本文關(guān)鍵詞：大果山楂黃酮類物質(zhì)的提取及其抗氧化性和降血脂功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：大果山楂(Malus domeri(Bois)Chev.)屬于南山楂(Crataegus cuneata Sieb. etZucc.)一種,是由傳統(tǒng)的小果南山楂經(jīng)過(guò)選育嫁接而得。大果山楂在廣西種植已有八十多年歷史,主要產(chǎn)地位于廣西東北部,尤其是賀州地區(qū)和桂林地區(qū)。果粒大是桂東北地區(qū)大果山楂的主要特征之一,其果實(shí)表面光滑鮮亮,味道酸甜可口。大果山楂富含黃酮類物質(zhì),黃酮類化合物天然無(wú)毒,具有多種生物活性。本文以桂東、桂北、桂南四個(gè)產(chǎn)地大果山楂為研究對(duì)象,采用響應(yīng)面法研究了大果山楂中黃酮類物質(zhì)的提取工藝,并對(duì)其抗氧化性及降血脂功能開展研究。以小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,建立小鼠高脂血癥模型,探討了大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)高脂血癥小鼠相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響,由此評(píng)價(jià)大果山楂黃酮類物質(zhì)抗氧化和降血脂作用,為合理利用這—資源開發(fā)功能性食品提供一定的參考依據(jù)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：1、本研究在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用Box-Behnken響應(yīng)面法,建立大果山楂黃酮類物質(zhì)提取量回歸方程,模型的擬合度好。采用上述優(yōu)化提取條件得到參數(shù)工藝：乙醇體積分?jǐn)?shù)50%,提取溫度70℃,提取時(shí)間3.5h,料液比1：18。重復(fù)實(shí)驗(yàn),大果山楂黃酮類物質(zhì)提取量平均值為22.68mg/g。2、經(jīng)鹽酸-鋅粉實(shí)驗(yàn)、醋酸鉛反應(yīng)、三氯化鐵試驗(yàn)和堿性酒石酸銅試驗(yàn),證明大果山楂提取物中含有黃酮類、多酚類、多糖類物質(zhì)及有機(jī)酸。昭平、丹龍、新里、平樂(lè)四個(gè)產(chǎn)地大果山楂中黃酮類物質(zhì)含量分別為22.68mg/g、25.02mg/g、23.89mg/、21.25mg/g。不同產(chǎn)地大果山楂鮮果功能活性物質(zhì)含量排序依次為：丹龍新里昭平平樂(lè)。大果山楂與小果山楂相比,其多酚類和黃酮類含量?jī)?yōu)于小果山楂,但多糖含量低于小果山楂。3、大果山楂黃酮類物質(zhì)具有一定的抗氧化能力,對(duì)·OH和DPPH·自由基均有良好的清除作用。昭平、丹龍、新里、平樂(lè)四個(gè)產(chǎn)地大果山楂黃酮類提取液體外·OH自由基清除率分別為59.26%、63.93%、61.18%、53.11%,DPPH·清除率分別為81.38%、86.25%、83.75%、79.75%。清除率由大到小依次為：丹龍新里昭平平樂(lè),并且隨著提取液中黃酮類含量的增加,對(duì)自由基清除能力也逐漸增強(qiáng),但是當(dāng)含量達(dá)到0.2mg后,自由基的清除率不再增加。因此提取液對(duì)自由基的清除率與其中黃酮類物質(zhì)含量相關(guān),但不具有顯著的量效關(guān)系。4、大果山楂黃酮類物質(zhì)具有體外結(jié)合膽酸鹽的能力。以考來(lái)烯胺作對(duì)照,丹龍、新里、昭平三個(gè)產(chǎn)地大果山楂黃酮類提取液結(jié)合�；悄懰徕cSTC、甘氨膽酸鈉SGC和膽酸鈉SC的能力優(yōu)于平樂(lè)產(chǎn)地提取液。5、丹龍產(chǎn)地大果山楂黃酮類物質(zhì)結(jié)合膽酸鹽能力最佳,相對(duì)降脂藥物考來(lái)烯胺,其結(jié)合STC、SGC和SC的對(duì)照值分別為38.4%、46.5%、42.8%,并且結(jié)合膽酸鹽的能力與反應(yīng)時(shí)間及提取液中黃酮類物質(zhì)含量相關(guān)。在反應(yīng)開始時(shí)提取液結(jié)合三種膽酸鹽的速度較快,反應(yīng)時(shí)間40min內(nèi)已基本到達(dá)平衡。當(dāng)提取液中黃酮類初始含量在0.04mg～0.16mg范圍內(nèi)時(shí),對(duì)膽酸鹽的結(jié)合率較高,并且隨著黃酮類初始質(zhì)量濃度的增大而增大。當(dāng)黃酮類物質(zhì)初始含量達(dá)到0.20mg時(shí)提取液對(duì)膽酸鹽的結(jié)合作用趨于平緩,最后達(dá)到一個(gè)極大值而不再變化。