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典型POPs對(duì)雄性翡翠貽貝毒理效應(yīng)的蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-19 00:28

  本文選題:翡翠貽貝 + 。 參考:《海南大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:滴滴涕(Dichlorodiphenyltrichloroethane, DDT)和苯并芘(Benzo(a)pyrene, BaP)均是典型持久性有機(jī)污染物(POPs),被認(rèn)為是廣泛存在的環(huán)境雌激素,由于其具有持久性、半揮發(fā)性或難揮發(fā)性、生物蓄積性、高毒性和遠(yuǎn)距離遷移性,而引起世界各國(guó)的廣泛關(guān)注。本研究選擇苯并芘和滴滴涕作為暴露污染物,以熱帶海洋重要模式生物翡翠貽貝(Perna viridis)為研究對(duì)象,采用代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),探究?jī)煞N典型POPs單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)雄性翡翠貽貝鰓及雄性生殖腺的毒理效應(yīng),揭示其毒理機(jī)制,為早期預(yù)警監(jiān)測(cè)兩種污染物和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。 1.BaP和DDT及其聯(lián)合作用對(duì)雄性翡翠貽貝鰓組織的代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究 通過對(duì)雄性翡翠貽貝進(jìn)行單獨(dú)暴毒BaP10μg/L、 DDT10μg/L及聯(lián)合暴毒BaP10μg/L+DDT10μg/L,各組均處理7天后,基于核磁共振技術(shù)的代謝組學(xué)分析結(jié)果表明:BaP單獨(dú)暴露主要影響雄翡翠貽貝鰓組織的滲透壓調(diào)節(jié),而DDT單獨(dú)暴露主要影響雄翡翠貽貝鰓組織的滲透壓調(diào)節(jié)和能量代謝過程。BaP和DDT聯(lián)合暴毒后雄性翡翠貽貝鰓組織未檢測(cè)到明顯的代謝物變化。利用基于雙向電泳技術(shù)和質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合的方法來研究雄性翡翠貽貝鰓組織的蛋白質(zhì)表達(dá)譜的變化,結(jié)果顯示:BaP暴露使雄翡翠貽貝鰓組織發(fā)生變化的蛋白質(zhì)涉及細(xì)胞凋亡,蛋白質(zhì)消化和能量代謝等生物過程;DDT暴露使雄翡翠貽貝鰓組織變化的蛋白質(zhì)涉及氧化應(yīng)激,蛋白質(zhì)消化,能量代謝,細(xì)胞骨架和結(jié)構(gòu)等生物過程;BaP和DDT聯(lián)合暴露后,雄翡翠貽貝鰓組織響應(yīng)的蛋白質(zhì)涉及氧化應(yīng)激,蛋白質(zhì)消化,能量代謝,細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞凋亡,細(xì)胞骨架和結(jié)構(gòu)等生物過程。 2.BaP和DDT及其聯(lián)合作用對(duì)雄性翡翠貽貝生殖腺的代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究 對(duì)翡翠貽貝進(jìn)行BaP10μg/L, DDT10μg/L及BaP10μg/L+DDT10μg/L暴毒7天后,基于核磁共振技術(shù)的代謝組學(xué)分析結(jié)果表明:BaP單獨(dú)暴露組雄翡翠貽貝的生殖腺?zèng)]有明顯的代謝物變化。而DDT單獨(dú)暴露和BaP與DDT聯(lián)合暴露均主要影響雄翡翠貽貝生殖腺組織的滲透壓調(diào)節(jié)和能量代謝過程。與DDT單獨(dú)暴露組相比,聯(lián)合暴露組支鏈氨基酸、丙氨酸,谷氨酸,甘氨酸、乙酰乙酸、琥珀酸、龍蝦肌堿、精氨酸、未知代謝物(3.53ppm)和ATP均發(fā)生變化,且變化趨勢(shì)相同。表明BaP和DDT聯(lián)合暴毒組的代謝物變化主要是由DDT引起的,DDT對(duì)雄翡翠貽貝生殖腺代謝物的影響較大。基于雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)分析結(jié)果表明:BaP暴露后雄翡翠貽貝生殖腺響應(yīng)的蛋白質(zhì)的功能涉及信號(hào)傳導(dǎo)、蛋白質(zhì)分解代謝、物質(zhì)和能量代謝、氧化應(yīng)激、精子的發(fā)生和細(xì)胞凋亡等生物學(xué)過程;DDT暴露后雄翡翠貽貝生殖腺響應(yīng)的蛋白質(zhì)功能涉及細(xì)胞形成、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、能量代謝、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞骨架、氧化應(yīng)激、信號(hào)傳導(dǎo)、和細(xì)胞凋亡等生物學(xué)過程:BaP和DDT聯(lián)合暴露后,雄翡翠貽貝生殖腺變化的蛋白質(zhì)涉及細(xì)胞骨架、細(xì)胞形成、氧化應(yīng)激、核苷酸代謝、轉(zhuǎn)錄因子、精子的發(fā)生、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、物質(zhì)和能量代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、和細(xì)胞凋亡等生物學(xué)過程。該研究表明,聯(lián)合蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)的方法可以更好地解釋環(huán)境污染物對(duì)生物體的毒理機(jī)制。
[Abstract]:DDT (Dichlorodiphenyltrichloroethane, DDT) and benzo pyrene (Benzo (a) pyrene, BaP) are typical persistent organic pollutants (POPs), is considered to be the environmental estrogens widely exist, because of its persistence, semi volatile or non-volatile, bioaccumulation and high toxicity and long range transport, and caused widespread concern all over the world. This research chooses benzopyrene and DDT as exposure to tropical marine pollutants, an important model organism in mussel (Perna viridis) as the research object, using metabonomics and proteomics research, two typical POPs single and combined effects of toxicological effects on male mussel gills and male gonads, revealing its toxicological mechanism, provide scientific basis for early warning and risk assessment of two kinds of pollutants.
