(gòu)建得到強(qiáng)化環(huán)裂解雙加氧酶的銅綠假單胞工程菌P.aeruginosa PH2;同時(shí)將包含編碼羥基化雙加氧酶的四個(gè)基因的兩個(gè)重組載體共轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)中,構(gòu)建得到強(qiáng)化羥基化雙加氧酶的大腸桿菌工程菌E.coli HY1。其中E.coli HY1含有一個(gè)末端雙加氧酶模塊和一個(gè)電子傳遞鏈模塊,而P.aeruginosa PH2含有鄰苯二酚1,2-雙加氧酶模塊。將兩株工程菌組成人工混菌體系,分別為以100 mg/L菲為唯一碳源和能源、100 mgL~(-1)菲和2%石油的混合物為底物和以100 mg/L菲和2%正十六烷為底物進(jìn)行降解實(shí)驗(yàn),人工混菌體系在不同底物中對(duì)菲的降解率分別為71.05%,79.9%和87.92%;相比之下野生降解菌P.aeruginosa PH1對(duì)菲的降解率分別僅為44.7%,43.35%和81.43%,結(jié)果表明由工程E.coli HY1和P.aeruginosa PH2組成的人工混菌體系構(gòu)建成功,且具有較高的菲降解能力。根據(jù)檢測(cè)到的代謝物及結(jié)合酶活探究混菌體系對(duì)菲的代謝過程,其中菲的初始氧化過程主要通過E.coli HY1釋放菲雙加氧酶將部分菲轉(zhuǎn)化為9,10-二羥基菲或1,2-二羥基菲,P.aeruginosa PH2起輔助作用;苯環(huán)裂解主要由P.aeruginosa PH2負(fù)責(zé),E.coli HY1可能通過其它途徑進(jìn)行苯環(huán)裂解;隨后,環(huán)裂解的中間代謝物進(jìn)入中心路徑,代謝物通過進(jìn)一步的轉(zhuǎn)化進(jìn)入TCA循環(huán)。研究結(jié)果表明,人工混菌體系的構(gòu)建為PAHs的降解提供了一個(gè)更有潛力的方法。
【圖文】：

2圖 1-1 16 種優(yōu)先監(jiān)控的多環(huán)芳烴結(jié)構(gòu)圖Figure 1-1 Structure of 16 preferentially monitored PAHs1.1.2 多環(huán)芳烴污染物治理方式目前，PAHs 在環(huán)境中的釋放速度已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了環(huán)境系統(tǒng)本身的自凈能力，如何有效修復(fù) PAHs 污染物引起了廣泛的研究。對(duì)環(huán)境中 PAHs 的傳統(tǒng)治理方法有物理法、化學(xué)法和生物法，其中物理法主要通過填埋、焚燒等手段來治理污染物實(shí)施起來有較大的局限性且容易造成二次污染。化學(xué)法主要利用有機(jī)溶劑的萃取或淋洗來處理污染物，此方法對(duì)于高濃度污染物效率較高，但操作復(fù)雜也易引起二次污染。總之，，化學(xué)法和物理法大多數(shù)只是將 PAHs 從一個(gè)地方轉(zhuǎn)移到另一個(gè)地方或

臭假單胞菌 NCIB 9816 (水楊酸途徑)、糞產(chǎn)堿菌 AFK2 (鄰苯二菲的降解途徑[27, 28]oposed metabolic pathways of phenanthrene in Pseudomonas putida te pathway) and Alcaligenes faecalis AFK2 (protocatechuate pathway株種，菲被羥基化后 C 的初始位置不同，后續(xù)降解也會(huì)ycobacterium vanbaalenii PYR-1 降解菲時(shí)存在 3 條路徑，羥基化后通過鄰苯二甲酸途徑降解；二是菲環(huán)的 9,10 位順式-9,10-二氫二醇菲；三是受單加氧酶的攻擊形成 9,1見圖 1-3[29]。
【學(xué)位授予單位】：天津大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：X172

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2596175