6、以SD小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,建立小鼠高脂血癥模型,研究分析了大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)高脂血癥小鼠相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響。大果山楂黃酮類物質(zhì)降血脂功能：實(shí)驗(yàn)小鼠高脂組與空白組相比,血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量明顯升高,差異極顯著(P0.001),說(shuō)明建模成功。血脂康能非常顯著的降低血清TC、TG值(P0.01),且能升高HDLC、降低LDLC,因此說(shuō)明血脂康具有較好的降脂作用,可以作為實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照藥物。給藥后,大果山楂黃酮低、中、高劑量組均能使小鼠血清和肝臟組織中TC、TG的含量下降,且高劑量組(300mg/kgbw/d)作用顯著(P0.05)。大果山楂黃酮對(duì)于血清中HDLC含量和LDLC含量無(wú)顯著影響(P0.05)。大果山楂黃酮對(duì)高脂血癥小鼠體重和臟器指數(shù)均有一定降低作用,但效果不顯著。7、大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)機(jī)體總抗氧化能力和抗氧化酶的活力影響：與正常組相比,實(shí)驗(yàn)小鼠高脂模型組的血清SOD和T-AOC值顯著降低,說(shuō)明高脂組體內(nèi)總抗氧化能力降低。大果山楂黃酮各組均能提高血清SOD和T-AOC值,且呈一定的量效關(guān)系,高劑量組(300mg/kgbw/d)的作用顯著(P0.05)。對(duì)于肝臟組織中的SOD值,中劑量和高劑量組作用非常顯著(P0.01),但T-AOC值在肝臟組織中變化較小,各組之間作用差異不顯著(P0.05)。
【關(guān)鍵詞】：大果山楂 黃酮類物質(zhì) 提取 抗氧化 降血脂
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：TQ28;TQ460.1
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-15
• 第一章 緒論15-27
• 1.1 大果山楂簡(jiǎn)介15
• 1.2 大果山楂主要活性成分15-16
• 1.2.1 黃酮類化合物15-16
• 1.2.2 熊果酸16
• 1.2.3 單體有機(jī)酸類16
• 1.2.4 其他成分16
• 1.3 大果山楂藥理功能16-18
• 1.3.1 心血管系統(tǒng)功能17
• 1.3.2 對(duì)自由基的清除作用17
• 1.3.3 胃腸系統(tǒng)功能17
• 1.3.4 護(hù)肝作用17-18
• 1.3.5 抑菌作用18
• 1.3.6 對(duì)免疫系統(tǒng)的影響18
• 1.4 大果山楂黃酮研究進(jìn)展18-19
• 1.5 植物黃酮常見(jiàn)的提取分離方法19-21
• 1.5.1 提取方法19-21
• 1.5.2 分離方法21
• 1.6 植物黃酮的定量分析方法21-22
• 1.7 植物黃酮生物活性的研究進(jìn)展22-25
• 1.7.1 植物黃酮的抗氧化活性22-23
• 1.7.2 植物黃酮的降血脂活性23-24
• 1.7.3 植物黃酮的調(diào)節(jié)心腦血管活性24
• 1.7.4 植物黃酮的抗癌抗腫瘤活性24-25
• 1.7.5 植物黃酮的抗菌活性25
• 1.7.6 植物黃酮的其他生物活性25
• 1.8 課題研究的目的、意義及主要內(nèi)容25-27
• 第二章 響應(yīng)面法優(yōu)化大果山楂中黃酮類物質(zhì)的提取工藝27-42
• 2.1 材料與儀器27-28
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器27
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑27-28
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)材料28
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法28-31
• 2.2.1 原料預(yù)處理28
• 2.2.2 植物化學(xué)鑒定28
• 2.2.3 大果山楂提取液制備28-29
• 2.2.4 黃酮類含量測(cè)定方法29
• 2.2.5 多酚類含量測(cè)定方法29
• 2.2.6 多糖含量測(cè)定方法29
• 2.2.7 不同有機(jī)溶劑提取對(duì)大果山楂中黃酮類物質(zhì)提取量的影響29-30
• 2.2.8 單因素實(shí)驗(yàn)30
• 2.2.9 響應(yīng)面法優(yōu)化大果山楂黃酮類物質(zhì)提取工藝30