Metabolomics and proteomics of 1.BaP and DDT and their combined effects on the gill tissue of male jadeite mussel
By BaP10 g/L alone exposure toxicity on male mussel, DDT10 g/L and BaP10 g/L+DDT10 combined with drug exposure groups were g/L, 7 days after treatment, metabolic NMR analysis results show that: Based on the penetration of BaP exposure mainly affects male mussel gill tissue osmotic pressure regulation, while DDT alone exposure the main effects of male mussel gill tissue pressure regulation and energy metabolism of.BaP and DDT combined with drug exposure after male mussel gill tissue was not detected metabolites change significantly. The change of protein expression profile method, two-dimensional electrophoresis and mass spectrometry detection technology based on the combination of male mussel gill tissue showed that: BaP exposure to male mussel gill tissue changes of proteins involved in apoptosis, protein digestion and energy metabolism and other biological processes; DDT exposure to male mussel gill Histological changes of proteins involved in oxidative stress, protein metabolism, energy metabolism, cytoskeleton structure and biological processes; BaP and DDT after exposure, the male mussel gill tissue response proteins involved in oxidative stress, protein metabolism, energy metabolism, cell growth and apoptosis, cytoskeleton structure and biological processes.
Metabolic and proteomic studies of 2.BaP and DDT and their combined effects on the reproductive glands of the male jadeite Mytilus edulis
BaP10 g/L of DDT10 g/L and mussel, BaP10 mu g/L+DDT10 mu g/L 7 days after drug exposure, metabolic NMR analysis results show that: BaP based on single exposure group of male genital glands of Perna viridis NO metabolites change obviously. While DDT alone exposure and BaP and DDT joint exposure were main influence the male gonad tissue penetration of mussel pressure regulation and energy metabolism. Compared with DDT alone exposure group, combined exposure group of branched chain amino acids, alanine, glutamic acid, glycine, acetoacetate, succinate, homarine, arginine, unknown metabolites (3.53ppm) and ATP were changed, and have the same trend. That metabolite the changes of BaP and DDT combined with drug exposure group is mainly caused by DDT, the effect of DDT on male reproductive gland mussel metabolites greatly. Two dimensional electrophoresis combined with mass spectrometry detection study based on the results of the analysis BaP showed that after exposure to the male gonad response of mussel protein function involving signal transduction, protein metabolism, energy metabolism, oxidative stress, and cell apoptosis after exposure to DDT sperm; male genital gland response of mussel protein functions involved in cell formation, protein transport, energy metabolism, transcription factor, cytoskeleton, oxidative stress, signal transduction, and cell apoptosis in BaP and DDT after exposure, the protein changes of the gonads of the male mussels involved in cytoskeleton, cell formation, oxidative stress, nucleotide metabolism, transcription factor, spermatogenesis, protein transport, material and energy metabolism. Signal transduction, and cell apoptosis. The study shows that the methodology and metabonomics combined with proteomics can better explain the environmental pollutants on organisms The mechanism of toxicology.

【學(xué)位授予單位】:海南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:X171.5

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本文編號(hào):1770791

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