發(fā)布時間：2018-02-14 10:47

  本文關(guān)鍵詞： 餐廚廢棄油脂 生物柴油 米根霉 脂肪酶 畢赤酵母 轉(zhuǎn)酯化反應　出處：《暨南大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：利用脂肪酶將餐廚廢棄油脂轉(zhuǎn)化為生物柴油能夠?qū)崿F(xiàn)餐廚垃圾的綠色化、資源化利用。本研究構(gòu)建了能表達脂肪酶的基因重組畢赤酵母,利用重組酵母表達的脂肪酶替代傳統(tǒng)化學催化劑,以綠色無毒的乙醇替代甲醇作為�；荏w進行轉(zhuǎn)酯化反應生產(chǎn)生物柴油。本研究從米根霉(Rhizopus oryzae)CICC3005 c DNA文庫擴增得到脂肪酶基因(proROL),克隆進畢赤酵母表達載體pGAPZαA,電轉(zhuǎn)入畢赤酵母(Pichia pastoris)X-33中,篩選得到重組脂肪酶活性較高的陽性克隆Pichia pastoris-proROL,并對所表達的重組脂肪酶的酶學特性進行了研究。重組脂肪酶最高酶活為426.6 U/mL;最適pH為pH 8.0,酶活在pH 6.0-8.0范圍內(nèi)穩(wěn)定;最適溫度為30℃,酶活在30-35℃之間穩(wěn)定。重組脂肪酶酶活被金屬離子Mn~(2+)、Zn~(2+)、Na+、K+促進,被0.001%的Triton X-100和0.01%的SDS促進,對甲醇、甲苯和正己烷具有較高的耐受性。重組脂肪酶對8C和14C碳鏈長度的底物表現(xiàn)出較強的偏好性。以餐廚廢棄油脂為原料,以無水乙醇為酰基受體,以重組脂肪酶為催化劑進行轉(zhuǎn)酯化反應生產(chǎn)生物柴油,研究了水含量、醇油摩爾比和酶添加量對轉(zhuǎn)酯化反應效率的影響,在水含量為5%,醇油摩爾比為4:1,酶添加量為10%的條件下轉(zhuǎn)酯化反應效率最高,此時生物柴油最高得率為49%。本研究構(gòu)建了能表達脂肪酶的重組畢赤酵母,并以重組脂肪酶替代傳統(tǒng)化學催化劑,以乙醇替代甲醇作為酰基受體生產(chǎn)生物柴油,減少了化學試劑的使用,能節(jié)約成本,降低對環(huán)境的污染,為今后餐廚垃圾的綠色化、資源化利用開辟了一條新途徑。
[Abstract]:This study constructed a recombinant Pichia pastoris which can express lipase . The recombinant lipase was used instead of traditional chemical catalyst . The optimum temperature was 30 鈩，

本文編號：1510532