• 2.2.10 不同產(chǎn)地大果山楂中功能活性成分含量比較分析30-31
• 2.3 結(jié)果與分析31-40
• 2.3.1 植物化學(xué)定性鑒定結(jié)果31
• 2.3.2 黃酮類含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線31
• 2.3.3 多酚類含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線31-32
• 2.3.4 多糖含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線32
• 2.3.5 不同有機(jī)溶劑提取能力比較32-33
• 2.3.6 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-35
• 2.3.7 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析35-39
• 2.3.8 不同產(chǎn)地大果山楂中活性成分含量比較分析結(jié)果39-40
• 2.4 討論40-41
• 2.5 本章小結(jié)41-42
• 第三章 大果山楂黃酮類物質(zhì)抗氧化及降血脂作用研究42-53
• 3.1 材料與儀器42-43
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器42-43
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑43
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)材料43
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法43-46
• 3.2.1 大果山楂黃酮類物質(zhì)抗氧化能力測(cè)定43-44
• 3.2.2 大果山楂黃酮類物質(zhì)體外結(jié)合膽酸鹽實(shí)驗(yàn)44-46
• 3.3 結(jié)果與分析46-51
• 3.3.1 大果山楂黃酮類物質(zhì)抗氧化能力測(cè)定結(jié)果46-48
• 3.3.2 大果山楂黃酮類物質(zhì)提取液體外結(jié)合膽酸鹽實(shí)驗(yàn)結(jié)果48-51
• 3.4 討論51-52
• 3.5 本章小結(jié)52-53
• 第四章 大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)高脂血癥小鼠血脂和抗氧化指標(biāo)影響53-62
• 4.1 材料與儀器53-54
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器53
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)材料53-54
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法54-56
• 4.2.1 建模高脂乳劑的配制54
• 4.2.2 高脂血癥模型建立54
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與樣品劑量設(shè)計(jì)54-55
• 4.2.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法55
• 4.2.5 檢測(cè)指標(biāo)55-56
• 4.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)56
• 4.3 結(jié)果與分析56-60
• 4.3.1 實(shí)驗(yàn)期間小鼠的基本狀況56
• 4.3.2 小鼠高脂血模型的建立56
• 4.3.3 大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)小鼠體重的影響56-57
• 4.3.4 大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)高脂血癥小鼠血脂水平的影響57-58
• 4.3.5 大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)高脂血癥小鼠抗氧化水平指標(biāo)的影響58-59
• 4.3.6 大果山楂黃酮類物質(zhì)對(duì)高脂血癥小鼠肝臟指數(shù)的影響59-60
• 4.4 討論60
• 4.5 本章小結(jié)60-62
• 第五章 結(jié)論與展望62-65
• 5.1 結(jié)論62-63
• 5.2 展望63-65
• 參考文獻(xiàn)65-71
• 致謝71-72
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文情況72

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：255905